抗庆大霉素噬菌体抗体库的构建和筛选

›› 2011, Vol. 38 ›› Issue (1): 76-80.

抗庆大霉素噬菌体抗体库的构建和筛选

孟辉，温凯，沈建忠，王战辉，张素霞

（中国农业大学动物医学院，北京 100193）

收稿日期:1900-01-01 修回日期:1900-01-01 出版日期:2011-01-01 发布日期:2011-01-01
通讯作者: 张素霞

Construction of Anti-gentamicin Phage Display scFv Libraries，Selection and Identification

MENG Hui,WEN Kai,SHEN Jian-zhong,WANG Zhan-hui,ZHANG Su-xia

(College of Veterinary Medicine，China Agricultural University，Beijing 100193，China)

Received:1900-01-01 Revised:1900-01-01 Online:2011-01-01 Published:2011-01-01
Contact: ZHANG Su-xia

摘要/Abstract

摘要： 本研究使用噬菌体抗体库技术筛选针对庆大霉素（gentamicin）的单链抗体。以抗庆大霉素杂交瘤细胞株（2A3）为基因来源构建scFv基因，连接至pCANTAB5E噬菌粒载体，通过电击转化TG1（Escherichia coli TG1）构建了库容量为6.5×106噬菌体单链抗体库。抗庆大霉素噬菌体单链抗体库进行三轮富集筛选，通过Phage-ELISA技术成功筛选出了9个抗庆大霉素噬菌体阳性克隆，为开发新型残留检测用抗体奠定了基础。

关键词: 庆大霉素; 噬菌体抗体库; 单链抗体

Abstract: In this study, we constructed a phage display antibody library specific for gentamicin (GEN) to get the anti-getamicin single chain antibody(scFv). We used the anti-gentamicin hybridoma (2A3) as a source of gene to produce full-length scFv fragment. The full-length scFv fragment was ligated into the phagemid vector pCANTAB5E. Then the phagemid was transformed to E.coli TGl cells by electroporation. The size of antibody libraries was 6.5×106. The primary phage display library was riched by stabilized antigen immunoaffinity panning with GEN-OVA conjugates. 9 clones congtained insert and showed GEN-positive in phage-ELISA, which lay the foundation for further immunological analysis.

Key words: gentamicin; phage display antibody library; single chain antibody

中图分类号:

R392

孟辉;温凯;沈建忠;王战辉;张素霞. 抗庆大霉素噬菌体抗体库的构建和筛选[J]. , 2011, 38(1): 76-80.

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