区别鹅细小病毒和番鸭细小病毒的PCR-RFLP方法的建立

中国畜牧兽医 ›› 2014, Vol. 41 ›› Issue (9): 56-59.

区别鹅细小病毒和番鸭细小病毒的PCR-RFLP方法的建立

万春和, 潘异哲, 陈红梅, 施少华, 傅光华, 程龙飞, 黄瑜

福建省农业科学院畜牧兽医研究所, 福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心, 福建福州 350013

收稿日期:2014-03-28 出版日期:2014-09-20 发布日期:2014-09-24
通讯作者: 黄瑜 E-mail:huangyu_815@163.com
作者简介:万春和（1982- ），男，湖北人，博士，助理研究员，研究方向：水禽病毒分子生物学。
基金资助:
公益性行业（农业）科研专项经费（201003012）。

Establishment of a PCR-RFLP Method for Rapid Differential Diagnosis of Goose Parvovirus and Muscovy Duck Parvovirus

WAN Chun-he, PAN Yi-zhe, CHEN Hong-mei, SHI Shao-hua, FU Guang-hua, CHENG Long-fei, HUANG Yu

Fujian Animal Disease Control Technology Development Center, Institute of Animal Husbandry and Veterinary Medicine, Fujian Academy of Agricultural Science, Fuzhou 350013, China

Received:2014-03-28 Online:2014-09-20 Published:2014-09-24

摘要/Abstract

摘要： 根据GenBank登录的鹅细小病毒（GPV）和番鸭细小病毒（MDPV）非结构蛋白（NS）基因特征，本研究设计1对特异性引物对GPV和MDPV基因组DNA进行PCR扩增，目的片段大小均为810 bp，并对PCR产物进行切胶回收。用EcoRⅠ酶对GPV和MDPV特异性胶回收产物进行酶切鉴定，结果显示MDPV经EcoRⅠ酶切后琼脂糖凝胶电泳检测片段为2段，大小为530和280 bp；而GPV经EcoRⅠ酶切后琼脂糖凝胶电泳检测片段大小不变。本研究建立了一种快速区别GPV和MDPV感染的检测方法，可对番鸭感染水禽细小病毒的情况进行快速鉴别诊断。

关键词: 鹅细小病毒; 番鸭细小病毒; EcoRⅠ限制性内切酶; 聚合酶链式反应— 限制性片段长度多态性

Abstract: A pair of specific primers was designed to amplify the goose parvovirus (GPV) and Muscovy duck parvovirus (MDPV) and establish a polymerase chain reaction and restriction fragment length polymorphism (PCR-RFLP) method for rapid detection of the infection status of waterfowl.An EcoRⅠ restriction enzyme was used which could digest MDPV PCR fragments into two different parts, with gene-lengthes of 530 and 280 bp, while GPV PCR fragments couldn't be digested by EcoRⅠ restriction enzyme. We established a fast differential diagnosis for GPV and MDPV using only one pair of primers and a restriction enzyme.

Key words: goose parvovirus; Muscovy duck parvovirus; EcoRⅠrestriction enzyme; polymerase chain reaction and restriction fragment length polymorphism (PCR-RFLP)

中图分类号:

万春和, 潘异哲, 陈红梅, 施少华, 傅光华, 程龙飞, 黄瑜. 区别鹅细小病毒和番鸭细小病毒的PCR-RFLP方法的建立[J]. 中国畜牧兽医, 2014, 41(9): 56-59.

WAN Chun-he, PAN Yi-zhe, CHEN Hong-mei, SHI Shao-hua, FU Guang-hua, CHENG Long-fei, HUANG Yu. Establishment of a PCR-RFLP Method for Rapid Differential Diagnosis of Goose Parvovirus and Muscovy Duck Parvovirus[J]. , 2014, 41(9): 56-59.

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