试验旨在获得具有天然构象且抗原性良好的犬瘟热病毒（canine distemper virus，CDV）强毒株的H蛋白。以分离的CDV强毒株BJ16B2为模板，RT-PCR特异扩增H基因，克隆至表达载体pFastBac^TM HTA上，酶切及测序鉴定正确后比对分析H基因同源性，并将重组质粒pFastBac^TMHTA-H转化大肠杆菌DH10Bac^TM感受态细胞，同源重组构建穿梭质粒rBacmid-H，将重组穿梭质粒转染Sf9昆虫细胞，拯救重组杆状病毒。利用IFA和Western blotting对获得的重组蛋白进行鉴定及抗原性分析。结果显示，重组质粒pFastBac^TMHTA-H酶切测序鉴定正确，该H基因属于Asia-1强毒株，与参考毒株的核苷酸和氨基酸同源性分别为89.8%~99.3%和89.6%~99.5%。在杆状病毒中所表达的H蛋白能与CDV阳性血清及His-tag抗体发生特异性反应，IFA鉴定能够产生特异性绿色荧光，且在68 ku左右出现蛋白条带，表明H蛋白成功表达且具有良好的反应原性。本研究获得了具有天然构象及良好抗原性的CDV重组H蛋白，为后续蛋白结构和抗原特性差异分析、单抗制备、CDV亚单位疫苗的开发奠定了基础。

试验旨在构建陆川猪G蛋白偶联受体1（G protein-coupled receptor 1，GPR1）基因真核表达载体，并对其组织表达谱进行分析。采用RT-PCR技术从10周龄陆川猪皮下脂肪组织中扩增出GPR1基因CDS区后，使用常规分子克隆手段构建含GPR1基因片段的真核表达载体pEGFP-N1-GPR1，利用双酶切和测序对重组质粒pEGFP-N1-GPR1进行鉴定，并以脂质体法将重组质粒转染3T3-L1细胞24 h后观察细胞荧光表达情况。收集所转染3T3-L1细胞并提取其总RNA，实时荧光定量PCR进一步检测GPR1真核表达载体表达情况；提取6头10周龄陆川猪心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、背最长肌、皮下脂肪总RNA，实时荧光定量PCR检测GPR1基因mRNA在陆川猪各组织中的表达量。结果表明，陆川猪GPR1基因CDS全长1 068 bp，成功将其连接至pEGFP-N1真核表达载体，重组表达载体pEGFP-N1-GPR1质粒和空载pEGFP-N1质粒所转染3T3-L1细胞均能表现出绿色荧光，且空白对照组并未表现出绿色荧光。实时荧光定量PCR结果证实，GPR1基因在重组质粒试验组的表达量极显著高于空载质粒组（P<0.01）。GPR1基因在10周龄陆川猪肝脏中表达量最高，在心脏、脾脏、肺脏、肾脏、皮下脂肪中均有表达，在背最长肌中几乎不表达。本试验成功构建了真核表达载体pEGFP-N1-GPR1，并获得了GPR1基因组织表达谱，为进一步研究GPR1基因对陆川猪脂肪沉积的影响提供参考。

为探讨小反刍兽疫病毒（peste des petits ruminants virus，PPRV）贵州流行株N基因分子特征和分群，试验设计了1对特异性引物，应用RT-PCR技术对小反刍兽疫（peste des petits ruminants，PPR）临床样本进行N基因扩增，克隆至pMD19-T载体，对阳性重组质粒进行测序，应用DANStar软件对测序序列和参考序列进行核苷酸同源性、氨基酸同源性、变异位点及系统进化树分析。结果显示：PPRV贵州流行株N基因扩增长度为1 578 bp，其相互间核苷酸、氨基酸同源性分别为99.6%~100.0%及99.2%~100.0%，与国内参考株N基因的核苷酸序列（97.7%~99.9%）及氨基酸序列（98.3%~100.0%）同源性较国外参考株（88.5%~97.7%和92.2%~98.5%）高；PPRV贵州流行株N基因编码的氨基酸同疫苗株Nigeria 75-1相比存在26个位点突变，但没有氨基酸的缺失或增加；基于N基因系统进化分析显示，PPRV贵州流行株同国内参考株处于同一个进化分支，但与国外参考株处于不同进化分支；其属于病毒进化的Ⅳ基因群，与国内参考株处于同一系统分群，但与疫苗株Nigeria 75-1（Ⅰ基因群）处于不同基因群。

为了解羊源多杀性巴氏杆菌超氧化物歧化酶（SOD）的生物学功能，本试验对该菌sodA基因进行克隆及原核表达，并对克隆的sodA基因进行遗传进化树分析，对其表达的SOD蛋白进行生物信息学分析。参照GenBank中多杀性巴氏杆菌HN06株基因组中sodA基因序列信息设计引物进行PCR扩增，将产物与pET-28a（+）载体相连，构建pET-28a（+）-sodA重组质粒，将该质粒转化E.coli DH5α感受态细胞进行克隆，再转化E.coli BL21（DE3）感受态细胞进行表达，经IPTG诱导后对表达蛋白进行SDS-PAGE和Western blotting鉴定分析。结果显示，本试验成功扩增出大小为645 bp的目的片段，并表达出大小约28 ku的目的蛋白。遗传进化树分析表明，该基因与HN07（GenBank登录号：CP007040.1）和Pm70（GenBank登录号：AE004439.1）株亲缘关系较近，重组蛋白生物信息学分析显示，该融合蛋白为稳定的酸性亲水可溶性蛋白，分子式为C₁₀₈₅H₁₆₅₁N₂₉₃O₃₀₉S₉，分子质量为24 032.36 u，理论等电点为6.19，消光系数为45 170，不稳定系数为26.87（<40），在哺乳动物网织红细胞的半衰期预计为30 h，疏水指数为82.15，总平均疏水性（GRAVY）为-0.282，二级结构以α-螺旋和无规则卷曲为主。以上研究结果为后续深入研究多杀性巴氏杆菌在羊体内的存活机制及研发预防巴氏杆菌病的疫苗提供了参考。

为探究猪BLM解旋酶N端、C端的结构功能及其在不同组织和疾病中的相对表达量，本研究采用RT-PCR技术扩增从江香猪BLM基因N端和C端，利用生物信息学软件对克隆所获序列进行分析，同时采用实时荧光定量PCR技术分析BLM基因在猪不同组织及病样中的表达差异。结果显示，试验成功克隆了从江香猪BLM基因N端1 025 bp和C端1 300 bp序列，与GenBank中猪BLM基因序列（登录号：NM_001123084.1）同源性为100%；生物信息学软件预测显示，猪BLM基因序列长度为4 316 bp，包含4 280 bp的开放阅读框，编码一个由1 426个氨基酸组成的多肽链；氨基酸序列比对发现，猪BLM基因氨基酸序列与牛的同源性最高（85%）；结构域预测表明，猪BLM基因有DEXDc、HELICc、RQC和HRDC 4个结构域；系统进化树分析表明，猪BLM基因与牛亲缘关系最近；实时荧光定量PCR结果显示，以心脏为对照，BLM基因在从江香猪各组织中均有表达，其中在睾丸中的相对表达量最高，其次为肺脏、肝脏、脾脏、心脏、肾脏、小肠和大肠，在睾丸和肺脏中的表达量均极显著高于其他组织（P<0.01）；BLM基因在患繁殖与呼吸道综合征猪肺脏、患白血病鸡肝脏和患鸭瘟鸭肝脏中的表达水平均极显著或显著高于正常组织（P<0.01；P<0.05），提示BLM基因的变化可能也会导致动物疾病的发生。本试验结果可为后续畜禽BLM解旋酶原核表达载体的构建及其在重大疾病的发生和预防等研究提供理论依据。

