›› 2008, Vol. 1 ›› Issue (3): 97-99.

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猪繁殖与呼吸综合征和猪流感复合RT-PCR方法的建立及应用

柴春霞,夏平安,崔保安,张红英
  

  1. 河南农业大学牧医工程学院,郑州 450002
  • 收稿日期:1900-01-01 修回日期:1900-01-01 出版日期:2008-03-20 发布日期:2008-03-20

  • Received:1900-01-01 Revised:1900-01-01 Online:2008-03-20 Published:2008-03-20

摘要: 根据猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)美洲型标准株(ATCC VR-2332)的部分ORF7保守序列、猪流感(SIV)A/Swine/HeNan/703/2001(H3N2)株的NP基因保守序列,设计合成了2对特异引物,分别扩增出大小为300和457 bp的特异性基因片段,通过优化RTPCR条件,最终建立了可同时检测PRRSV和SIV的复合RT-PCR诊断方法,该方法能检出约10 pg总RNA病毒。应用该方法分别对河南省不同地区送检的26头份病死猪的鼻腔分泌物、气管、血液、肺组织等进行检测,结果9头份PRRSV阳性,4头份SIV阳性,其中4头份SIV和PRRSV同时为阳性,其余猪为阴性,健康猪对照样品全部阴性。结果表明,PRRSV和SIV复合RT-PCR诊断方法具有高度特异性和敏感性,为在分子水平上对PRRSV、SIV的混合感染进行早期快速诊断提供了科学依据。

关键词: 复合RT-PCR; 猪繁殖与呼吸综合征病毒; 猪流感病毒

中图分类号: