金定鸭不同组织和血液中TLR1、TLR2、TLR4、TLR5的表达差异分析

doi:10.16431/j.cnki.1671-7236.2017.12.010

《中国畜牧兽医》 ›› 2017, Vol. 44 ›› Issue (12): 3459-3465.doi: 10.16431/j.cnki.1671-7236.2017.12.010

金定鸭不同组织和血液中TLR1、TLR2、TLR4、TLR5的表达差异分析

徐文娟, 陶志云, 朱春红, 宋卫涛, 刘宏祥, 章双杰, 李慧芳

江苏省家禽科学研究所, 扬州 225125

收稿日期:2017-06-08 出版日期:2017-12-20 发布日期:2017-12-20
通讯作者: 李慧芳 E-mail:lhfxf_002@yahoo.com.cn
作者简介:徐文娟(1980-),女,江苏兴化人,硕士,研究方向:家禽分子育种,E-mail:xuwj1980@126.com
基金资助:
江苏省农业科技自主创新项目（CX（15）1010-03）；扬州市科技计划项目（YZ2015039）

Analysis of TLR1,TLR2,TLR4 and TLR5 Expression in Different Tissues of Jinding Duck

XU Wen-juan, TAO Zhi-yun, ZHU Chun-hong, SONG Wei-tao, LIU Hong-xiang, ZHANG Shuang-jie, LI Hui-fang

Jiangsu Institute of Poultry Science, Yangzhou 225125, China

Received:2017-06-08 Online:2017-12-20 Published:2017-12-20

摘要/Abstract

摘要：

试验旨在研究不同Toll样受体（Toll-like receptor，TLR）在鸭不同组织中的表达情况，选取300日龄雄性金定鸭10只，解剖后采集其血液及脾脏、肝脏、睾丸、肺脏、下丘脑、垂体、皮肤、腿肌、心脏、肾脏、胸肌、盲肠、小肠、胸腺，采用Primer Premier 5.0软件设计特异性引物，并用实时荧光定量PCR法检测TLR1、TLR2、TLR4、TLR5在不同组织中的相对表达情况。结果显示，各基因扩增产物的熔解曲线均有一特异性的单峰，无其他杂峰，说明引物的特异性较强，可以准确定量。4种目的基因与内参基因的扩增效率在101.4%~105.0%之间，均接近100%，相关系数（R²）为0.98~1.000。TLR1、TLR2、TLR4、TLR5 4种TLRs在金定鸭不同组织和血液中均有表达，但每种TLR受体在各组织中表达水平略有差异，其中TLR1在下丘脑中表达量最低，在胸肌中最高；TLR2在小肠中的表达量最低，在肺脏中最高；TLR4、TLR5在睾丸中的表达量最低，在皮肤中最高。以上结果说明，鸭TLRs在多种组织中能够广泛表达，本试验结果可为TLRs在鸭源感染过程中的作用机理研究提供科学依据。

关键词: 金定鸭; Toll样受体; 组织; 相对表达

Abstract:

The aim of this study was to explore the expression profiles of Toll-like receptor (TLR) in different tissues,and to lay the foundation of TLRs research for ducks.Ten male Jinding ducks of 300 days of age were slaughtered,and the blood sample and 14 different kinds of tissues (spleen, liver, testise, lung,hypothalamus,pituitary gland,skin,leg muscle,heart,kidney, chest muscle,caecum,small intestine and thymus) were collected. The Primer Premier 5.0 software was used to design specific primers and the quantitative Real-time PCR method was used to detect the relative expression levels of TLR1,TLR2,TLR4 and TLR5 mRNA. The results showed that there were only one specific peak on the melting curve of each gene amplification products,indicating that the specificity of the primers were strong. The amplification efficiency of the target genes was 101.4% to 105.0% and the correlation coefficient (R²) was 0.98 to 1.000. The four kinds of TLRs expressed in all of the 14 tissues and blood with varying abundance in different tissues for each of the 4 kinds of TLRs.The expression levels of TLR1 was lowest in hypothalamus,and highest in chest muscle. The expression levels of TLR2 was lowest in small intestine,and highest in lung. The lowest expressed tissues for TLR4 and TLR5 were testis, and the highest expressed tissues were skin.The study indicated that TLRs were widely expressed in various tissues of duck,which laid the foundation for further study on the role mechanism of duck TLRs in the process of pathogen infection.

Key words: Jinding duck; Toll-like receptor (TLR); tissues; relative expression

中图分类号:

Q786

徐文娟, 陶志云, 朱春红, 宋卫涛, 刘宏祥, 章双杰, 李慧芳. 金定鸭不同组织和血液中TLR1、TLR2、TLR4、TLR5的表达差异分析[J]. 《中国畜牧兽医》, 2017, 44(12): 3459-3465.

XU Wen-juan, TAO Zhi-yun, ZHU Chun-hong, SONG Wei-tao, LIU Hong-xiang, ZHANG Shuang-jie, LI Hui-fang. Analysis of TLR1,TLR2,TLR4 and TLR5 Expression in Different Tissues of Jinding Duck[J]. , 2017, 44(12): 3459-3465.

参考文献

[1] Di Gioia M,Zanon I. Toll-like receptor co-receptors as master regulators of the immune response[J]. Molecular Immunology,2015,63(2):143-152.
[2] 马思慧,杨欢,吴天成,等.Toll样受体信号传导通路的研究进展[J].中国畜牧兽医,2014,41(8):160-164.
[3] O'Neill L,Golenbock D,Bowie A G. The history of toll-like receptors-redefining innate immunity[J].Nature Reviews Immunology,2013,13(6):453-460.
[4] Brownlie R,Allan B. Avian toll-like receptors[J].Cell and Tissue Research,2011,343(1):121-130.
[5] Huang Y,Temperley N D,Ren L,et al.Molecular evolution of the vertebrate TLR1 gene family——A complex history of gene duplication,gene conversion,positive selection and co-evolution[J]. BMC Evolutionary Biology,2011,11:149.
[6] Li R,Li N,Zhang J,et al. Expression of immune-related genes of ducks infected with avian pathogenic Escherichia coli (APEC)[J]. Frontiers in Microbiology,2016,7:637.
[7] 周作勇,聂奎,宋振辉,等. 雏鸡不同组织TLR1、TLR2、TLR4、TLR5、TLR15 mRNA转录水平相对定量研究[J]. 畜牧兽医学报,2010,41(11):1453-1459.
[8] Chen S,Cheng A,Wang M. Innate sensing of viruses by pattern recognition receptors in birds[J]. Veterinary Research,2013,44:82.
[9] Muzio M,Polentarutti N,Bosisio D,et al. Toll-like receptor family and signalling pathway[J]. Biochemical Society Transactions,2000,28(5):563-566.
[10] Køllgaard T,Enevold C,Bendtzen K,et al. Cholesterol crystals enhance TLR2-and TLR4-mediated pro-inflammatory cytokine responses of monocytes to the proatherogenic oral bacterium Porphyromonas gingivalis[J].PLoS One,2017,12(2):e0172773.
[11] Zhang P, Zhang N, Liu L,et al. Polymorphisms of Toll-like receptors 2 and 9 and severity and prognosis of bacterial meningitis in Chinese children[J].Scientific Reports,2017,7:42796
[12] 战仁慧.TLR2、TLR4和TLR9在小鼠抵抗鼠伤寒沙门氏菌感染中的作用[D].济南:山东大学,2013.
[13] 方强.家禽Toll样受体基因的克隆、序列分析及不同品种鸡抗沙门菌感染天然免疫应答研究[D].扬州:扬州大学,2012.
[14] 吴晔,骆雪萍,吴呈霖,等. TLR2和TLR4在大鼠光滑念珠菌肺部感染中的表达和意义[J].重庆医学,2014, 43(30):4034-4039.
[15] 沙素梅.Toll样受体5与黏附侵袭性大肠杆菌LF82在炎症性肠病发病中的作用研究[D].西安:第四军医大学,2014.
[16] 欧阳蒲月,黄智璇.细菌感染对斑马鱼TLR5表达的影响研究[J].化学与生物工程,2013,30(4):41-43.
[17] 秦凯凯,黄俊谦,初蕾蕾,等. Toll样受体2、4、5在幽门螺杆菌相关胃黏膜病变中的表达[J].胃肠病学和肝病学杂志,2016,25(2):193-197.
[18] Wong M L,Medrano J F. Real-time PCR for mRNA quantitation[J]. Biotechniques,2005,39(1):75-85.
[19] Pfaffl M W. A new mathematical model for relative quantification in Real-time RT-PCR[J].Nuceleic Acids Research,2001,29(9):2002-2007.
[20] 林宝山,兰道亮,黄偲,等.牦牛TLR2和TLR4基因mRNA在不同组织中的表达分布研究[J].中国畜牧兽医学报,2014,36(11):901-903.
[21] 赵一萍,黄金龙,白东义,等. 蒙古马不同组织器官TLR1、TLR2、TLR4和TLR6 mRNA转录水平研究[J].中国兽医学报,2012,32(10):1542-1546.
[22] 刘伟利,刘红,丁福江,等.罗氏沼虾TLRs基因表达差异分析[J].南方农业学报,2017,48(4):721-727.
[23] 郭佳佳,戴子淳,陆晨,等. LR家族基因在产蛋高峰期和停产期鸭肠道中的表达研究[J].畜牧兽医学报,2016,47(10):2012-2019.