为建立一种特异、高通量检测犬瘟热病毒（canine distemper virus，CDV）和犬细小病毒（canine parvovirus，CPV）的二重TaqMan MGB探针实时荧光定量PCR方法，本研究选取高度保守且具有型特异性的CDV H基因和CPV VP2基因序列，设计CDV和CPV特异性引物对及TaqMan MGB探针；经反应条件优化，建立了检测CDV和CPV的二重TaqMan MGB探针实时荧光定量PCR方法，并进行了敏感性、特异性和重复性试验。结果显示，该方法检测CDV、CPV的标准曲线线性相关系数（R²）分别为0.997和0.993，最低检出限均为10拷贝/μL，具有较高的灵敏性；对犬副流感病毒等4种病原对照和阴性对照均未出现扩增，特异性良好；CDV、CPV标准品批间试验结果显示，该方法具有很好的重复性；对48份临床疑似CDV或CPV感染样品检测结果显示，14份为CDV阳性，19份为CPV阳性，4份为CDV/CPV双阳性，与CDV H基因、CPV VP2基因测序结果符合率为100%。本研究建立的二重TaqMan MGB探针实时荧光定量PCR方法具有灵敏、特异、高通量和可准确定量等优点，可用于临床CDV/CPV病毒感染各个时期的快速鉴别检测。

为研究四川地区猪瘟病毒（classical swine fever virus，CSFV）及E2基因的遗传变异情况，试验对CSFV阳性病料抽提RNA，通过RT-PCR扩增CSFV E2基因并将其克隆到pMD18-T载体，经菌落PCR、双酶切、序列测定后利用生物信息学软件分析了E2基因的分子特性。结果显示，扩增的E2基因大小为1 125 bp，编码375个氨基酸，与GenBank中CSFV GXWZ02、CSFV/2.1、HEBZ、YC11WB、SXYL2006、0406/CH/01/TWN亲缘关系较近，核苷酸同源性分别为98.3%、96.5%、94.7%、92.4%、92.1%和90.9%，而与疫苗株HCLV E2的同源性较低，为87.6%。密码子偏向性分析显示，E2基因的ENc值为53.161，密码子使用频率与大肠杆菌、酵母菌和人差异较大的分别有33、25和25个；此外，E2基因共有34个稀有密码子，且有多个稀有密码子多次串联成簇的情况出现。结果表明，E2基因在密码子使用中整体上不存在较明显的偏向性，且密码子使用模式更接近真核生物，本试验克隆的E2基因与疫苗株相比，部分核苷酸出现了变异，但主要抗原域氨基酸未发生改变，该结果为进一步开展CSFV E2功能研究及后期基因工程苗的研制提供了基础数据。

为获得Marc145细胞源EDC3基因序列，分析其序列特征及编码蛋白的结构和功能，本试验采用RT-PCR方法从Marc145细胞中扩增EDC3基因，并进行克隆和序列测定；应用DNAStar软件分析该基因的核苷酸和氨基酸序列，与参考序列经BLAST比对后分析同源性，并构建系统进化树；利用生物信息学方法对其编码区蛋白进行二级结构、三级结构、B细胞表位、跨膜结构域和信号肽预测。结果显示，Marc145细胞源EDC3基因长度为1 527 bp，共编码507个氨基酸；EDC3基因编码区核苷酸序列与绿猴、猕猴、狒狒、人、倭黑猩猩、马、野猪、虎鲸、绵羊、非洲象和大熊猫的同源性在91.5%~99.2%之间，与非哺乳动物原鸡同源性最低，仅为81.2%；EDC3氨基酸序列与上述物种的同源性在95.3%~99.6%之间，与原鸡的同源性仅为88.8%。系统进化树结果显示，Marc145细胞源EDC3基因与绿猴的亲缘关系最近，其次是灵长类。蛋白结构预测结果表明，EDC3蛋白主要由α-螺旋和无规则卷曲组成，分别为23.38%和47.35%，二级结构与三级结构预测结果相符。该蛋白存在多个B细胞优势抗原表位，无跨膜结构域及信号肽区域。本试验结果可为Marc145细胞源EDC3基因功能的进一步研究提供参考。

为构建猪附红细胞体ENO基因重组腺病毒穿梭质粒，试验根据GenBank中登录的猪附红细胞体ENO基因序列（登录号：CP002525.1）设计特异性引物，对ENO基因进行PCR扩增，并将纯化后的PCR产物克隆到pMD19-T载体中。用Kpn Ⅰ和Xho Ⅰ对pMD19T-ENO进行双酶切后，将其亚克隆至腺病毒穿梭载体PCR259中，构建PCR259-ENO重组质粒，提取重组质粒进行鉴定。应用脂质体介导转染法将鉴定正确的PCR259-ENO重组穿梭质粒转染293细胞，应用间接免疫荧光法（IFTA）检测ENO基因在293细胞中的表达。结果显示，试验克隆的ENO基因长为1 182 bp，编码393个氨基酸，与GenBank中ENO基因序列（登录号：CP002525.1）同源性为99%。构建的重组腺病毒穿梭质粒PCR259-ENO经PCR和酶切鉴定正确，并且能在293细胞中表达，表明ENO基因成功插入腺病毒穿梭质粒PCR259中，重组腺病毒穿梭质粒PCR259-ENO构建成功。

试验旨在研究氨基酸转运体钠离子依赖的中性氨基酸转运蛋白（the sodium-dependent neutral amino acid transporter 2，SNAT2）在牛乳腺上皮细胞（bovine mammary epithelial cell，BMEC）中对氨基酸调节乳合成的影响。利用组织块法成功培养原代BMEC，添加不同氨基酸（蛋氨酸（Met）、赖氨酸（Lys）和亮氨酸（Leu）刺激BMEC后，通过实时荧光定量PCR、Western blotting技术和甘油三酯试剂盒检测SNAT2、酪蛋白（β-casein）基因的表达量和BMEC培养液上清甘油三酯的分泌量；将N-flag-SNAT2真核表达载体及SNAT2 siRNA分别转入细胞中进行SNAT2基因的过表达和敲低试验；通过Western blotting和甘油三酯试剂盒分别检测SNAT2、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（the mammalian target of rapamycin，mTOR）、β-casein蛋白表达量和BMEC培养液上清的甘油三酯含量。结果显示，3种氨基酸（Met、Lys、Leu）均能显著促进BMEC分泌乳蛋白和乳脂，并激活mTOR信号途径，其中Met、Lys还能够显著上调SNAT2基因表达；SNAT2能够正向调节BMEC乳蛋白和乳脂肪的合成，并激活mTOR信号通路，说明氨基酸激活mTOR信号通路是通过SNAT2基因介导完成的，进而调节了BMEC乳蛋白和乳脂肪合成。

