猪繁殖与呼吸综合征病毒NVDC-JXA1株膜基质蛋白单克隆抗体的研制

›› 2009, Vol. 36 ›› Issue (11): 70-73.

猪繁殖与呼吸综合征病毒NVDC-JXA1株膜基质蛋白单克隆抗体的研制

王元^1,2，胡鸿惠^2，3，秦亚曼²，张倩²，邓小雨²，曹振²，王传彬²，冉多良¹，田克恭^2

（1.新疆农业大学动物医学院，乌鲁木齐 830052；2.中国动物疫病预防控制中心，北京 100193；3.中国农业大学动物医学院，北京 100193）

收稿日期:1900-01-01 修回日期:1900-01-01 出版日期:2009-11-20 发布日期:2009-11-20
通讯作者: 曹振

Development of Monoclonal Antibodies against Matrix Protein ofPRRSV NVDC-JXA1 Strain

WANG Yuan^1，2， HU Hong-hui^2，3， QIN Ya-man²， ZHANG Qian²， DENG Xiao-yu²，CAO Zhen²， WANG Chuan-bin²， RAN Duo-liang¹， TIAN Ke-gong^2

（1.College of Veterinary Medicine，Xinjiang Agricultural University，Urumqi 830052，China；2.China Animal Disease Control Center，Beijing 100193，China；3.College of Veterinary Medicine，China Agricultural University，Beijing 100193）

Received:1900-01-01 Revised:1900-01-01 Online:2009-11-20 Published:2009-11-20
Contact: CAO Zhen

摘要/Abstract

摘要： 为制备抗猪繁殖与呼吸综合征病毒NVDC-JXA1株单克隆抗体，用纯化的猪繁殖与呼吸综合征病毒NVDC-JXA1株免疫BALB/c小鼠，最后一次免疫后第3天取其脾细胞与SP2/0细胞在聚乙二醇作用下融合，通过酶联免疫吸附试验（ELISA）和间接免疫荧光试验（IFA）筛选，以有限稀释法克隆3次，制备单克隆抗体，并对制备的单克隆抗体进行鉴定。结果表明获得了2株分泌PRRSV膜基质蛋白特异性抗体的杂交瘤细胞，命名为1D12、5H5，经鉴定其抗体亚型分别为IgG2b、IgM，2株均为κ链，腹水ELISA效价分别为1∶107和1∶105。该单克隆抗体与PRV、PPV、PCV、CSFV、JEV无交叉反应。作者成功制备了抗猪繁殖与呼吸综合征病毒NVDC-JXA1株膜基质蛋白单克隆抗体，为进一步建立相关诊断方法奠定了基础。

关键词: 猪繁殖与呼吸综合征病毒; 单克隆抗体; 膜基质蛋白

Abstract: To develop and characterize monoclonal antibody (McAb) against porcine reproductive and respiratory syndrome virus NVDC-JXA1 strain (PRRSV NVDC-JXA1 strain) for related research work.BALB/c mice were immunized conventionally with the purified virions of PRRSV NVDC-JXA1 strain.On the third day after the final immunization，spleen cells of mice fused with myeloma cells SP2/0 were filtered by culturing selectively，diluting finitely，enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and IFA test，to obtain the subtypes from the clone line by ELISA test.As a result，the cell lines secreted McAbs stably by culturing in vitro and recovery tests were obtained and named as 1D12，5H5 respectively，the ELISA titers of ascites was 1∶107，1∶105 respectively.The subtypes of the two McAbs were identified as IgG2b and IgM，Kappa light chain.The two McAbs reacted specifically with only matrix protein of PRRSV but not with PRV，PPV，PCV，CSFV，JEV by indirect-ELISA.The McAbs will be very useful as specific reagents in diagnosis and control of PRRS.

Key words: PRRSV; monoclonal antibody; matrix protein

中图分类号:

S852.65⁺9.6

王元;胡鸿惠;秦亚曼;张倩;邓小雨;曹振;王传彬;冉多良;田克恭. 猪繁殖与呼吸综合征病毒NVDC-JXA1株膜基质蛋白单克隆抗体的研制[J]. , 2009, 36(11): 70-73.

WANG Yuan;HU Hong-hui;QIN Ya-man;ZHANG Qian;DENG Xiao-yu;CAO Zhen;WANG Chuan-bin;RAN Duo-liang;TIAN Ke-gong. Development of Monoclonal Antibodies against Matrix Protein ofPRRSV NVDC-JXA1 Strain[J]. , 2009, 36(11): 70-73.

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