鸭新城疫病毒与番鸭细小病毒二重PCR方法的建立

›› 2013, Vol. 40 ›› Issue (11): 63-66.

鸭新城疫病毒与番鸭细小病毒二重PCR方法的建立

张艳芳, 谢芝勋, 谢丽基, 刘加波, 范晴, 庞耀珊, 邓显文, 谢志勤

广西壮族自治区兽医研究所, 广西畜禽疫苗新技术重点实验室, 广西南宁 530001

收稿日期:2013-04-22 出版日期:2013-11-20 发布日期:2013-12-19
通讯作者: 谢芝勋 E-mail:xiezhixun@126.com
作者简介:张艳芳(1987-),女,广西人,硕士,研究方向:动物传染病与病原分子生物学。
基金资助:
国家百千万人才工程人选专项资金(945200603);广西特聘专家专项经费(2011B020);广西科技项目(桂科攻10100014-5、桂科专项11-3);广西畜禽疫苗新技术重点实验室专项(桂科攻12-071-28-A-3、1123007-4、12-071-28-A-4)。

Establishment of a Duplex PCR Assay for Detection of Duck Newcastle Disease Virus and Muscovy Duck Parvovirus

ZHANG Yan-fang, XIE Zhi-xun, XIE Li-ji, LIU Jia-bo, FAN Qing, PANG Yao-shan, DENG Xian-wen, XIE Zhi-qin

Guangxi Key Laboratory of Animal Vaccines and New Technology, Guangxi Veterinary Research Institute, Nanning 530001, China

Received:2013-04-22 Online:2013-11-20 Published:2013-12-19

摘要/Abstract

摘要： 根据GenBank中新城疫病毒(NDV)L基因和番鸭细小病毒(MDPV)Vp3基因的保守序列,采用Primer Premier 5.0软件设计并合成了2对引物。通过优化反应条件及特异性、敏感性评价,建立了能同时检测鸭源NDV和MDPV的二重PCR方法。该方法对鸭源NDV和MDPV的检测敏感性分别为30和16 fg。同时使用该方法对鸭瘟病毒、鸭肝炎病毒、鸭圆环病毒、H9亚型禽流感病毒、鸭黄病毒、沙门氏菌、大肠杆菌和禽多杀性巴氏杆菌进行检测,结果显示全为阴性。本研究建立的鸭源NDV和MDPV的二重PCR检测方法,具有特异、敏感、快速、重复性好等优点,可用于鸭源NDV和MDPV感染的快速鉴别检测。

关键词: 鸭源新城疫病毒; 番鸭细小病毒; 二重PCR

Abstract: According to the gene sequences of duck Newcastle disease virus (NDV) L gene and Muscovy duck parvovirus (MDPV) Vp3 gene in GenBank, two sets of specific primers were designed by Primer Premier 5.0. The duplex PCR assay was developed through optimization of reaction conditions and validation of specificity, sensitivity and repetitiveness of the method. The sensitivity of the assay was 30 fg for NDV and 16 fg for MDPV. No specific bands of the same sizes were amplified from other duck pathogens, such as duck plague virus, duck hepatitis virus, duck circovirus, H9 subtype avian influenza virus, duck flavivirus, Salmonella, E.coli, avian Pasteurella multocida. This duplex PCR assay was a quick, sensitive and specific test for detection of duck NDV and MDPV, and would be useful for the control of these viruses in ducks.

Key words: duck Newcastle disease virus; Muscovy duck parvovirus; duplex PCR

中图分类号:

张艳芳, 谢芝勋, 谢丽基, 刘加波, 范晴, 庞耀珊, 邓显文, 谢志勤. 鸭新城疫病毒与番鸭细小病毒二重PCR方法的建立[J]. , 2013, 40(11): 63-66.

ZHANG Yan-fang, XIE Zhi-xun, XIE Li-ji, LIU Jia-bo, FAN Qing, PANG Yao-shan, DENG Xian-wen, XIE Zhi-qin. Establishment of a Duplex PCR Assay for Detection of Duck Newcastle Disease Virus and Muscovy Duck Parvovirus[J]. , 2013, 40(11): 63-66.

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