原位杂交检测鸡肿瘤病

›› 2010, Vol. 37 ›› Issue (3): 167-170.

原位杂交检测鸡肿瘤病

王东东，顾节清，李春梅，宋延华

（广东温氏食品集团研究院，新兴 527400）

收稿日期:1900-01-01 修回日期:1900-01-01 出版日期:2010-03-20 发布日期:2010-03-20
通讯作者: 宋延华

Detection of Chicken Neoplastic Diseases by in Situ Hybridization

WANG Dong-dong, GU Jie-qing, LI Chun-mei, SONG Yan-hua

(Guangdong Wen’s Food Group Academy, Xinxing 527400, China)

Received:1900-01-01 Revised:1900-01-01 Online:2010-03-20 Published:2010-03-20

摘要/Abstract

摘要： 本研究旨在运用原位杂交检测方法检测鸡的肿瘤病。根据GenBank中登录的MDV、ALV-J和REV参考毒株序列，设计并合成3对引物，经PCR方法扩增出相应的片段，并进行了克隆测序。将测序正确的片段亚克隆至pSPT-18，经转录得到DIG标记的特异cRNA探针。将探针分别与3种肿瘤病阳性组织石蜡切片进行杂交，可看到阳性信号，特异性、敏感性较好。运用该方法对32份疑似肿瘤病料进行了检测，MDV、ALV-J和REV的阳性率分别为25.00%、18.75%和3.13%。结果提示，鸡肿瘤病在鸡场中仍广泛存在。

关键词: 原位杂交; cRNA探针; 地高辛; 马立克氏病; 禽白血病; 禽网状内皮组织增殖病

Abstract: This experiment was conducted to using a method of in situ hybridization to detect chicken neoplastic diseases. Three pairs of primers were designed and synthesized based on the published sequences of MDV,ALV-J and REV. The PCR amplified products were subcloned into pSPT-18 plasmid to generate DIG-labeled cRNA probes targeting MDV,ALV-J and REV respectively. Positive sections was hybridized with the three probes and the results showed good specificity and sensitivity.Thirty-two suspected neoplastic tissue samples from different farms were processed as paraffin-embedded sections and hybridized with RNA probes above. Of these samples, MDV, ALV-J and REV positive rates were 25.00%, 18.75% and 3.13% respectively. The study showed that chicken neoplastic diseases were still widely existed in the chicken farms.

Key words: in situ hybridization; cRNA probe; DIG; Marek’s disease; avain leukosis; reticuloendotheliosis

中图分类号:

S858.31

王东东;顾节清;李春梅;宋延华. 原位杂交检测鸡肿瘤病[J]. , 2010, 37(3): 167-170.

WANG Dong-dong; GU Jie-qing; LI Chun-mei; SONG Yan-hua. Detection of Chicken Neoplastic Diseases by in Situ Hybridization[J]. , 2010, 37(3): 167-170.

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