γ-氨基丁酸（γ-aminobutyric acid，GABA）是哺乳动物体内一种重要的神经性抑制递质，主要分布在中枢神经系统，具有广泛的调控功能。GABA可通过下丘脑-垂体-肾上腺皮质（HPA）轴参与机体稳态的调节，并对外界有害刺激引起的机体炎性反应具有一定的缓解作用。机体在外界应激条件刺激下会引起血液中脂多糖（LPS）含量的升高并激活Toll样受体-4（TLR4）/NF-κB信号通路，引起肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-8（IL-8）等的表达增多，最终导致机体产生炎症反应。GABA可在机体发生炎症反应时，通过调节相应炎性因子的表达来降低炎症反应对机体造成的损伤。作者通过对GABA生理学功能与受体类别及GABA在机体发生炎性反应时的作用进行综述，对GABA在机体发生炎性反应时的影响及其与LPS引起的机体炎性反应之间的关系进行分析，为临床上采用GABA治疗机体炎性反应提供理论依据。

木薯耐干旱、耐贫瘠且易管理，其茎叶、块根及工业副产物营养物质含量较高，是一种优质的非常规饲料。木薯叶粗蛋白质、粗脂肪、灰分含量较高，含有丰富的钙、铁、锌、锰。木薯块根是很好的能量来源，其粗蛋白质、粗脂肪、矿物质、维生素含量低于木薯叶。木薯渣主要由木薯的外皮、破碎细胞壁等组成，粗蛋白质含量很低，粗纤维、中性洗涤纤维、酸性洗涤纤维含量较高，矿物质、氨基酸丰富，但钙、磷、氨基酸不平衡。木薯品种、生长条件、收割方式、收获时间、加工工艺等均会影响木薯及其副产品营养物质的含量。木薯中含有氰化物、单宁及植酸等抗营养因子，其中氰化物是限制木薯应用的最主要因素，其可结合细胞色素C氧化酶，阻断线粒体电子传递链，抑制有氧呼吸，导致中枢神经系统抑制和死亡。单宁、植酸与蛋白质结合生成络合物，阻碍营养物质的消化吸收，可通过水煮、烘烤、干燥等物理化学方法，以及发酵、育种等手段对木薯进行脱毒。研究表明，木薯及其副产品可广泛应用于动物生产中，对动物生长性能、肉品质无不良影响。开发与利用非常规饲料有利于缓解饲料资源紧张，降低养殖成本。作者详细介绍了木薯及其副产品的营养价值、抗营养因子及其脱毒方法以及其在动物生产上的应用，以期为木薯在畜禽养殖中的综合利用提供一定的参考。

为了研究真姬菇菌糠碱贮效果，试验采用CaO、Ca（OH）₂、CaO+3%尿素及Ca（OH）₂+3%尿素4种碱贮处理，每种处理碱（CaO或Ca（OH）₂）的添加量设3%、4%、5%及6% 4个水平，分别为CO3、CO4、CO5、CO6，CH3、CH4、CH5、CH6，COU3、COU4、COU5、COU6，CHU3、CHU4、CHU5、CHU6，每个水平4个重复，2个空白组，1组空白（CK）仅为真姬菇菌糠，另1组空白（CKU）为真姬菇菌糠+3%尿素，室温下碱贮30 d。结果表明：CO3、CO4、CO5、CO6组酸性洗涤纤维（ADF）和游离棉酚含量较CK组分别降低8.61%、12.69%、13.74%、16.63%和29.58%、33.92%、39.04%、41.31%，CO5、CO6组中性洗涤纤维（NDF）、酸洗木质素（ADL）含量较CK组显著降低（P<0.05），可降解细胞壁（CB₂）和相对饲喂价值（RFV）较CK组显著提高（P<0.05）；CH3、CH4、CH5、CH6组ADF和游离棉酚含量较CK组分别降低7.30%、10.90%、13.90%、17.14%和28.47%、32.69%、40.48%、43.59%，CH5、CH6组NDF、ADL含量较CK组显著降低（P<0.05），CB₂和RFV较CK组显著提高（P<0.05）；COU3、COU4、COU5、COU6组NDF、ADF和游离棉酚含量较CKU组分别降低6.72%、8.86%、9.78%、12.10%；14.63%、16.37%、18.19%、20.21%及5.49%、14.24%、23.63%、24.66%，RFV提高18.97%、23.19%、25.86%、30.79%；CHU3、CHU4、CHU5、CHU6组NDF、ADF、ADL和游离棉酚含量较CKU组分别降低8.34%、11.87%、14.08%、16.97%，11.94%、15.19%、18.21%、19.06%，7.40%、14.93%、19.47%、19.30%和6.84%、15.60%、22.39%、24.10%，RFV提高18.88%、26.20%、34.00%、37.88%。CaO与Ca（OH）₂碱贮效果相近，添加3%尿素碱贮较CaO或Ca（OH）₂直接碱贮效果更佳，且可长期保存。

为研究22~42日龄阶段不同营养水平日粮配方对黑羽番鸭的生长发育及屠宰性能的影响，试验选择288只22日龄黑羽番鸭，随机分为9组，每组4个重复，每个重复8只番鸭，采用4因素3水平L₉（3⁴）正交试验设计，设3个代谢能水平（11.92、12.32、12.72 MJ/kg），3个粗蛋白质水平（16%、18%、20%），3个钙水平（0.6%、0.8%、1.0%）和3个有效磷水平（0.30%、0.45%、0.60%），按照不同营养水平设计B1~B9共9个日粮试验组，通过饲养试验和屠宰试验，测定番鸭的生长性能、屠宰性能和血清生化指标。结果显示：B3组在体重增长、屠宰性能上的营养优势较为明显，其平均末重、平均日增重、料重比分别为1 556.64 g、46.43 g/d和2.39，其中平均末重显著高于B1和B9组（P<0.05）；屠宰率、半净膛率、全净膛率、腿肌率分别为73.43%、64.81%、55.26%和26.56%，表现出了较好的生长发育态势；再结合该组番鸭体尺指标及血清生化指标结果，说明B3组番鸭日粮营养水平为最佳。因此，在本试验条件下，推荐22~42日龄黑羽番鸭日粮营养水平为：代谢能11.92 MJ/kg，粗蛋白质19.25%，钙1.03%，有效磷0.60%。

本试验旨在利用全混合日粮（TMR）体外发酵参数预测奶牛的生产性能，采集2头体重550 kg、安装永久瘤胃瘘管的健康荷斯坦奶牛瘤胃液，并取40种不同的TMR进行体外发酵试验，测定体外发酵24 h的乙酸、丙酸、丁酸、氨态氮（NH₃-N）含量，以及甲烷（CH₄）排放量、微生物蛋白质（MCP）、体外干物质消失率（IVDMD）、体外蛋白质消失率（IVCPD）和体外有机物消失率（IVOMD）等指标。记录饲喂不同TMR的奶牛对应的生产性能（产奶量、乳蛋白率、乳脂率），并与奶牛生产性能之间建立预测模型。结果显示：①产奶量与丙酸含量（r=0.37，P<0.05）、MCP（r=0.40，P<0.05）均呈显著正相关，但与IVCPD（r=-0.44，P<0.01）呈极显著负相关；乳脂率与乙酸含量（r=0.55，P<0.01）、甲烷排放量（r=0.36，P<0.05）、MCP（r=0.40，P<0.05）呈极显著或显著正相关；乳蛋白率与MCP（r=0.91，P<0.01）、IVDMD（r=0.44，P<0.01）、IVCPD（r=0.45，P<0.01）呈极显著正相关，但是与IVOMD（r=-0.56，P<0.01）呈极显著负相关。②奶牛的生产性能可用体外发酵参数作为预测因子进行预测。产奶量（kg/d）=29.72-0.86IVCPD（R²=0.73，RSD²=47.26，P<0.001）；乳脂率（%）=0.40+0.06AA（R²=0.91，RSD²=0.15，P<0.001）；乳蛋白率（%）=1.52+0.06MCP（R²=0.78，RSD²=0.01，P<0.001）。奶牛的生产性能预测值与实际值的误差在允许的范围内，表明预测方程是可行的。

