2拷贝SLT-ⅡvB在猪霍乱沙门氏菌C500crp-/asd-缺失株中的表达及小鼠免疫试验

›› 2010, Vol. 37 ›› Issue (7): 70-73.

2拷贝SLT-ⅡvB在猪霍乱沙门氏菌C500crp-/asd-缺失株中的表达及小鼠免疫试验

徐引弟，王治方，朱文豪，郭成留

(河南省农业科学院畜牧兽医研究所，郑州 450002)

收稿日期:1900-01-01 修回日期:2010-01-19 出版日期:2010-07-20 发布日期:2010-07-20

Expression of 2 Copies SLT-ⅡvB Gene in C500crp-/asd- Mutant of Salmonella choleraesuis and Immune Test on Mice

XU Yin-di, WANG Zhi-fang, ZHU Wen-hao, GUO Cheng-liu

（Institute of Animal Husbandry and Veterinary Medicine, Henan Academy ofAgricultural Sciences, Zhengzhou 450002, China）

Received:1900-01-01 Revised:2010-01-19 Online:2010-07-20 Published:2010-07-20

摘要/Abstract

摘要： 为研制仔猪副伤寒—猪水肿病新型二联疫苗，从pMDSLT-Ⅱ中扩增去信号肽后的SLT-ⅡvB基因，将2拷贝SLT-ⅡvB与pYA3493连接。阳性质粒pYA2B电转化C500crp-/asd-缺失株，进行SDS-PAGE电泳和Western blotting，重组菌C500crp-/asd-(pYA2B)口服免疫小鼠，腹腔攻10 LD50的猪霍乱沙门氏菌强毒C78-1和2 LD50的猪水肿大肠杆菌强毒ED3株，计算攻毒保护率。结果显示，2 SLT-ⅡvB在C500crp-/asd-缺失株中获得了表达。C500crp-/asd-(pYA2B)免疫组对ED3的攻击能提供60%保护，而对照组不能提供任何保护。2组对C78-1攻击均提供100%保护，为研制仔猪副伤寒—猪水肿病二联疫苗及进一步提高免疫效果提供依据。

关键词: 猪霍乱沙门氏菌C500crp-/asd-缺失株; 宿主载体平衡致死系统; 2拷贝SLT-ⅡvB; 基因表达; 免疫反应

Abstract: In order to develop novel piglet’s Paratyphoid-ED bivalent vaccine, SLT-ⅡvB gene without signal peptide was amplified from pMDSLT-Ⅱ and subcloned into pYA3493. pYA2B was electroporated into C500crp-/asd- mutant. SDS-PAGE and Western blotting were done. Mice were i.p. immunized with C500crp-/asd-(pYA2B) and C500crp-/asd-(pYA3493) and i.p. challenged with 2 LD50 ED3 and 10 LD50 C78-1. 2 SLT-ⅡvB was expressed in C500crp-/asd- mutant. The C500crp-/asd-(pYA2B) immunized group was 60% protected mice against ED3 challenging and control groups couldn’t protect mice. All immunized groups induced 100% protected mice against C78-1 challenging. These results provided base for developing piglet’s Paratyphoid-ED bivalent vaccine and further improving of immunity effect.

Key words: S. choleraesuis C500crp-/asd- mutant; balanced lethal host-vector system; 2 copies SLT-ⅡvB; gene expression; immune test

中图分类号:

S852.61

徐引弟;王治方;朱文豪;郭成留. 2拷贝SLT-ⅡvB在猪霍乱沙门氏菌C500crp-/asd-缺失株中的表达及小鼠免疫试验[J]. , 2010, 37(7): 70-73.

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