日本乙型脑炎病毒SA14-14-2株NS1-Flag蛋白在293T细胞中的表达

›› 2011, Vol. 38 ›› Issue (9): 40-43.

日本乙型脑炎病毒SA14-14-2株NS1-Flag蛋白在293T细胞中的表达

臧富玉, 亓文宝, 陈孝明, 刘国乾, 李红梅, 廖明

华南农业大学兽医学院农业部动物疫病防控重点开放实验室,广东广州 510642

收稿日期:2011-01-21 修回日期:1900-01-01 出版日期:2011-09-20 发布日期:2011-09-20
通讯作者: 廖明

Eukaryotic Expression of NS1-Flag Protein of Japanese Encephalitis Virus SA14-14-2 in 293T Cells

ZANG Fu-yu, QI Wen-bao, CHEN Xiao-ming, LIU Quo-qian, LI Hong-mei, LIAO Ming

Key Laboratory of Animal Disease Control and Prevention of Ministry of Agriculture, College of Veterinary Medicine, South China Agricultural University, Guangzhou 510642, China

Received:2011-01-21 Revised:1900-01-01 Online:2011-09-20 Published:2011-09-20

摘要/Abstract

摘要： 通过RT-PCR方法扩增出日本乙型脑炎病毒SA14-14-2株的NS1基因,利用Hind Ⅲ和Hpa Ⅰ双酶切克隆到带有Flag标签的pcDNA3.1载体上,重组质粒命名为pcDNA3.1-NS1-Flag。脂质体法转染293T细胞后,经间接免疫荧光(IFA)和化学荧光Western blotting检测,证明带有Flag标签的NS1基因在293T细胞中得到高效表达。

关键词: 日本乙型脑炎; NS1-Flag融合蛋白; 真核表达; 293T细胞

Abstract: RT-PCR was performed on the total RNA extracted from Japanese encephalitis virus (JEV)SA14-14-2 to obtain the cDNA of NS1,the cDNA was edonuclease digestion by Hind Ⅲ/HpaⅠand cloned into a vector pcDNA3.1-Flag. The recombinant plasmid was named plasmid pcDNA3.1-NS1-Flag, identified correctly by DNA sequencing and restriction enzyme analysis.The plasmid pcDNA3.1-NS1-Flag was transfected into 293T cell by means of liposome and its expression was examined by immunofluorescence assay and Western blotting,the results showed that NS1 protein could express in 293T cell.

Key words: Japanese encephalitis virus; NS1-Flag protein; eukaryotic expression; 293T cell

中图分类号:

臧富玉;亓文宝;陈孝明;刘国乾;李红梅;廖明. 日本乙型脑炎病毒SA14-14-2株NS1-Flag蛋白在293T细胞中的表达[J]. , 2011, 38(9): 40-43.

ZANG Fu-yu;QI Wen-bao;CHEN Xiao-ming;LIU Quo-qian;LI Hong-mei;LIAO Ming. Eukaryotic Expression of NS1-Flag Protein of Japanese Encephalitis Virus SA14-14-2 in 293T Cells[J]. China Animal Husbandry & Veterinary Medicine, 2011, 38(9): 40-43.

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