本研究探讨了L-茶氨酸对氧化应激断奶仔猪生长性能、抗氧化能力及免疫功能的影响。试验采用2×2二因素设计，160头断奶仔猪（7.53 kg±0.51 kg）随机分为4个处理组：1组（日粮中不添加L-茶氨酸，腹腔注射5 mL生理盐水）；2组（日粮中不添加L-茶氨酸，腹腔注射8 mg/kg体重敌快死）；3组（日粮中添加1 000 mg/kg L-茶氨酸，腹腔注射5 mL生理盐水）；4组（日粮中添加1 000 mg/kg L-茶氨酸，腹腔注射8 mg/kg体重敌快死）。预试期7 d，正试期28 d。结果显示：①与1组相比，2组仔猪平均日增重（ADG）和平均日采食量（ADFI）显著降低，而料重比显著升高（P<0.05）；与2组相比，4组仔猪ADG显著增加（P<0.05）。②与1组相比，2组仔猪血清丙二醛（MDA）含量显著增加，而总抗氧化能力（T-AOC）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性显著下降（P<0.05），3组仔猪血清MDA显著降低，而T-AOC显著增加（P<0.05）；与2组相比，4组仔猪血清MDA含量显著降低，而T-AOC和GSH-Px活性显著上升（P<0.05）。③与1组相比，2组仔猪血清IgA、IgG、IL-2、IL-4水平显著增加，C3和C4水平显著下降（P<0.05），3组仔猪血清IgA、IgG和IL-4水平显著降低，而C3和C4水平显著增加（P<0.05）；与2组相比，4组仔猪血清IgA、IgG、IL-2、IL-4水平显著降低，而血清C3水平显著增加（P<0.05）。结果表明，注射敌快死可引发仔猪氧化应激，造成生长性能下降、体液免疫能力下降；日粮中添加1 000 mg/kg L-茶氨酸可缓解仔猪氧化损伤，提高氧化应激仔猪的生长性能、抗氧化能力和体液免疫能力。

试验旨在研究日粮中添加屎肠球菌对爱拔益加（Arbor Acres，AA）肉鸡血清和肝脏抗氧化功能的影响。选取1日龄AA肉鸡600只（公鸡），随机分为5组，每组6个重复。对照组（CON组）饲喂基础日粮；抗生素组（Ant组）在基础日粮中添加0.1%金霉素；低（LEF组）、中（MEF组）、高（HEF组）剂量屎肠球菌组分别在基础日粮中添加50、100、200 mg/kg屎肠球菌。结果表明：①21日龄时，HEF组肉鸡血清中总抗氧化能力（T-AOC）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性均显著高于CON组（P<0.05），Ant组T-AOC显著高于CON组（P<0.05）；42日龄时，MEF组和HEF组血清中丙二醛（MDA）含量显著低于CON组（P<0.05），LEF组血清中超氧化物歧化酶（SOD）活性显著高于CON组和Ant组（P<0.05）。②21日龄时，MEF组和HEF组肉鸡肝脏中T-AOC、GSH-Px活性均显著高于CON组（P<0.05），且HEF组肉鸡肝脏中T-AOC显著高于Ant组（P<0.05）；42日龄时，HEF组肉鸡肝脏中过氧化氢酶（CAT）活性显著高于CON组（P<0.05）。结果提示，屎肠球菌能显著提高21与42日龄血清和肝脏中T-AOC和GSH-Px活性，降低血清中MDA含量，增加抗氧化酶活性，改善肉鸡抗氧化应激能力，且200 mg/kg屎肠球菌添加量在提高血清和肝脏抗氧化能力上与抗生素效果相当。

为研究妊娠后期营养水平对初产母猪体况、繁殖性能及血液生化指标的影响，本试验选用背膘厚及体重相近的初产杂交母猪36头，按体况和配种时间随机分为3组（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组），每组6个重复，每个重复2头母猪，饲喂营养水平依次为维持需要的1.5、2.0和2.5倍的日粮，母猪妊娠81 d时开始试验至母猪分娩结束，试验期33 d。结果显示，分娩时Ⅰ组母猪背膘厚显著低于Ⅲ组（P<0.05），断奶时各组背膘厚度差异不显著（P>0.05）；Ⅰ组母猪泌乳期背膘损失显著低于Ⅲ组（P<0.05）；Ⅲ组母猪分娩后体重、分娩前体重均显著高于Ⅰ组（P<0.05），各组母猪妊娠81 d体重及泌乳期失重等差异均不显著（P>0.05）。试验组间窝产仔数、窝产活仔数、断奶个体重及母猪断奶-发情间隔均无显著差异（P>0.05）；Ⅲ组仔猪初生均重、断奶窝重、泌乳期窝增重均显著高于Ⅰ组（P<0.05）。随营养水平升高，Ⅱ、Ⅲ组雌激素水平显著高于Ⅰ组（P<0.05）；各组催乳素和孕酮水平差异不显著（P>0.05）；Ⅰ组甘油三酯水平显著低于Ⅱ、Ⅲ组（P<0.05）；各组尿素氮和葡萄糖含量随营养水平的升高逐渐增大，且差异显著（P<0.05）；Ⅲ组胰岛素含量显著高于I组（P<0.05）；各组总蛋白含量无显著差异（P>0.05）。结果提示，母猪妊娠后期饲喂营养水平为2.0倍维持需要的日粮时可使后备母猪分娩时体况达到标准水平，而饲喂营养水平为2.5倍维持需要的日粮可使母猪产仔性能得到提高。

试验旨在研究复合植物精油（OCT）对脂多糖（LPS）诱导的断奶仔猪的免疫应激的影响。试验选取28日龄左右的杜×长×大三元杂交仔猪，随机分成3个处理组：对照组（基础日粮，注射生理盐水），LPS组（基础日粮，注射LPS），OCT组（基础日粮+50 mg/kg OCT，注射LPS）。每组8个重复，每个重复1头猪。于试验第21天注射LPS（100 μg/kg体重）或等体积的生理盐水，注射3 h后前腔静脉采血进行白细胞分类计数；6 h后屠宰，取胸腺、脾脏，-80℃保存，用于测量胸腺、脾脏免疫相关基因白介素-4（IL-4）、白介素-6（IL-6）、白介素-10（IL-10）、肿瘤坏死因子（TNF-α）、核因子（NF-κB）以及转录相关基因转录激活因子3（STAT3）的基因相对表达量。结果表明：①与对照组相比，LPS刺激降低了仔猪血液中白细胞、中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞及嗜酸性粒细胞数量（P<0.05）；与LPS组相比，日粮中添加OCT提高了白细胞的数量（P<0.05）；②与对照组相比，LPS刺激上调了脾脏、胸腺IL-6、STAT3 mRNA水平（P<0.05），下调了脾脏IL-4、TNF-α及胸腺IL-4、TNF-α、NF-κB mRNA水平（P<0.05）；与LPS组相比，添加OCT下调了脾脏、胸腺IL-6、STAT3 mRNA水平（P<0.05）；上调了胸腺IL-4、IL-10、TNF-α、NF-κB的mRNA水平（P<0.05）。综合上述结果，LPS诱导发生了仔猪免疫应激，OCT在一定程度具有缓解作用。

