猪卵母细胞体外成熟和孤雌激活参数研究

›› 2008, Vol. 1 ›› Issue (3): 31-34.

猪卵母细胞体外成熟和孤雌激活参数研究

习海涛，张运海，刘亚，章美林，陶勇，章孝荣

安徽农业大学动物科技学院，合肥 230036

收稿日期:1900-01-01 修回日期:1900-01-01 出版日期:2008-03-20 发布日期:2008-03-20

Studies on Porcine Oocyte in Vitro Maturation and Parthenogenetic Activation

XI Hai-tao，ZHANG Yun-hai，LIU Ya，ZHANG Mei-lin，TAO Yong，ZHANG Xiao-rong

College of Animal Science and Technology, Anhui Agricultural University, Hefei 230036, China

Received:1900-01-01 Revised:1900-01-01 Online:2008-03-20 Published:2008-03-20

摘要/Abstract

摘要： 本研究比较了按不同方法贮藏的培养液对猪卵母细胞体外成熟及成熟后孤雌激活对胚胎发育的影响。此外，还探索了针对初情期前母猪体外成熟卵母细胞和孤雌激活方案。结果如下：①1.4 kv/cm、100 μs、1DC电激活后，卵母细胞死亡率明显高于2.0 kv/cm、30 μs、1DC和2.0 kv/cm、60 μs、1DC处理组，但激活后胚胎卵裂率和囊胚率相似；②使用钙离子载体和6-二甲基氨基嘌呤（Ionomycin+6-DMAP）处理后，胚胎卵裂及囊胚率都明显不如电激活处理；③6次独立试验结果证明：经4℃冷藏和-20℃冷冻保存的培养液用于猪卵母细胞培养，其体外成熟率、孤雌激活后的卵裂率及囊胚发育率无显著差异（P＞0.05）。说明成熟卵在2.0 kv/cm、30 μs、1DC或者 2.0 kv/cm、60 μs、1DC电击参数激活下可以降低死卵率；按本试验设计的电激活方案处理初情期前母猪成熟卵优于化学激活；在-20℃冷冻保存猪卵母细胞成熟液是可行的。 

关键词: 猪; 卵母细胞; 孤雌激活; 体外成熟; 冷冻保存

Abstract: The purposes of the present study were to evaluate cold storage of maturation medium on nuclear maturation, subsequent development in vitro of these oocytes after parthenogenetic activation, and to determine an optimal protocol for porcine oocyte activation. The results were as following: ①Death rate of oocytes after electrical stimulation was significantly higher in group of 1.4 kv/cm,100μs,1DC than that in group of 2.0 kv/cm,30μs,1DC or in group of 2.0 kv/cm,60μs,1DC. The rates of cleavage and blastocyst formation，however， were similar among these goups. ②When chemicals: inomycin and 6-DMAP were used as activation agents, the cleavage and blastocyst rates were both poorer than when electrical stimulation was used. ③After 6 replicates, we found that the rates of nuclear maturation, cleavage, blastocyst formation were all similar between oocytes matured in culture media prepared from cold storage in -20℃ and 4℃. In conclusion, optimal activation protocol was determined and cold storage of maturation medium under -20℃ is feasible without compromising developmental competence of porcine oocytes.

Key words: pig; oocyte; parthenogenetic activation; in vitro maturation; cold storage

中图分类号:

S814

习海涛;张运海;刘亚;章美林;陶勇;章孝荣 . 猪卵母细胞体外成熟和孤雌激活参数研究[J]. , 2008, 1(3): 31-34.

XI Hai-tao;ZHANG Yun-hai;LIU Ya;ZHANG Mei-lin;TAO Yong;ZHANG Xiao-rong . Studies on Porcine Oocyte in Vitro Maturation and Parthenogenetic Activation[J]. , 2008, 1(3): 31-34.

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