盐酸四环素人工抗原的合成及鉴定

›› 2010, Vol. 37 ›› Issue (3): 171-174.

盐酸四环素人工抗原的合成及鉴定

张桂贤

（山东临沂师范学院生命科学学院，临沂 276005）

收稿日期:1900-01-01 修回日期:1900-01-01 出版日期:2010-03-20 发布日期:2010-03-20

Synthesis and Identification of Artificial Antigen against Tetracycline Hydrochloride

ZHANG Gui-xian

（College of Life Science, Linyi Normal College, Linyi 276005,China）

Received:1900-01-01 Revised:1900-01-01 Online:2010-03-20 Published:2010-03-20

摘要/Abstract

摘要： 本试验旨在合成盐酸四环素人工抗原,为其单克隆抗体的制备奠定试验基础。将盐酸四环素（TCH）发生霍夫曼降解和重氮化反应生成重氮盐，再与蛋白质载体（BSA，OVA）偶联生成免疫原和包被原，对偶联产物采用三氯化铁及紫外扫描法鉴定偶联成功，且免疫原和包被原的摩尔结合比分别约为3.4∶1和4.2∶1。用免疫原免疫BALB/c小鼠，用间接ELISA检测抗体效价，采用竞争ELISA法测IC₅₀，获得了效价为1∶51200、IC_50为16.91 ng/mL的多克隆抗体，最终证明人工抗原制备成功。

关键词: 盐酸四环素; 霍夫曼; 重氮化; 偶联; 载体

Abstract: Hofmann degradation and diazo-reaction of Tetracycline hydrochloride (TCH) happened and conjugated to protein-carrier (BSA, OVA).The conjuagates were synthesized by the means of FeCl3 resolution and UV scanning spectra, and mol conjugation ration of TCH to BSA was 3.2∶1 and TCH to OVA was 4.2∶1.The immunogen(TCH-BSA) was immunized to BALB/c mice and polycolnal antibodies were obtained. Tiler of the antibodies were 1∶51200 by the indirect ELISA and IC^₅₀ was 16.91 ng/mL by the competitive indirect ELISA. It showed that the artificial-synthesized antigen had immunogenicity.

Key words: Tetracycline hydrochloride; Hofmann degradation; diazo-reaction; conjugation; carrier

中图分类号:

S859.79⁺6

张桂贤. 盐酸四环素人工抗原的合成及鉴定[J]. , 2010, 37(3): 171-174.

ZHANG Gui-xian. Synthesis and Identification of Artificial Antigen against Tetracycline Hydrochloride[J]. , 2010, 37(3): 171-174.

[1]	陈旭, 董依萌, 邢秀梅, 杨苏坤, 刘欣. 梅花鹿SCF基因参与色素合成的作用研究[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(9): 3663-3670.
[2]	宋越, 苏胜杰, 张帆, 白帆, 戴伶俐, 王娜, 王大伟, 杨茜雯, 赵世华, 张月梅. 溶血性曼氏杆菌截短型白细胞毒素的原核表达及多克隆抗体制备[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(6): 2479-2486.
[3]	潘鹏丞, 雷宗全, 李显, 胡湘云, 秦谦涛, 覃兆鲜, 关志惠, 陈宝剑, 谢炳坤. 陆川猪MYL2基因生物信息学分析、真核表达载体构建及组织表达研究[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(5): 1796-1806.
[4]	方勤圆, 付绍印, 王标, 何小龙, 何江峰, 王力伟, 陈欣, 张林, 王大清, 马跃军, 张立岭, 刘永斌. 绵羊褐色脂肪活性影响因素的研究进展[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(3): 1059-1067.
[5]	邢天琦, 许迪, 颜港, 王钰滨, 王梦影, 梁晶, 兰干球. 巴马小型猪ABCD4基因序列分析、真核表达载体构建及组织表达分析[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(11): 4338-4348.
[6]	聂结华, 马艳芝, 张志远, 徐淑凤, 廖洁丹. 提高伊维菌素水溶性方法的研究进展[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(10): 4292-4300.
[7]	肖莉, 牛小杰, 刘庆庆, 王月丽, 陈创夫, 易继海. 猪轮状病毒VP4基因重组腺病毒的构建及抗体水平评价[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(1): 260-269.
[8]	邹剑伟, 邹菊红, 申玉建, 韦一, 张叁保, 连子童, 徐建建, 宋颖, 黄艳娜, 韦英明, 蒋钦杨, 郑自华. 努比亚山羊LMCD1基因生物信息学分析、真核表达载体的构建及表达[J]. 中国畜牧兽医, 2022, 49(6): 2033-2042.
[9]	陈宇婧, 张艺艺, 黄正阳, 石建州, 刘阳坤, 邱礽, 姚伦广, 李娜. 稳定表达T7 RNA聚合酶BHK-21细胞株的构建[J]. 中国畜牧兽医, 2022, 49(4): 1253-1261.
[10]	魏文焯, 郑超, 吴艳, 梁振华, 皮劲松, 杜金平, 李成凤, 张昊. 蛋鸭circ-ZNF326的特征分析、过表达载体的构建及对小肠上皮细胞增殖的影响[J]. 中国畜牧兽医, 2022, 49(3): 837-844.
[11]	张敬寒, 李枝兰, 韩佃刚, 何帅, 刘金华, 吕念词, 邹丰才, 柴俊, 张以芳. 稳定表达IL-10的PK-15细胞的构建及其在PCV2增殖中的应用[J]. 中国畜牧兽医, 2022, 49(3): 1085-1095.
[12]	张艳敏, 周亚南, 曹磊, 田园, 刘旭平, 谭文松, 赵亮. 猪瘟病毒E2-GM-CSF融合蛋白在HEK293T细胞中的表达和免疫原性分析[J]. 中国畜牧兽医, 2022, 49(2): 669-676.
[13]	胡换仪, 汪建中, 刘昌锦, 林敏, 刘小兰, 魏黄思梧, 邓舜洲. 绿色荧光蛋白的真核表达及其单克隆抗体制备[J]. 中国畜牧兽医, 2022, 49(1): 328-337.
[14]	杨明珠, 陈晓春, 宋佳诚, 侯亚欣, 李俊平. 重组动物疱疹病毒活载体疫苗的构建与应用研究进展[J]. 中国畜牧兽医, 2022, 49(1): 338-351.
[15]	王欢, 朱化彬, 李俊良, 邹惠影, 赵善江. 利用Tild-CRISPR/Cas9定点编辑荷斯坦种公牛的无角Pc位点[J]. 中国畜牧兽医, 2021, 48(9): 3343-3353.