本试验旨在研究添加不同剂量马齿苋青贮对奶山羊泌乳性能的影响。选取体重（62±3）kg、1~2胎次、产奶量（1.90±0.15）kg/d、泌乳期相近（产后0~60 d）的健康奶山羊12只，随机分为4组，每组3个重复，每个重复1只羊。在奶山羊全混合日粮（TMR）中分别添加0（CK组）、10（A组）、20（B组）和30 g/d DM（C组）马齿苋青贮添加剂，试验期共75 d，其中预试期15 d，正试期60 d。试验期间测定每组奶山羊干物质采食量、产奶量、乳品质及血液生化指标。结果显示：随马齿苋青贮添加量的增加，奶山羊干物质采食量随之增加；添加马齿苋青贮的试验组奶山羊泌乳量均高于对照组；羊乳的pH呈弱碱性（7.10~7.24），并随马齿苋青贮添加量增加而降低，其中CK组最高，C组最低；羊乳中乳糖、总多酚（TPC）、总黄酮（TFC）和β胡萝卜素的含量均随着马齿苋青贮添加量增加而增多；血液中总胆固醇含量则相反。综上所述，日粮中添加马齿苋青贮对奶山羊无不良影响，可一定程度上提高奶山羊干物质采食量、泌乳量及乳品质，降低血液中总胆固醇含量。

试验研究了日粮中添加葡萄糖氧化酶（GOD）对仔猪生长性能、血清生化指标的影响。选用28日龄健康断奶仔猪60头，公母各半，随机分为3组：对照组（基础日粮）、试验1组（基础日粮中添加抗生素（喹乙醇100 g/t，金霉素75 g/t，土霉素钙60 g/t））及试验2组（基础日粮中添加400 g/T的GOD），每组4个重复，每个重复5头猪。试验期31 d，测定试验期间仔猪的生长性能及试验结束时仔猪血清生化指标。结果表明：日粮中添加GOD后，仔猪末重、平均日增重（ADG）均显著高于对照组和试验1组（P<0.05），日均采食量（ADFI）和料重比（F/G）均显著低于对照组和试验1组（P<0.05）；血清谷草转氨酶（AST）活性显著低于对照组和试验1组（P<0.05），血清谷丙转氨酶（ALT）活性、总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）和球蛋白（GLB）水平未有显著变化（P>0.05）；血清丙二醛（MDA）含量显著低于对照组（P<0.05），血清谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、总超氧化物歧化酶活性（SOD）和总抗氧化能力（T-AOC）均有提高，但差异不显著（P>0.05）；血清免疫球蛋白A、G、M（IgA、IgG、IgM）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）均显著高于对照组和试验1组（P<0.05），干扰素-γ（IFN-γ）显著高于对照组（P<0.05），白细胞介素2（IL-2）和白细胞介素4（IL-4）水平均高于对照组和试验1组，但差异不显著（P>0.05）。综合以上试验结果，在日粮中添加400 g/t的GOD可有效改善仔猪血液抗氧化能力，提高仔猪生长性能，缓解仔猪的肝脏损伤。

本试验旨在研究复合微生态制剂及饲用抗生素对肉鸡生长性能、肠道菌群数量和免疫性能的影响。选择体重接近、健康的600只1日龄白羽肉雏鸡随机分成5个组，每组6个重复，每个重复20只。Ⅰ组为对照组，饲喂基础日粮；Ⅱ组为肽菌素T3组，在基础日粮中添加1.0‰的复合微生态制剂肽菌素T3；Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组为抗生素组，分别在基础日粮中添加20 g/t硫酸黏杆菌素、50 g/t杆菌肽锌及50 g/t杆菌肽锌和10 g/t硫酸黏杆菌素混合物。预试期3 d，正试期35 d。结果表明，与Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ组相比，肽菌素T3组肉鸡各阶段平均日增重（ADG）、盲肠和直肠乳酸杆菌数量显著增高（P<0.05），料重比（F/G）、盲肠和直肠大肠杆菌数量显著降低（P<0.05）；脾脏指数分别提高27.44%、40.27%、29.01%和29.81%（P<0.05），法氏囊指数分别提高12.82%、37.50%、33.33%和38.95%（P<0.05）。肽菌素T3组肉鸡血清内毒素含量低于Ⅰ组（P>0.05）和Ⅲ组（降低24.77%，P<0.05）。与Ⅰ组和Ⅲ组相比，肽菌素T3组盲肠内容物分泌型免疫球蛋白A（sIgA）含量分别提高32.37%和25.79%（P<0.05）。综合上述结果，本试验条件下，日粮中添加1.0‰肽菌素T3可提高肉鸡生长性能，改善肉鸡肠道菌群结构，促进肉鸡脾脏和法氏囊的发育，其提高盲肠内容物sIgA含量、降低血清内毒素含量的效果优于20 g/t硫酸黏杆菌素。

本试验旨在研究日粮能量和粗蛋白水平对灰雁生长性能、血清生化指标及屠宰性能的影响，为灰雁的科学饲养提供理论基础。试验采用双因子试验设计，粗蛋白质及代谢能水平分别为14.0%、15.0%、16.0%及11.0、12.0、13.0 MJ/kg，选取450只28日龄灰雁，随机分为9组，每组5个重复，每个重复10只灰雁，每组饲喂1种日粮。预试期12 d，正试期80 d。结果表明：①代谢能为12.0 MJ/kg组灰雁的平均日增重显著高于代谢能为11.0和13.0 MJ/kg组（P<0.05）；粗蛋白质水平为14.0%组灰雁的平均日增重显著低于蛋白质水平为15.0%组（P<0.05）；②代谢能为13.0 MJ/kg组灰雁的血清甘油三酯含量显著低于代谢能为11.0 MJ/kg组（P<0.05），粗蛋白质水平为16.0%组灰雁的血清尿素氮含量显著高于蛋白质水平为14.0%组（P<0.05）。③代谢能为11.0 MJ/kg组灰雁的半净膛率、全净膛率、胸肌率和腿肌率均低于代谢能为12.0和13.0 MJ/kg组，代谢能为13.0 MJ/kg组灰雁的腹脂率显著高于代谢能为11.0和12.0 MJ/kg组（P<0.05）；粗蛋白质水平为14.0%组灰雁的胸肌率和腿肌率低于粗蛋白质水平为15.0%和16.0%组；综合得出，日粮代谢能水平显著影响灰雁的末重、腹脂率、血清甘油三酯含量（P<0.05），过高的代谢能水平增加腹脂率，增加饲料成本；日粮蛋白质水平对灰雁的末重和血清尿素氮影响显著（P<0.05）；推荐5~16周灰雁的蛋白质水平为15.0%，能量水平为12.0 MJ/kg。

