猪圆环病毒2型间接ELISA抗体检测试剂盒的研制及初步应用

›› 2011, Vol. 38 ›› Issue (3): 120-123.

猪圆环病毒2型间接ELISA抗体检测试剂盒的研制及初步应用

胡小华，李刚，史利军，张坤，贾凤芹

（中国农业科学院北京畜牧兽医研究所，北京 100193）

收稿日期:1900-01-01 修回日期:1900-01-01 出版日期:2011-03-20 发布日期:2011-03-20
通讯作者: 李刚

Development and Primary Application of Indirect ELISA Antibody Detection Kit for Porcine Circovirus Serotype 2

HU Xiao-hua, LI Gang, SHI Li-jun, ZHANG Kun, JIA Feng-qin

(Institute of Animal Sciences, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100193, China)

Received:1900-01-01 Revised:1900-01-01 Online:2011-03-20 Published:2011-03-20
Contact: LI Gang

摘要/Abstract

摘要： 以大肠杆菌原核表达系统表达的猪圆环病毒2型Cap蛋白为抗原，建立猪圆环病毒2型间接ELISA检测方法，优化ELISA反应条件，研制猪圆环病毒2型ELISA抗体检测试剂盒。与商品化试剂盒相比，该检测试剂盒敏感性、特异性和符合率分别为95.12%、92.86%和94.55%；同时与猪圆环病毒1型（PCV1）、猪瘟病毒（CSFV）、猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）等多种病毒阳性血清无交叉反应。试剂盒具有较好的重复性，在-20 ℃至少可保存1年以上，将其应用于临床血清样品的检测，结果安徽、广东、广西采样猪场的PCV2阳性率分别为100%、48.39%、100%。

关键词: 猪圆环病毒2型; Cap蛋白; 间接ELISA; 抗体检测试剂盒

Abstract: Using the purified Cap recombinant protein as coating antigen of indirect ELISA,detecting kit was developed by the optimal reaction conditions of ELISA. In comparative experiments with commercial ELISA kit for detection of 55 serum samples, the sensitivity, specificity and coincidence rate of the established ELISA method were 95.12%，92.86% and 94.55% respectively. The established ELISA method had no cross-reactivity with the reference sera of other swine viruses (PCV1, CSFV, PRRSV, PPV, PRV). The intra-assay variation coefficient was 2.3% to 4.5%, inter-assay variation coefficient was 1.12% to 2.63% respectively. The ELISA antibody detection kit could be stable at －20 ℃ at least for one year. 66 serum samples of three pig farms from Anhui, Guangdong, Guangxi were detected by detection kit, and the positive rate was 100%, 48.39%, 100% respectively.

Key words: porcine circovirus serotype 2; capsid protein; indirect ELISA; antibody detection kit

中图分类号:

S854.4

胡小华;李刚;史利军;张坤;贾凤芹. 猪圆环病毒2型间接ELISA抗体检测试剂盒的研制及初步应用[J]. , 2011, 38(3): 120-123.

HU Xiao-hua;LI Gang;SHI Li-jun;ZHANG Kun;JIA Feng-qin. Development and Primary Application of Indirect ELISA Antibody Detection Kit for Porcine Circovirus Serotype 2[J]. , 2011, 38(3): 120-123.

[1]	任建乐, 林铱婷, 姬康, 谭姗姗, 陈新新, 晋怡, 王颖, 牛胜, 梁立滨, 李俊平, 赵宇军, 田文霞. A型塞内卡病毒VP2蛋白多克隆抗体的制备及间接ELISA检测方法的建立[J]. 中国畜牧兽医, 2024, 51(2): 678-688.
[2]	张芳源, 蔺雅婷, 杨大为, 陈虎, 李桂梅, 单虎. 非洲猪瘟病毒P30蛋白原核表达及间接ELISA检测方法建立[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(5): 2012-2022.
[3]	姜海军, 王丹, 郭禹, 韦莉, 侯磊, 王菁, 朱珊珊, 刘爵. 猪圆环病毒3型Cap重组鞭毛蛋白融合表达及其免疫原性研究[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(5): 2044-2052.
[4]	刘新月, 栗利芳, 王振豹, 张文亮, 张欣, 赵洪涛, 李鹏宇, 郑昊天, 肖进, 齐鹏. 猪圆环病毒2型合成肽疫苗佐剂筛选与免疫保护性研究[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(3): 1068-1080.
[5]	牛小杰, 徐明国, 肖莉, 刘文豪, 陈创夫, 王勇. 鸡白痢沙门氏菌IPAJ蛋白的表达纯化、多克隆抗体制备及ELISA方法的建立[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(3): 1218-1228.
[6]	周文锋, 张英婕, 白一涵, 张露华, 麦金辉, 王乃东, 杨毅, 湛洋, 王东亮. 猪圆环病毒2型全基因组序列分析及Cap蛋白CTL表位预测[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(2): 656-665.
[7]	张妍, 战力源, 姜福洁, 马红霞, 孔令聪. 牛支原体重组蛋白P48原核表达、多克隆抗体制备及间接ELISA抗体检测方法的建立[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(11): 4621-4631.
[8]	张凯, 张春平, 戈胜强, 孙春喜, 程杰, 伏春雨, 王刚, 牛星, 彭军. 非洲猪瘟病毒p22蛋白表达、多克隆抗体制备及间接ELISA方法的建立[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(1): 270-279.
[9]	韩瑞, 杨行, 张文波, 陈佳玲, 周晓丽. 猪链球菌自溶素的原核表达及其抗体间接ELISA检测方法的建立[J]. 中国畜牧兽医, 2022, 49(9): 3508-3519.
[10]	张文燕, 王亚文, 袁晨, 冯亚文, 滕召剑, 商佳亮, 逯纪成, 宋勤叶. 基于非洲猪瘟病毒截短p72蛋白的间接ELISA抗体检测方法的建立[J]. 中国畜牧兽医, 2022, 49(7): 2688-2697.
[11]	周伟, 刘旭平, 张艳敏, 彭雯娟, 赵亮, 谭文松. 无血清悬浮培养PK-15细胞及其对猪圆环病毒2型增殖的影响[J]. 中国畜牧兽医, 2022, 49(6): 2397-2405.
[12]	田广原, 王宇琛, 周雅坪, 郭婷, 赵红梅, 赵逢淼, 孙雅婕, 卞宇晨, 于佳梁, 周雨霞. 绵羊肺炎支原体P60_58aa-928aa蛋白的原核表达及间接ELISA方法的建立[J]. 中国畜牧兽医, 2022, 49(5): 1960-1969.
[13]	羊露露, 李安琪, 袁生, 黄良宗, 黄淑坚, 温峰, 郭锦玥. 广东省4株PCV2型分离株全基因组进化分析[J]. 中国畜牧兽医, 2022, 49(3): 1015-1023.
[14]	张敬寒, 李枝兰, 韩佃刚, 何帅, 刘金华, 吕念词, 邹丰才, 柴俊, 张以芳. 稳定表达IL-10的PK-15细胞的构建及其在PCV2增殖中的应用[J]. 中国畜牧兽医, 2022, 49(3): 1085-1095.
[15]	孙庆帅, 陈燕虹, 姚伦, 孙琪, 于学祥, 吴昊, 阮胜男, 雷铭楷, 严伟东, 何启盖. 猪圆环病毒2型和3型混合感染引起的母猪繁殖障碍诊治[J]. 中国畜牧兽医, 2022, 49(10): 3982-3993.