斑点杂交法检测犬瘟热病毒

›› 2010, Vol. 37 ›› Issue (12): 229-231.

斑点杂交法检测犬瘟热病毒

张永霞，王金福，张似青

（上海农林职业技术学院，上海 201600）

收稿日期:1900-01-01 修回日期:1900-01-01 出版日期:2010-12-20 发布日期:2010-12-20

The Detection of Canine Distemper Virus by Dot blotting Hybridization

ZHANG Yong-xia, WANG Jin-fu, ZHANG Si-qing

(Shanghai Vocational Technical College of Agriculture and Forestry, Shanghai 201600,China)

Received:1900-01-01 Revised:1900-01-01 Online:2010-12-20 Published:2010-12-20

摘要/Abstract

摘要： N蛋白是犬瘟热病毒核衣壳的主要构成成分，又是保守性较强的免疫原性蛋白。本研究对犬瘟热病毒N基因重组质粒酶切、凝胶回收目的DNA进行DIG标记制备探针，用此探针斑点杂交检测40只疑似犬瘟热患病犬鼻液和20只病死犬脾脏、肝脏、心脏、肺脏、肾脏、血液中的犬瘟热病毒。结果显示，40只疑似犬中，有33只是阳性，阳性率是82.5%，比胶体金诊断试纸阳性检出率高。而对病死犬的不同组织检测中，脾脏中病毒检出率最高，表明斑点杂交技术在犬瘟热病毒的早期诊断和流行病学调查中有很高的应用价值。

关键词: 斑点杂交; 犬瘟热病毒; N基因

Abstract: N protein is the major forming element of nucleocapsid of CDV and is also a conservative immunogenicity protein. A digoxin labeled probe prepared by enzyme digesting recombinant plasmid of CDV N protein and gel reclaiming targeting DNA was used to detect blenna narium of 40 suspected cases of CD and to detect spleen, liver, heart, lung, kidney and blood of 20 dead cases of CD by dot blotting hybridization. Results showed that among 40 suspected cases of CD, 33 cases were positive and positive rate was 82.5%. This rate was higher than that of colloid gold test paper detection. Virus relevance ratio of spleen was the highest among different tissues of detection. Above results showed that dot blotting hybridization had very important application value in early diagnosis and epidemiological investigation of CDV.

Key words: dot blotting hybridization; CDV; N gene

中图分类号:

S854.4

张永霞;王金福;张似青. 斑点杂交法检测犬瘟热病毒[J]. , 2010, 37(12): 229-231.

ZHANG Yong-xia;WANG Jin-fu;ZHANG Si-qing. The Detection of Canine Distemper Virus by Dot blotting Hybridization[J]. , 2010, 37(12): 229-231.

[1]	罗世民, 李中波. 怀化地区犬瘟热病毒H、F基因遗传多样性及其遗传进化分析[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(8): 3248-3257.
[2]	赵静, 褚颖, 罗均, 郭霄峰. 嵌合犬瘟热病毒H基因的重组狂犬病病毒的构建及免疫原性研究[J]. 中国畜牧兽医, 2022, 49(12): 4776-4785.
[3]	刘健, 白艺兰, 鞠厚斌, 潘子豪, 俞向前, 杨显超, 朱晓英, 葛菲菲, 葛杰, 于讳茹, 陶田谷晟, 王建, 赵洪进. 犬瘟热病毒SH202003株全基因组序列分析[J]. 中国畜牧兽医, 2021, 48(7): 2559-2568.
[4]	王召阳, 蒋亚君, 刘雪婷, 林伟东, 鑫婷, 侯绍华, 郭晓宇, 朱鸿飞, 贾红. 抗犬瘟热病毒VHH抗体噬菌体库的构建与筛选[J]. 中国畜牧兽医, 2020, 47(6): 1685-1693.
[5]	于泽坤, 段笑笑, 只勇, 栾志舫, 单学强. 稳定表达犬瘟热病毒Nectin4受体的Vero细胞系构建[J]. 中国畜牧兽医, 2020, 47(10): 3334-3342.
[6]	陈美荣, 林伟东, 宋天琪, 鑫婷, 郭晓宇, 黄克和, 贾红. CDV强毒BJ16B2株H基因在昆虫杆状病毒中的表达与鉴定[J]. 《中国畜牧兽医》, 2018, 45(8): 2041-2048.
[7]	赵雪丽, 刘毅, 班付国, 闫若潜, 王华俊, 王淑娟, 马震原, 王东方. 犬瘟热病毒、犬细小病毒二重TaqMan MGB探针实时荧光定量PCR检测方法的建立与应用[J]. 《中国畜牧兽医》, 2018, 45(8): 2086-2094.
[8]	张昕, 黄坚, 张萍, 杨晓农. 成都地区宠物犬感染犬瘟热病毒和犬呼吸道冠状病毒的分子流行病学调查[J]. 《中国畜牧兽医》, 2018, 45(2): 486-492.
[9]	刘莉, 郝福星, 袁维峰, 封家旺. 犬瘟热病毒V蛋白的表达、鉴定及亚细胞定位[J]. 《中国畜牧兽医》---唯一指定的官方网站, 2016, 43(7): 1723-1728.
[10]	孙彦刚, 赵建军, 白雪, 牛登云, 邵西群, 胡博, 刘昊, 张海玲, 张蕾, 王洋, 马凡舒, 闫喜军. 水貂、狐狸和貉源犬瘟热病毒F蛋白信号肽区基因克隆及遗传变异分析[J]. , 2015, 42(4): 838-846.
[11]	王西西, 王凤雪, 程世鹏, 温永俊. 犬瘟热病毒感染机制及其诊断方法研究进展[J]. 《中国畜牧兽医》---唯一指定的官方网站, 2015, 42(3): 757-763.
[12]	全传松，姜骞，于作，李博韬，李连峰，曲连东. 犬瘟热病毒血凝蛋白在昆虫细胞中的表达与抗原性分析[J]. 中国畜牧兽医, 2014, 41(8): 25-29.
[13]	庄金秋，梅建国，王金良，张倩，沈志强，丁壮. 水貂犬瘟热病毒LD-1株的分离与鉴定[J]. 中国畜牧兽医, 2014, 41(4): 226-232.
[14]	孙园园，赵鹏，刘骏，王云，钱科. 犬瘟热—犬冠状病毒双重PCR诊断方法的建立及初步应用[J]. 中国畜牧兽医, 2014, 41(3): 99-103.
[15]	孙建涛, 侯绍华, 于萍, 朱鸿飞, 梁欠, 郝志明. 基于甲病毒复制子的犬瘟热核酸疫苗的构建及表达性研究[J]. , 2013, 40(9): 96-100.