本研究旨在检测新吉细毛羊、中国美利奴羊（无角型）、东北细毛羊、杜×寒杂交羊（F1）、杜×寒杂交羊（F3）、白头杜泊羊6个绵羊群体骨形态发生蛋白15（bone morphogenetic protein 15，BMP15）、生长分化因子9（growth differentiation factor 9，GDF9）基因的多态性，为绵羊繁殖力的标记辅助选择和育种提供理论依据。以6个绵羊群体共378只个体为研究对象，利用PCR-SSCP技术检测BMP15、GDF9基因多态性；用DNAStar软件与I-TASSER软件预测蛋白质二级结构和三级结构；计算基因频率、基因型频率、Hardy-Weinberg平衡、杂合度（He）、纯合度（Ho）、有效等位基因数（Ne）和多态信息含量（PIC）。运用GraphPad Prism 6软件对新吉细毛羊群体BMP15基因多态性与产羔数进行相关性分析。结果显示，BMP15基因P1引物扩增片段存在多态性，6个群体共呈现3种基因型：AA、AC、CC，该突变为BMP15基因外显子1上58-60 bp 3个碱基（CTT）缺失，新吉细毛羊、杜×寒杂交羊（F3）、白头杜泊羊的χ²值均达到显著水平，处于Hardy-Weinberg不平衡状态，不同基因型间新吉细毛羊平均产羔数差异均不显著（P>0.05）；GDF9基因P2引物扩增片段存在多态性，6个群体共呈现3种基因型：DD、DE、EE，其中新吉细毛羊仅有1种基因型：DD，该突变为GDF9基因外显子2上477 bp处T→C的转换，该突变未导致氨基酸的改变，除新吉细毛羊外其余5个群体χ²值均未达到显著水平，处于Hardy-Weinberg平衡状态，说明GDF9基因T477C突变不能作为新吉细毛羊多胎性状遗传标记位点。

试验旨在研究没食子酸（gallic acid，GA）对黄牛卵母细胞体外成熟及早期胚胎发育的影响，进一步优化黄牛卵母细胞体外成熟体系。在卵母细胞体外成熟液（M液）中添加不同浓度没食子酸（0、10、30、50、100 μmol/L），成熟22~24 h后，统计卵丘扩展情况及卵母细胞成熟率；同时，对成熟的卵母细胞进行正常体外受精（IVF），统计早期胚胎的分裂率、囊胚率、囊胚卵裂球数及卵裂球细胞凋亡率。根据试验结果，选择最优浓度，使卵母细胞在含该浓度没食子酸的成熟液中成熟24 h后，检测其细胞内的活性氧水平（ROS）和总谷胱甘肽（TGSH）含量。结果显示，M液中添加30 μmol/L没食子酸组卵丘扩展分值和成熟率显著高于对照组（0 μmol/L）（P<0.05），其他处理组与对照组无显著差异（P>0.05）；成熟的卵母细胞体外受精后进行后续胚胎培养，其中10和30 μmol/L组的分裂率均显著高于对照组和100 μmol/L组（P<0.05），50和100 μmol/L组分裂率较对照组也有所提高，但差异不显著（P>0.05）；早期囊胚率统计发现，与对照组相比，30和100 μmol/L能够显著提高囊胚发育率（P<0.05），10和50 μmol/L浓度组则无显著差异（P>0.05）；与对照组相比，30、100 μmol/L没食子酸均能显著提高IVF胚胎的早期囊胚卵裂球数（P<0.05）；但囊胚卵裂球凋亡率与对照组无显著差异（P>0.05）；对卵母细胞内活性氧和总谷胱甘肽含量检测时，发现30 μmol/L没食子酸可显著降低细胞内活性氧水平（P<0.05），且显著提高总谷胱甘肽含量（P<0.05）。综上所述，在黄牛卵母细胞体外成熟液中添加适量的没食子酸能有效降低卵母细胞内活性氧水平，提高总谷胱甘肽含量，进而提高卵母细胞成熟的质量及其后续IVF胚胎发育能力。

为探讨催乳激素对体外培养的山羊乳腺上皮细胞脂肪酸合酶（fatty acid synthase，FASN）基因转录活性的调控作用，试验分别用不同浓度的胰岛素（insulin，INS）、雌激素（estradiol，E₂）、催乳素（prolactin，PRL）及不同激素组合（INS+PRL、E₂+INS+PRL）处理山羊乳腺上皮细胞24 h，提取细胞总RNA，采用实时荧光定量PCR检测催乳激素对FASN基因mRNA表达水平的影响。细胞转染山羊FASN基因启动子报告基因载体，同样用不同浓度的胰岛素、雌激素、催乳素及激素组合处理24 h，利用双荧光素酶报告基因系统检测催乳激素对FASN基因启动子活性的影响。结果发现，用雌激素、催乳素处理山羊乳腺上皮细胞后，FASN基因启动子活性及mRNA水平极显著或显著上调（P<0.01；P<0.05），雌激素浓度为10、100 μmol/L和催乳素浓度为0.1和1 μg/mL时效果最为明显，而胰岛素对FASN基因的启动子活性及mRNA水平没有显著影响（P>0.05）。用不同激素组合（INS+PRL、E₂+INS+PRL）处理细胞均能显著上调FASN基因启动子活性及mRNA表达水平（P<0.05）。结果表明，雌激素和催乳素能够调控FASN基因的转录活性，为进一步研究泌乳过程中FASN基因的分子调控机制提供理论依据。

本研究通过评定热应激条件下奶牛呼吸评分和流涎指数，将中国荷斯坦泌乳奶牛划分为热应激耐受组（2 271头）和热应激易感组（2 024头），利用固定效应模型和混合效应模型考虑场、胎次和泌乳阶段等因素，比较热应激期奶牛直肠温度差异及奶牛在不同时期的产奶性能差异。结果表明，热应激耐受组奶牛直肠温度显著低于热应激易感组（P<0.05）；在非热应激期（5月），热应激耐受奶牛与热应激易感奶牛的平均日产奶量接近，热应激耐受奶牛的较低（低0.68 kg），但差异不显著（P>0.05）；在热应激期（7~8月），两组奶牛产奶量均有下降，热应激耐受组奶牛平均日产奶量下降幅度（与5月相比）低于热应激易感组，尤其是在热应激最严重的8月（下降幅度分别为18.06%与23.01%）。以上试验结果表明，热应激环境下通过呼吸评分与流涎指数可有效判断奶牛的耐热性。本试验结果可为奶牛热应激反应评价及奶牛养殖过程中通过量化奶牛热应激反应，及时采取措施降低热应激的损失提供一定理论依据。

circRNA是一种不具有5'端帽子结构和3'端多聚（A）尾巴结构但能稳定存在于真核细胞内的非编码RNA（ncRNA），是经过反向剪接构成的闭合环状分子，为近年来的研究热点。越来越多的研究已证明，circRNA对生物体的各种生命活动发挥着极其重要的调控作用。根据组成不同，circRNA可分为外显子环状、内含子环状及内含子外显子共同组成的环状。同时circRNA功能的发挥依赖于其细胞定位，位于细胞核的circRNA主要在基因转录水平与RNA聚合酶Ⅱ结合调控寄主基因的转录活性；而位于细胞液中的circRNA主要发挥竞争性内源RNA的作用，通过竞争性抑制miRNA与靶基因mRNA 3'UTR的结合，发挥其对miRNA和靶基因的调控作用；circRNA还可翻译成蛋白质或多肽。目前，circRNA在畜禽肌肉生长发育方面的相关研究还处于起步阶段，主要是关于circRNA作为竞争性内源RNA发挥重要调控功能。文章就circRNA的发现、分类、生成机制、作用方式及对动物肌细胞增殖和分化的前沿研究作一简要阐述，并提出circRNA对畜禽肌肉功能研究的展望，以期为今后circRNA相关功能的研究提供参考。