金定鸭不同组织和血液中TLR1、TLR2、TLR4、TLR5的表达差异分析

Analysis of TLR1,TLR2,TLR4 and TLR5 Expression in Different Tissues of Jinding Duck

PDF

可视化

摘要/Abstract

引用本文

使用本文

参考文献

相关文章 15

编辑推荐

Metrics

本文评价

[1]	陶庆华, 黄彩云, 陈超, 刘威, 孙宁宁, 李昂. 白羽番鸭LIF基因克隆及其组织表达差异分析[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(4): 1296-1306.
[2]	胡乐玉, 胡欣瑶, 李颖, 赵盛淼, 沈凤臻, 王长法, 李亮亮, 王彤彤, 任慧英. 德州驴HO-1基因生物信息学分析及多克隆抗体制备[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(4): 1499-1510.
[3]	李丹, 张海森, 王逸群, 高登科, 赵泓淙, 李超, 靳亚平, 陈华涛. 奶牛CRY1基因真核表达载体构建、生物信息学分析及组织表达谱研究[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(3): 870-881.
[4]	常艺通, 张维, 彭英林, 陈晨. miR-192进化分析、靶基因预测及组织表达分析[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(3): 882-892.
[5]	张永杰, 隋志远, 张志帅, 王晨光, 李孝君, 邢凤. 多浪羊NPTX1基因克隆、生物信息学分析及在初情期的表达研究[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(3): 1048-1058.
[6]	韦义荣, 郑自华, 张叁保, 宋颖, 蒋海玉, 孙雯玥, 程鹏飞, 刘雨帆, 邹剑伟, 黄艳娜, 潘艳, 蒋钦杨. 努比亚山羊UCP1基因克隆、生物信息学分析及组织表达研究[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(2): 440-450.
[7]	张明良, 张海龙, 马世鹏, 王彩莲, 郎侠. 花椒精油对小尾寒羊生产性能和胃肠道组织结构的影响[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(2): 556-563.
[8]	谢晶晶, 任梦婷, 范佳慧, 焦亚茹, 韩宗玺, 马得莹. 传染性支气管炎病毒对鸡免疫反应及重组禽β-防御素11和12抗病毒作用的研究[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(1): 246-259.
[9]	付永智, 马晓君, 王茂晗, 李哲, 陈芝媛, 权伟, 赵涵, 苏咏梅, 吴建华, 朱文进. 阳原驴MSTN基因生物信息学分析及组织表达研究[J]. 中国畜牧兽医, 2022, 49(8): 2910-2919.
[10]	陈世钰, 崔帅, 蒋亚君, 鑫婷, 王洋, 郝玉欣, 黄建新, 郭晓宇, 朱鸿飞, 吴佳俊, 贾红. 非洲猪瘟病毒感染后猪外周血淋巴细胞Toll样受体信号通路的lncRNA-mRNA分析[J]. 中国畜牧兽医, 2022, 49(7): 2677-2687.
[11]	高倍瑶, 刘艳光, 贾琪, 柳俭强, 罗新惠, 张立春. 不同品种猪PBD-124基因多态性及差异表达研究[J]. 中国畜牧兽医, 2022, 49(6): 2208-2215.
[12]	王志亮, 杨喜喜, 铁雅楠, 伏晓玉, 王欣荣. 超排处理对家兔生殖器官形态及激素水平的影响[J]. 中国畜牧兽医, 2022, 49(6): 2250-2258.
[13]	黄潇航, 李诗艺, 李永霞, 李梦蕊, 贺金峪, 张龙, 刘道泉, 江和基, 黄志坚, 殷光文. 蟾蜍似矛球吻棘头虫的临床病例研究[J]. 中国畜牧兽医, 2022, 49(6): 2423-2430.
[14]	刘倩, 郭志廷, 张康, 王学智, 张景艳, 李建喜. 黄芪多糖对巨噬细胞天然免疫调节的研究进展[J]. 中国畜牧兽医, 2022, 49(5): 1746-1756.
[15]	顾先哲, 侯宁, 吕晓萍, 高雪丽, 刘超男, 吴文杰, 郑世民. 禽网状内皮组织增生病病毒感染对SPF雏鸡法氏囊细胞Bcl-2和C-myc基因表达及凋亡的影响[J]. 中国畜牧兽医, 2022, 49(4): 1488-1496.