大观霉素人工抗原的合成及其多克隆抗体制备

中国畜牧兽医

大观霉素人工抗原的合成及其多克隆抗体制备

王照鹏¹，李向梅^1,2，徐飞^{2，王文珺¹，苏丽芳¹，温凯²，吴小平¹}

（1.北京维德维康生物技术有限公司，北京 100095；2.中国农业大学动物医学院，北京 100193）

收稿日期:2013-07-04 出版日期:2014-02-20 发布日期:2014-03-27
作者简介:王照鹏（1983—），男，山东人，硕士，研究方向：动物性食品中兽药安全残留检测。
基金资助:
国家十二五科技支撑计划项目(2011BAK10B01-04)。

Synthesis of Artificial Antigen of Spectinomycin and Preparation of its Polyclonal Antibody

WANG Zhao-peng¹, LI Xiang-mei¹^,2, XU Fei², WANG Wen-jun¹, SU Li-fang¹, WEN Kai², WU Xiao-ping¹

（1.Beijing WDWK Biotechnology Co., Ltd., Beijing 100095, China; 2.College of Veterinary Medicine, China Agricultural University, Beijing 100193, China）

Received:2013-07-04 Online:2014-02-20 Published:2014-03-27

摘要/Abstract

摘要： 以大观霉素(SPE)、盐酸羧甲基羟胺(CMO)、乙二醇二环氧甘油醚(EDE)、牛血清白蛋白（BSA）、鸡卵清白蛋白（OVA）等为原料，采用活泼酯法和EDE双功能团活泼试剂方法分别合成2种免疫原和2种包被原。以免疫原免疫家兔制备多克隆抗体，以建立的间接ELISA方法来测定多克隆抗体效价及灵敏度。结果表明，免疫原SPE-CMO-BSA具有良好的免疫原性，制备的多克隆抗体经ELISA检测效价可达1∶160000，IC₅₀为0.484 ng/mL。本研究结果为下一步SPE残留快速检测试剂盒的研制奠定了基础。

关键词: 大观霉素; 免疫原; 多克隆抗体; 效价

Abstract: Using spectinomycin (SPE), carboxyl methyl hydroxylamine hydrochloride （CMO）， glycol diglycidyl ether （EDE）, bovine serum albumin (BSA) and ovalbumin （OVA） as the main stuff, four artificial-immunogens had been obtained by the N-hydroxysuccinimide-activated ester method and the EDE double functional group method. Ten female rabbits were immunized with this two artificial-immunogens. Animal immune test demonstrated that there were antibodies against SPE in rabbits sera. The polyclonal antibody was measured with indirect ELISA test. The titer was 1∶160000 and the IC₅₀ was 0.484 ng/mL. This study laid the basis for further research on the immune test kit for the SPE remnant.

Key words: spectinomycin; immunogen; polyclonal antibody; titer

王照鹏，李向梅，徐飞，王文珺，苏丽芳，温凯，吴小平. 大观霉素人工抗原的合成及其多克隆抗体制备[J]. 中国畜牧兽医.

WANG Zhao-peng, LI Xiang-mei, XU Fei, WANG Wen-jun, SU Li-fang, WEN Kai, WU Xiao-ping. Synthesis of Artificial Antigen of Spectinomycin and Preparation of its Polyclonal Antibody[J]. .

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