新城疫病毒HN基因功能结构域的原核表达

›› 2011, Vol. 38 ›› Issue (8): 89-92.

新城疫病毒HN基因功能结构域的原核表达

俞宁¹, 张兆敏^2,3, 岳华^2,4

1. 成都农业科技职业学院,四川成都 611130;2. 西南民族大学生命科学与技术学院,四川成都 610041;3. 高密市畜牧局,山东潍坊 261500;4. 动物医学四川省高等院校重点建设实验室,四川成都 610041

收稿日期:2010-12-19 修回日期:1900-01-01 出版日期:2011-08-20 发布日期:2011-08-20
通讯作者: 岳华

Prokaryotic Expression of Function Domain of the Newcastle Disease Virus HN Gene

YU Ning¹, ZHANG Zhao-min^2,3, YUE Hua^2,4

1. Chengdu Vocational College of Agricultural Science and Technology,Chengdu 611130,China;2. College of Life Science and Technology,Southwest University for Nationalities, Chengdu 610041,China;3. Animal Husbandry Bureau of Gaomi,Weifang 261500,China;4. Veterinary Medicine of Sichuan Province Key Laboratory for Colleges and Universities,Chengdu 610041,China

Received:2010-12-19 Revised:1900-01-01 Online:2011-08-20 Published:2011-08-20

摘要/Abstract

摘要： 本研究对新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)分离株sc05的HN基因进行了克隆、序列测定,在此基础上将其C端功能结构域76－571 aa片段亚克隆到pET32a(＋)表达载体上,构建重组表达质粒pET32a-HN,鉴定正确后转化进BL21 plysS(DE3)细胞,筛选出阳性克隆,用1 mmol/L IPTG 诱导表达,并对表达产物进行鉴定。SDS-PAGE电泳结果显示,HN基因功能结构域片段在 BL21 plysS(DE3)细胞中实现融合表达,表达产物大小约为76 ku,Western blotting试验证实其能与NDV阳性血清反应。本研究为进一步研究HN蛋白功能结构域的免疫原性和研制鸡新城疫HN基因工程疫苗奠定了基础。

关键词: NDV; HN基因; 克隆; 功能结构域; 原核表达

Abstract: In this study,HN gene of Newcastle disease virus(NDV) isolate sc05 was cloned,sequenced,on this basis,the 76 to 571 aa fragment of C-terminal function domain was subcloned into pET32a(＋) expression vector,obtained recombinant expression plasmid pET32a-HN. pET32a-HN was identificated to be correct, and it was transfored into BL21 plysS(DE3) cells. Selected positive clones, induced expression by 1 mmol/L IPTG, and the expression products were identified. SDS-PAGE electrophoresis showed that HN gene function domain fragments in BL21 plysS(DE3) cells achieved fusion expression, size of the recombinant protein was about 76 ku, Western blotting confirmed the biological activity of recombinant protein. This work was benefit for further study of the functional domains of the HN protein immunogenicity and the development of the HN gene of Newcastle disease vaccine project.

Key words: NDV; HN gene; clone; function domain; prokaryotic expression

中图分类号:

俞宁;张兆敏;岳华;. 新城疫病毒HN基因功能结构域的原核表达[J]. , 2011, 38(8): 89-92.

YU Ning;ZHANG Zhao-min;YUE Hua;. Prokaryotic Expression of Function Domain of the Newcastle Disease Virus HN Gene[J]. China Animal Husbandry & Veterinary Medicine, 2011, 38(8): 89-92.