为研究获能液中添加咖啡因和亚牛磺酸对牛精子功能的影响，本研究将荷斯坦牛冻精解冻后分别添加在含不同浓度咖啡因（0、2.5、5.0、7.5 mmol/L）或亚牛磺酸（0、5、10、20、40 μmol/L）的获能处理液中，且每个处理组加入约200 μL的精液，在CO₂培养箱里经上游处理45 min，以评估咖啡因和亚牛磺酸对牛精子活力、顶体及质膜完整性的影响，进而探讨在获能液中亚牛磺酸替代咖啡因的效果。结果显示，添加2.5、5.0 mmol/L咖啡因组经上游法获能处理后的牛精子活力和顶体完整率均显著高于对照组（P<0.05），且2.5 mmol/L咖啡因组精子活力最高；添加10、20 μmol/L亚牛磺酸组经上游法获能处理后的牛精子活力、顶体完整率和质膜完整率均显著高于对照组（P<0.05），且20 μmol/L亚牛磺酸组的精子功能参数值最高；将筛选的最佳浓度2.5 mmol/L咖啡因和20 μmol/L亚牛磺酸采用同样的方法处理，发现20 μmol/L亚牛磺酸组的精子顶体完整率和质膜完整率均显著高于2.5 mmol/L咖啡因组和对照组（P<0.05）。因此，20 μmol/L亚牛磺酸可以替代2.5 mmol/L咖啡因用于体外受精体系中的精子获能处理，有助于提高精子功能参数。

为筛选及评价用于牛结核病诊断的抗原，本试验将CFP-10、ESAT-6、TB10.4、TB27.4、MPT51、MPT63、MPT64、MPB70、MPB83、Rv3872和Ag85B共11种牛分枝杆菌抗原分别作为包被抗原建立间接ELISA方法，比较其对牛结核病的检出率；同时利用豚鼠和牛的皮试试验评价重组蛋白作为皮试试验刺激原的潜力。此外，将重组蛋白分别刺激结核病阳性牛和阴性牛的抗凝血24 h，检测血浆中的IFN-γ水平，评价各重组蛋白作为IFN-γ释放试验刺激原的潜力。结果显示，不同重组蛋白对结核病阳性血清的反应活性不一，MPB70总检出率最高，为59.7%；其次是Ag85B、ESAT-6和MPB83，检出率均在45%以上；MPT51的检出率最低，仅为2.2%。豚鼠和牛皮试试验均显示，单个重组蛋白作为刺激原难以产生令人满意的迟发型过敏反应（delayed type hypersensitivity，DTH），而TB10.4、TB27.4、MPT64、MPT63或Rv3872作为补充抗原，分别与CFP-10或ESAT-6混合，均可特异性地刺激结核病阳性牛产生较强的DTH反应，且与PPD-B无显著差异（P>0.05）。重组蛋白CFP-10、ESAT-6、TB10.4和MPT51均能刺激结核病牛全血释放一定的IFN-γ，其中CFP-10、CFP-10-ESAT-6串联蛋白和MPT51刺激结核病阳性牛全血释放的IFN-γ显著高于阴性牛（P<0.05）。因此，这11种牛分枝杆菌抗原并不适合单独用于牛结核病的血清学诊断、皮试试验或IFN-γ释放试验，但以CFP-10和ESAT-6为核心，TB10.4、TB27.4、MPT64、MPT63、Rv3872或MPT51作为其补充抗原，均能提高检测敏感性，有作为皮试试验和IFN-γ释放试验特异性刺激原用于牛结核病诊断的潜力。

为制备抗猪流行性腹泻病毒（porcine epidemic diarrhea virus，PEDV）变异株卵黄抗体并探索卵黄抗体的纯化方法，本试验采用灭活的PEDV变异株CH/JX01全病毒免疫蛋鸡，收集免疫后所产的鸡蛋，分别用水稀释法、PEG-6000法和水稀释-硫酸铵二次沉淀法对鸡蛋中IgY进行提纯，然后运用间接ELISA和Western blotting方法鉴定和比较3种方法的提纯效果，获得可用于规模化生产的提纯方法；同时研究不同温度、pH条件下抗体活性，寻找对提纯IgY活性具有保护作用的物质。结果显示，本试验成功制备了抗PEDV变异株的卵黄抗体。浓度检测结果表明，水稀释法提取的IgY浓度最高，为6.204 mg/mL；PEG-6000方法提纯的IgY浓度次之，为4.673 mg/mL；水稀释-硫酸铵二次沉淀法IgY浓度最低，为3.359 mg/mL。间接ELISA检测结果表明，水稀释-硫酸铵二次沉淀法提纯的IgY效价最高，为1：12 800；其次是PEG-6000，为1：6 400；而水稀释法最低，为1：1 600。综合3种方法所提纯的卵黄抗体浓度与效价，发现水稀释-硫酸铵二次沉淀法的提纯效果优于其他两种方法。活性影响因素试验结果表明，提纯的IgY在37~60℃活性稳定；pH为4.0~11.0时具有良好的活性；在酸性条件下，20%硫糖铝对IgY活性具有较好的保护作用。本试验结果将为卵黄抗体的大规模生产运用与储存提供了有效的参考依据。

牛病毒性腹泻（bovine viral diarrhea，BVD）和黏膜病（mucosal disease，MD）均是由牛病毒性腹泻病毒（bovine viral diarrhea virus，BVDV）感染引发的传染病，严重威胁世界养牛业的发展。文章概述了BVDV分型及其分子生物学特征，并从急性感染、经胎盘或子宫感染、持续性感染和黏膜病4个方面总结了近期国内外BVDV致病机制的研究进展。根据序列保守性及是否致细胞病变可将BVDV分为两种基因型和两种生物型，其中，新发现的"HoBi"株归类为瘟病毒属。BVDV基因进化很快，基因组编码4种结构蛋白和8种非结构蛋白，编码蛋白在病毒的复制、翻译及在宿主致病过程中发挥重要作用。BVDV致病机制复杂，急性感染会造成病毒血症、繁殖障碍、免疫抑制等，急性感染牛发生腹泻的原因与BVDV感染胃肠道的肌层、黏膜下层并干扰肠道神经的正常功能相关，非致细胞病变型（NCP）BVDV是造成急性感染的病因。胚胎感染BVDV取决于病毒首次侵袭时胎儿在子宫内的生长阶段。NCP型BVDV具有抑制胎儿体内产生Ⅰ型干扰素的能力，致使该病毒在宿主中得以生存并形成持续性感染牛，当持续性感染牛再次感染与NCP型BVDV高度同源的致细胞病变型（CP）毒株时直接诱发黏膜病。两种生物型的产生是发生持续性感染和黏膜病的重要因素，NCP型可向CP型BVDV进行转化。本综述有助于发现控制BVD-MD传播的新途径，为消灭该病和新型疫苗的研制提供参考。

