伪狂犬病病毒Ea株gK基因的真核表达

›› 2009, Vol. 36 ›› Issue (11): 57-59.

伪狂犬病病毒Ea株gK基因的真核表达

徐引弟^1,2，陈焕春²，肖少波^2

(1.河南农业科学院畜牧兽医研究所，郑州 450002； 2.华中农业大学农业微生物国家重点实验室，武汉 430070)

收稿日期:1900-01-01 修回日期:1900-01-01 出版日期:2009-11-20 发布日期:2009-11-20

The Eukaryotic Expression of gK Gene of Pseudorabies Virus Ea Strain

XU Yin-di^1,2, CHEN Huan-chun², XIAO Shao-bo²

（1.Institute for Animal Husbandry and Veterinary Research, Henan Academy of Agricultural Sciences, Zhengzhou 450002, China; 2.State Key Laboratory of Agricultural Microbiology, Huazhong Agricultural University, Wuhan 430070, China）

Received:1900-01-01 Revised:1900-01-01 Online:2009-11-20 Published:2009-11-20

摘要/Abstract

摘要： 以伪狂犬病毒Ea株BamH I 5′片段为模板，PCR扩增出约0.9 kb gK基因完整编码区片段，将该基因克隆到pBluescriptIISK+中，构建重组载体pSKgK。进一步将该片段插入真核表达载体pEGFP-C1的增强绿荧光蛋白EGFP下游，构建真核表达载体pEGFPgK，脂质体法转染BHK-21细胞，G418筛选至正常细胞完全死亡，在倒置荧光显微镜下观察，pEGFPgK转染的细胞在细胞膜和细胞浆中发出很强的荧光，而正常细胞不发荧光。证明gK基因在BHK-21细胞上获得了表达，表达在细胞膜和细胞浆中。

关键词: 伪狂犬病病毒; gK基因; 真核表达

Abstract: A pair of primers was synthesized according to the sequence of PRV Ka strain. The fragment containing gK gene coding domains was amplified by polymerase chain reaction (PCR) using BamH I 5′ fragment of PRV Ea strain as template. The fragment was cloned into pBluescriptIISK+, resulting recombination plasmid pSKgK. Then the gK gene was cloned into eukaryotic expression vector pEGFP-C1, following the EGFP (enhanced green fluorescent protein). The recombinant plasmid pEGFPgK were transfected into BHK-21 cell with lipofectin and selected under G418, until the normal BHK-21 cell die out. Expression protein was detected under inverted fluorescence microscope. The results showed that gK gene was expressed in the cytomembrane and cytoplasm of BHK-21 cell.

Key words: PRV; gK gene; eukaryotic expression

中图分类号:

S852

徐引弟;陈焕春;肖少波. 伪狂犬病病毒Ea株gK基因的真核表达[J]. , 2009, 36(11): 57-59.

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