片形吸虫Cold-SSCP鉴别方法的建立

›› 2007, Vol. 34 ›› Issue (2): 86-88.

片形吸虫Cold-SSCP鉴别方法的建立

邓国祥1，张汉云2，陈蓓蓉1，李秋燕1，林瑞庆1，马妮妮1，朱兴全1

1.华南农业大学兽医学院，广州 510642; 2.广州市番禺区市桥城区畜牧兽医站，广州 511400

收稿日期:1900-01-01 修回日期:1900-01-01 出版日期:2007-02-20 发布日期:2007-02-20

Development of a Cold-SSCP Technique for the Identification of Fasciola Spp

DENG Guoxiang1，ZHANG Hanyun2,CHEN Beirong1，LI Qiuyan1，LIN Ruiqing1, MA Nini1， ZHU Xingquan1

1.College of Veterinary Medicine, South China Agricultural University，Guangzhou 510642，China; 2.Shiqiao Animal Husbandry and Veterinary Station, Panyu District, Guangzhou 511400, China

Received:1900-01-01 Revised:1900-01-01 Online:2007-02-20 Published:2007-02-20

摘要/Abstract

摘要： 以采自我国不同地区的片形吸虫虫体为研究对象，PCR扩增出核糖体DNA (rDNA)的第一内转录间隔区(ITS-1)序列，然后采用非同位素的单链构象多态性(Cold-SSCP)方法分析PCR产物，对不同地区片形吸虫进行分子鉴定。所有样品经Cold-SSCP分析显示2种带型。样品测序及序列分析结果表明，第1种为肝片形吸虫带型，另1种为大片形吸虫带型。本研究建立了区分大片形吸虫和肝片形吸虫的ColdSSCP方法，可用于这2种吸虫的分子流行病学调查，从而为片形吸虫分子生物学的进一步研究奠定了基础。

关键词: 片形吸虫; rDNA; ITS-1; Cold-SSCP

Abstract: A nonisotopic single strand conformation polymorphism (ColdSSCP) technique was established to differentiate fasciola hepatica from fasciola gigantica from different geographical locations in China using the first internal transcribed spacers (ITS1) of ribosomal DNA (rDNA) as genetic marker. The partial ITS1 was amplified by PCR from individual fasciola and the amplicons were subjected to nondenaturing gel electrophoresis. ColdSSCP analyses showed that fhepatica and fgigantica displayed distinct SSCP profiles, allowing their equivocal differentiation from each other. Sequencing analyses supported the results of ColdSSCP. The establishment of the ColdSSCP approach for the identification and differentiation of
fhepatica and fgigantica has important implications for further studies of fasciola spp. 

Key words: fasciola; rDNA; ITS-1; Cold-SSCP

中图分类号:

S852.73+5

邓国祥;张汉云;陈蓓蓉;李秋燕;林瑞庆;马妮妮;朱兴全. 片形吸虫Cold-SSCP鉴别方法的建立[J]. , 2007, 34(2): 86-88.

DENG Guoxiang;ZHANG Hanyun;CHEN Beirong;LI Qiuyan;LIN Ruiqing;MA Nini;ZHU Xingquan . Development of a Cold-SSCP Technique for the Identification of Fasciola Spp [J]. China Animal Husbandry & Veterinary Medicine, 2007, 34(2): 86-88.

[1]	董佳强, 马志刚, 霍明东, 王志强, 黄宇翔, 邹跃, 郭文凯, 吕明哲, 张红, 杨昊天, 杨坤, 魏念冬, 周景明, 韩永胜, 江波涛, 陈志峰. 基于16S rDNA高通量测序技术分析限制基础饲粮补饲水培大麦苗对籽鹅肠道菌群的影响[J]. 中国畜牧兽医, 2024, 51(5): 1921-1930.
[2]	王源朗, 齐平平, 丁海生, 赵辉玲, 黄冬维. 基于16S rDNA测序分析不同剩余采食量皖南黄兔盲肠中微生物菌落多样性[J]. 中国畜牧兽医, 2024, 51(2): 549-557.
[3]	李鹤龄, 陈智岗, 宗发梁, 宁卿, 严玉霖, 王宏. 基于16S rDNA测序分析毛滴虫对猕猴肠道菌群结构的影响[J]. 中国畜牧兽医, 2024, 51(11): 4974-4983.
[4]	章志涛, 李祥龙, 孔令丽, 罗雨昕, 王冬英. 大片形吸虫丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶2A的原核表达及不同时期表达水平分析[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(3): 1107-1117.
[5]	容敏靖, 万锈琳, 陈洵, 谭迪明, 刘军, 石磊, 邹忠爱. 基于16S rDNA测序分析生态养殖对猪粪细菌群落的影响[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(12): 4858-4867.
[6]	王乐铭, 王瑜瑞, 曾子轩, 饶国顺, 吴正姣, 靳纬坤, 王冬英. 抗大片形吸虫Cat L1单克隆抗体的制备及其双抗体夹心ELISA检测方法的建立[J]. 中国畜牧兽医, 2022, 49(2): 677-686.
[7]	李文菁, 魏凯敏, 张少秋, 陈勇. 核桃青皮及其提取物对黄羽肉仔鸡肠道形态、黏膜抗氧化性能及微生物多样性的影响[J]. 中国畜牧兽医, 2021, 48(6): 2056-2065.
[8]	陶志云, 朱春红, 施祖灏, 徐文娟, 章双杰, 宋卫涛, 刘宏祥, 李慧芳. 鸭疫里默氏菌感染对鸭肠道菌群结构的影响[J]. 中国畜牧兽医, 2021, 48(6): 2129-2139.
[9]	李希, 毛杨毅, 罗惠娣, 赵鹏, 李俊, 张丽, 李春艳, 王宏浩. 饲粮纤维水平对育肥羔羊瘤胃微生物组成及多样性的影响[J]. 中国畜牧兽医, 2021, 48(4): 1251-1263.
[10]	田秋丰, 张红, 尹珺伊, 刘秋瑾, 张军, 王岩, 秦平伟, 朱庆贺, 苗艳, 陈楠楠, 张淑芬, 丁昕颖, 马姗姗, 王振. 1株奶牛源松鼠葡萄球菌的分离鉴定及耐药性分析[J]. 中国畜牧兽医, 2021, 48(4): 1482-1488.
[11]	曾维欢, 刘影波, 李蓉, 肖望成, 段纲, 秦莉, 代飞燕. 核桃青皮水提物对肉鸡肠道微生物菌群结构的影响[J]. 中国畜牧兽医, 2020, 47(2): 612-619.
[12]	胡丽莉, 孙彦, 刘莹莹, 王晨, 卜艳珍. 细口杯环线虫形态学和分子特征分析[J]. 《中国畜牧兽医》, 2019, 46(1): 271-278.
[13]	石征宇, 易弋, 韩书煜, 罗福广, 黄杰, 鲁晶娣, 黎娅. 黄颡鱼迟钝爱德华菌的分离鉴定及其致病性研究[J]. 《中国畜牧兽医》, 2018, 45(3): 807-813.
[14]	石征宇, 易弋, 黄德生, 罗福广, 黄杰, 鲁晶娣, 黎娅. 一株弗氏柠檬酸杆菌的分离鉴定及致病性研究[J]. 《中国畜牧兽医》, 2018, 45(2): 479-485.
[15]	胡丹丹, 郭婷婷, 李娜, 张力莉, 徐晓锋. 以16S rDNA高通量测序法研究果寡糖对奶牛瘤胃菌群结构及多样性的影响[J]. 《中国畜牧兽医》, 2018, 45(10): 2761-2771.