绒山羊细菌人工染色体BAC文库构建条件的优化

›› 2009, Vol. 36 ›› Issue (10): 55-58.

绒山羊细菌人工染色体BAC文库构建条件的优化

刘志红¹，李宁²，任立明²，胡晓湘²，郭英²，崔文涛³，尹俊¹，张文广¹，李金泉¹

（1.内蒙古农业大学动物科学与医学学院，呼和浩特 010018； 2.中国农业大学农业生物技术国家重点实验室，北京 100193；3.中国农业科学院北京畜牧兽医研究所，北京 100193）

收稿日期:1900-01-01 修回日期:1900-01-01 出版日期:2009-10-20 发布日期:2009-10-20
通讯作者: 李金泉

Optimizing the Constructing Condition of Bacterial Artificial Chromosome Library in the Cashmere Goat

LIU Zhi-hong¹, LI Ning², REN Li-ming², HU Xiao-xiang², GUO Ying², 
CUI Wen-tao³, YIN Jun¹, ZHANG Wen-guang¹, LI Jin-quan^1

(1.College of Animal Science and Medicine, Inner Mongolia Agricultural University, Hohhot 010018, China; 2.State Key Laboratory for Agrobiotechnology, China Agricultural University, Beijing 100193, China; 3.Institute of Animal Sciences, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100193, China)

Received:1900-01-01 Revised:1900-01-01 Online:2009-10-20 Published:2009-10-20

摘要/Abstract

摘要： 近年来，细菌人工染色体BAC文库成为应用最广泛的基因组文库之一，它以其容量大、遗传特性稳定、嵌合体少、插入片段易回收、操作简便等不可比拟的优点而被广泛应用于基因组较大的真核生物基因组研究之中。作者就细菌人工染色体BAC文库的构建条件进行了研究，用HindⅢ部分酶切绒山羊基因组，脉冲场凝胶电泳分离大片段DNA，以电洗脱法回收DNA后，与BAC载体连接，将连接产物点透析后，电转化DH10B感受态细胞，最后对转化的片段小提质粒进行NotⅠ酶切，脉冲电泳鉴定其大小。结果表明，本试验采用的方法既可获得较大的插入片段又可获得较高的转化效率，是较好的用于构建大基因组文库的方法。

关键词: 细菌人工染色体; 文库; 构建条件 

Abstract: In recent years, bacterial artificial chromosome (BAC) library has become one of the most popular used genome library, and it is used generally in the research of eukaryotic organism that has longer genome by its advancement including larger capacity, stable inherited characteristic, few chimera, easily reclaiming insertion element, convenient operation and so on. This article researched the constructing condition of BAC library, cutting the goat’s chromosome by HindⅢ enzyme, separating the big DNA fragment by pulsed field gel electrophoresis, reclaiming DNA by electrodialysis, linking with BAC bearer taken off phosphorous, transforming competent cell DH10B by elutriations, and finally evaluating the length of fragment by cutting the DNA with NotⅠenzyme. The consequence indicated that the method that this research chose can get not only the longer insertion element, but also the higher converting efficiency, and it is the better method to construct the bigger genome BAC library.

Key words: bacterial artificial chromosome; library; constructing condition

中图分类号:

S827.2

刘志红;李宁;任立明;胡晓湘;郭英;崔文涛;尹俊;张文广;李金泉. 绒山羊细菌人工染色体BAC文库构建条件的优化[J]. , 2009, 36(10): 55-58.

LIU Zhi-hong;LI Ning;REN Li-ming;HU Xiao-xiang;GUO Ying;CUI Wen-tao;YIN Jun;ZHANG Wen-guang;LI Jin-quan. Optimizing the Constructing Condition of Bacterial Artificial Chromosome Library in the Cashmere Goat[J]. , 2009, 36(10): 55-58.

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