试验旨在探讨中药复方多糖对不同MHC B-LβⅡ基因型鸡免疫调节作用的影响。采用PCR-SSCP方法对500只试验鸡进行MHC B-LβⅡ基因分型，采集不同MHC B-LβⅡ基因型鸡的外周血淋巴细胞，分别加入终浓度为200、100、75、50、25、0 μg/mL的中药复方多糖共培养24 h，收集细胞，采用ELISA方法检测不同MHC B-LβⅡ基因型鸡淋巴细胞培养液中环磷酸腺苷（cAMP）、环磷酸鸟苷（cGMP）、钙离子（Ca²⁺）、一氧化氮（NO）及诱导型一氧化氮合成酶（iNOS）含量。结果显示，与对照组相比，中药复方多糖能显著提高不同MHC B-LβⅡ基因型鸡淋巴细胞培养上清液中cAMP、cGMP、Ca²⁺、NO和iNOS的含量（P<0.05）。中药复方多糖剂量为50 μg/mL时，AA、BC基因型鸡淋巴细胞培养上清液中cAMP、Ca²⁺、NO和iNOS的含量最高，BC基因型鸡淋巴细胞培养上清液中cGMP的含量最高；中药复方多糖剂量为75 μg/mL时，AA基因型鸡淋巴细胞培养上清液中cGMP的含量最高；中药复方多糖剂量为100 μg/mL时，BB基因型鸡淋巴细胞培养上清液中cAMP、cGMP、Ca²⁺、NO和iNOS的含量最高。本试验结果表明，中药复方多糖能不同程度地提高各MHC B-LβⅡ基因型鸡淋巴细胞培养上清液中cGMP、cAMP、NO、Ca²⁺和iNOS的含量，且不同MHC B-LβⅡ基因型鸡淋巴细胞最适中药复方多糖免疫调节剂量不同。

为了表达流行性乙型脑炎（epidemic encephalitis type B）非结构蛋白NS1，本研究通过PCR扩增了日本乙脑病毒（Japanese encephalitis virus，JEV）P3株NS1基因，并分别构建了其融合表达His和GST标签的原核表达载体，经PCR、酶切和测序鉴定正确后转化大肠杆菌BL21感受态细胞，用IPTG诱导表达了NS1融合蛋白，通过SDS-PAGE电泳和Western blotting进行鉴定，并用尿素变性复性和镍亲合层析法纯化目的蛋白。结果显示，试验成功构建了NS1的两个原核表达载体pET-42b-NS1和pGEX-KG-NS1，P3株NS1基因全长1 056 bp，以包涵体的形式表达约40 ku的蛋白，尿素变性复性效果较好，镍亲合层析纯化得到纯度和浓度均较高的NS1蛋白。JEV NS1基因可以通过原核表达系统高效表达蛋白并纯化得到高纯度产物，为后期生物学功能研究奠定基础。

试验旨在探讨油橄榄叶提取物（olive leaf extract，OLE）防治酒精性脂肪肝（AFLD）的作用机制。将50只健康大鼠随机均分为5组：空白对照组，模型组，OLE高、中、低剂量组，除空白对照组外，其他各组均采用递增法灌胃食用乙醇24周，建立大鼠肝损伤模型，造模同时OLE高、中、低剂量组分别用OLE（1 000、500、250 mg/kg）进行灌胃治疗。利用生物显微技术观察肝脏组织结构的变化，全自动生化分析仪测定血脂水平，实时荧光定量PCR、Western blotting和酶联免疫吸附法（ELISA）检测肝组织蛋白磷酸酶1（PP1）、DNA依赖的蛋白激酶（DNA-PK）、上游刺激因子1（USF1）mRNA水平和蛋白含量。结果显示，与空白对照组相比，模型组大鼠肝脏损伤程度明显加重，血清甘油三酯（TG）、游离脂肪酸（FFA）含量极显著升高（P<0.01）；肝脏PP1、DNA-PK、USF1水平和蛋白含量极显著升高（P<0.01）。与模型组相比，OLE干预后，肝脏病理改变明显减轻；血清TG、FFA含量显著或极显著降低（P<0.05；P<0.01）；肝脏PP1、DNA-PK、USF1 mRNA水平和蛋白含量显著或极显著降低（P<0.05；P<0.01）。结果表明，OLE可通过调节PP1-DNA-PK-USF1信号通路缓解肝脏脂肪变性，抑制AFLD的发展。

为了解奶牛乳房炎病原微生物的生物学特性及其耐药性，本研究从奶牛乳房炎乳中分离到的一株革兰氏阴性菌，命名为HLJ-36，对其进行形态特征、生化鉴定、分子生物学鉴定、小鼠致病性试验及药敏试验。生化试验结果显示，木糖、ONPG、柠檬酸盐等反应呈阳性，氧化酶、吲哚、尿素酶等反应呈阴性。理化特性与分子生物学试验结果均显示，分离株与乡间布丘菌特征相符，与人源乡间布丘菌肠道分离株（GenBank登录号：NR_041968.1）同源性最高，达99%。小鼠致病性试验结果显示，试验组小鼠72 h内未发生死亡，表明其致病性较弱。药敏试验结果显示，该菌对头孢噻呋、阿奇霉素、环丙沙星等耐药，对头孢西丁、美罗培南、氯霉素、阿莫西林-克拉维酸、庆大霉素敏感。结果表明，乡间布丘菌可能是引起奶牛乳房炎的一种病原菌，并有一定程度的耐药性，由于该菌与人源乡间布丘菌肠道分离株（GenBank登录号：NR_041968.1）同源性最高，有通过乳及乳制品传播给人类的可能，本试验具有一定的公共卫生学意义。

为明确贵阳市某公园动物园1只亚洲黑熊死亡的原因，本试验采集死亡黑熊内脏器官，进行细菌分离培养、菌体形态观察、生理生化鉴定、16S rRNA基因序列分析和小鼠感染试验。结果显示，从死亡黑熊肺脏样本分离出一种圆形、凸起、表面光滑、边缘整齐、中等大小的乳白色菌落，经染色镜检为呈单在或双排列的革兰氏阴性小杆菌。该分离菌可利用葡萄糖、蔗糖、甘露醇、山梨醇和枸橼酸盐，不发酵乳糖，不产生硫化氢，精氨酸脱羧酶阳性，赖氨酸脱羧酶阴性，符合阴沟肠杆菌生化特征。经细菌16S rRNA通用引物扩增，可得到大小为1 419 bp的片段，与NCBI上相应序列进行BLAST比对，结果显示与阴沟肠杆菌序列相似度达99.9%，确认该分离菌为阴沟肠杆菌。用该分离菌腹腔接种小鼠，可致死小鼠，半数致死量（LD₅₀）为7.94×10⁸ CFU/mL。药敏试验发现，该分离菌对丁胺卡那霉素、氧氟沙星、诺氟沙星和环丙沙星等常用抗菌药均保持较高的敏感性。本试验结果表明，阴沟肠杆菌是导致该亚洲黑熊死亡的病原。