氯丙嗪对大鼠离体培养卵巢颗粒细胞凋亡的影响

›› 2011, Vol. 38 ›› Issue (12): 57-60.

氯丙嗪对大鼠离体培养卵巢颗粒细胞凋亡的影响

邬静^1,2, 袁慧¹, 文利新^1,3, 彭双清²

1. 湖南农业大学动物医学院,湖南长沙 410128;2. 军事医学科学院疾病预防控制所,北京 100071;3. 长沙绿叶生物科技有限公司,湖南长沙 410125

收稿日期:2011-04-12 修回日期:1900-01-01 出版日期:2011-12-20 发布日期:2011-12-20
通讯作者: 彭双清

Effect of Chlorpromazine on Apoptosis of Rat Ovary Granulose Cells in Vitro

WU Jing^1,2, YUAN Hui¹, WEN Li-xin^1,3, PENG Shuang-qing²

1. College of Veterinary Medicine,Hunan Agricultural University,Changsha 410128,China;2. Institute of Disease Control and Prevention,Academy of Military Medical Science,Beijing 100071,China;3. Hunan Changsha Luye Bio-technology Co.Ltd., Changsha 410125,China

Received:2011-04-12 Revised:1900-01-01 Online:2011-12-20 Published:2011-12-20

摘要/Abstract

摘要： 本试验旨在通过氯丙嗪对颗粒细胞凋亡影响的研究,探讨氯丙嗪对雌性大鼠性腺毒性的作用机制。对未成熟的Wistar大鼠卵巢颗粒细胞进行原代培养,用不同浓度的氯丙嗪(0、0.1、1、10 μmol/L)染毒细胞,细胞培养24 h。染毒结束后采用MTT法检测细胞相对活力,荧光染料Hoechest 33258检测颗粒细胞的凋亡变化,RT-PCR检测凋亡调控基因Bax、Bcl-2和P53 mRNA的表达。在本试验所设置的剂量范围内,与对照组比较,氯丙嗪能极显著促进颗粒细胞凋亡(P＜0.01),呈浓度依赖关系;RT-PCR检测则显示氯丙嗪能引起Bcl-2、Bax、P53 mRNA表达水平和Bax mRNA/Bcl-2 mRNA值升高,除低剂量组的Bax mRNA表达水平和Bax mRNA/Bcl-2 mRNA值无明显改变外,其余各组与对照组相比均差异极显著(P＜0.01)。氯丙嗪可显著抑制大鼠卵巢颗粒细胞活力,诱导颗粒细胞凋亡。

关键词: 氯丙嗪; 卵巢颗粒细胞; 细胞活力; 细胞凋亡

Abstract: The aim is to investigate the relationship between female gonad toxicity of chlorpromazine on rat and the apoptosis of granulosa cells. Immature ovarian granulosa cell of Wistar rat was primary cultured, cells were cultured and treated with different concentration chlorpromazine(0, 0.1, 1, 10 μmol/L) for 24 h. After exposured to chlorpromazine 24 h, cell viability was detected by MTT assay, apoptotic cells were identified microscopically by chromatin condensation and nuclear fragmentation with Hoechest 33258, mRNA expressions of Bax, Bcl-2 and P53 were determined by reverse transcriptase-polymerase Chain reaction (RT-PCR). Compared to control group, chlorpromazine could inhibit the proliferation of ovarian granulosa cell (P<0.01) in a concentration-dependent way. RT-PCR detection showed that chlorpromazine upregulated the mRNA expression of Bax, P53 and the mRNA ratio of Bax/Bcl-2. Compared with control group, the differences between relevant indicators was statistically significant(P＜0.01) except Bax and Bax/Bcl-2 of low group. Chlorpromazine may serve as an important endocrine disrupting medicine, mediating rat granulose cell apoptosis in vitro. The effect is bidirectional and concentration dependent.

Key words: chlorpromazine; ovary granulosa cells; cell viability; apoptosis

中图分类号:

Q813

邬静;袁慧;文利新;彭双清. 氯丙嗪对大鼠离体培养卵巢颗粒细胞凋亡的影响[J]. , 2011, 38(12): 57-60.

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