[1]	刘敏, 程淮, 郑珍珍, 张梦思, 张贺伟, 任静强. 犬副流感病毒N蛋白的真核表达及多克隆抗体制备[J]. 中国畜牧兽医, 2025, 52(5): 2287-2294.
[2]	张莹, 陈广振, 刘梅, 李红霞, 俞燕, 贾雪波, 李雯倩, 范建华, 马志禹. 半番鸭NMB基因克隆、生物信息学和组织表达分析[J]. 中国畜牧兽医, 2025, 52(4): 1705-1715.
[3]	司维, 谭茜宇, 徐玲芸, 罗廷荣, 李晓宁, 顾金燕. H3N2亚型猪流感病毒HA1蛋白的原核表达及多克隆抗体制备[J]. 中国畜牧兽医, 2025, 52(4): 1739-1749.
[4]	洪嘉俊, 肖金华, 张政, 杨雨婷, 方春, 韩旭. sod基因缺失对单增李斯特菌10403S抗氧化应激作用的影响[J]. 中国畜牧兽医, 2025, 52(4): 1776-1783.
[5]	苗书魁, 米晓云, 魏婕, 魏玉荣, 海力且木·买买提依明. G8型牛轮状病毒VP7基因克隆及生物信息学分析[J]. 中国畜牧兽医, 2025, 52(4): 1784-1795.
[6]	黄念旎, 黄子珂, 李聪聪, 刘晗, 马诗语, 宋果, 蒋亮, 彭为波, 杨联熙, 黄生强. 九疑山兔FGF10基因克隆、生物信息学及组织表达分析[J]. 中国畜牧兽医, 2025, 52(3): 1001-1010.
[7]	艾小楠, 程俐芬, 白璞, 陈正灏, 薛丽娜, 周胜花. 灵丘青背山羊ACSL1基因克隆、生物信息学分析及其在脂肪细胞分化过程中的表达研究[J]. 中国畜牧兽医, 2025, 52(2): 499-511.
[8]	王晴, 马瑜锴, 韩若冰, 邢海华, 孙子惠, 李和平. 梅花鹿CSRP3基因克隆、生物信息学分析及其在肌肉组织中的表达分析[J]. 中国畜牧兽医, 2025, 52(2): 740-748.
[9]	王小格, 司煊瑛, 闫志伟, 王飞, 尤龙琪, 刘梗, 蔡茂, 梁珺珹, 梁玉秀, 杜永坤, 张改平. 非洲猪瘟病毒p22蛋白单克隆抗体制备及其抗原表位鉴定[J]. 中国畜牧兽医, 2025, 52(2): 781-791.
[10]	赵文卿, 薄新文, 普娜, 张玉霞, 陈旭珂, 张艳艳, 孙艳, 齐萌, 王正荣. 细粒棘球绦虫EgBAL蛋白的生物信息学分析及原核表达[J]. 中国畜牧兽医, 2025, 52(2): 801-810.
[11]	谢蓓伊庭, 王悦, 孟春花, 钱勇, 张俊, 张建丽, 王慧利, 曹少先, 李隐侠. 湖羊PSMB9基因克隆、序列分析及对成肌细胞增殖的影响[J]. 中国畜牧兽医, 2025, 52(1): 1-12.
[12]	韩凤烨, 刘莹, 潘晨帆, 张乾义, 陈小云, 朱真, 印春生, 温永俊, 王凤雪, 杜吉革. 产气荚膜梭菌Alpha毒素突变体的表达及单克隆抗体制备[J]. 中国畜牧兽医, 2025, 52(1): 442-450.
[13]	郭晨云, 宋金星, 王梦翔, 孙俊如, 闫若潜, 谢彩华, 吴亚楠, 张改平. 非洲猪瘟病毒B602L蛋白的原核表达、纯化及多克隆抗体制备[J]. 中国畜牧兽医, 2024, 51(9): 3980-3989.
[14]	程晶, 陈沛霖, 郭禹, 崔锦蔷, 江波, 周林宜, 刘文晓, 李焕荣, 李永清. 牛早幼粒细胞白血病蛋白的原核表达及单克隆抗体制备[J]. 中国畜牧兽医, 2024, 51(9): 4014-4024.
[15]	崔艳艳, 王冠, 郝俊芳, 李志强, 余复昌, 史柯, 席丽, 齐萌. 嗜吞噬细胞无浆体MSP4蛋白的原核表达及其多克隆抗体制备[J]. 中国畜牧兽医, 2024, 51(9): 4036-4042.