猪胸膜肺炎放线杆菌抗体间接血凝检测法的建立

中国畜牧兽医

猪胸膜肺炎放线杆菌抗体间接血凝检测法的建立

郑教雀，刘琬婧，邓舜洲，王萍，何后军，邬向东

（江西农业大学动物科学技术学院，江西南昌 330045）

修回日期:2013-10-27 出版日期:2014-05-20 发布日期:2014-06-25
通讯作者: 邬向东（1968—），男，江西人，学士，副教授，主要从事预防兽医学教学与科研。
作者简介:郑教雀（1989—），男，福建人，硕士，研究方向：动物疫病预防控制。
基金资助:
江西省教育厅重点项目（GJJ10017）。

Establishment of Indirect Hemagglutination Assay for Antibodies Detection of APP

ZHENG Jiao-que，LIU Wan-jing，DENG Shun-zhou，WANG Ping，HE Hou-jun，WU Xiang-dong

（College of Animal Science and Technology, Jiangxi Agricultural University, Nanchang 330045，China）

Revised:2013-10-27 Online:2014-05-20 Published:2014-06-25

摘要/Abstract

摘要： 为了解江西省猪群猪传染性胸膜肺炎放线杆菌（APP）感染现状，本试验利用APP江西分离株研制了抗体间接血凝检测法（IHA）。试验将纯化的APP江西分离株培养菌液反复冻融，经超声波裂解处理后提取菌体抗原，致敏经戊二醛固定鞣酸化的兔红细胞，成功建立了APP抗体的IHA法。应用该法对猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪伪狂犬病病毒等病毒的阳性血清进行检测试验，结果均为阴性；对大肠杆菌、沙门氏菌、副猪嗜血杆菌阳性血清检测均为阴性。不同批次APP抗原经IHA检测，结果显示重复性好。本试验结果表明所建立的APP抗体IHA检测法有较好的特异性和重复性，为下一步血清学调查奠定基础。

关键词:

胸膜肺炎放线菌; 抗体; 间接血凝试验

Abstract: In order to understand the infection status of Actinobacillus pleuropneumoniae in Jiangxi province, we developed indirect hemagglutination assay (IHA) for detection of antibody by using APP isolates of Jiangxi province. IHA consisting of glutaraldehyde-tannic-fixed rabbit red blood cells (RRBC) coated with the supernatant of repetitive freeze-thawed and sonicated APP was established. The positive sera of hog cholera virus, porcine reproductive and respiratory syndrome virus, pseudorabies virus, Escherichia coli, Salmonella, Haemophilus parasuis showed negative results. Different batches of IHA antigen showed good repeatability. The results showed that the specificity and repeatability of IHA were good, which created the foundations for the serological survey.

Key words:

Actinobacillus pleuropneumoniae; antibody; indirect hemagglutination assay

郑教雀，刘琬婧，邓舜洲，王萍，何后军，邬向东. 猪胸膜肺炎放线杆菌抗体间接血凝检测法的建立[J]. 中国畜牧兽医.

ZHENG Jiao-que，LIU Wan-jing，DENG Shun-zhou，WANG Ping，HE Hou-jun，WU Xiang-dong. Establishment of Indirect Hemagglutination Assay for Antibodies Detection of APP[J]. .

参考文献

1 王天奇，董发明，潘耀谦，等. 洛阳地区猪弓形虫病血清学调查与分析［J］. 湖北畜牧兽医，2006(9):29～30.
2 王伟.周口市猪传染性胸膜肺炎流行病学调查与防治试验［D］.武汉:华中农业大学，2008.
3 王伟.猪传染性胸膜肺炎的检测与诊断方法［J］. 上海畜牧兽医通讯，2009(2):26～28.
4 王红梅，周岭辉.猪传染性胸膜肺炎的诊断及防治［J］. 动物科学与动物医学，2001，18(4)：52～54.
5 叶润全，冼琼珍，顾万军，等.广东猪群传染性胸膜肺炎的血清学调查及血清抗体分型试验［J］. 广东畜牧兽医科技，2007，32(1):30～31.
6 刘志南.放线杆菌胸膜肺炎及其血清学检测［A］.中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会成立20周年庆典暨第十次学术研讨会论文集（上）［C］.2003.
7 何启盖，吴斌，吴信明，等.猪接触传染性胸膜肺炎防制现状［J］.华中农业大学学报，2000，33(12)：55～62.
8 余光勇. 猪传染性胸膜肺炎放线杆菌的分离鉴定及ApxⅠA、TbpB基因的克隆和原核表达研究［D］.雅安:四川农业大学，2008.
9 吴峙宏.湖南部分地区猪传染性胸膜肺炎血清学调查与耐药性分析［D］.长沙：湖南农业大学，2009.
10 张志妮.猪胸膜肺炎放线杆菌感染特异性诊断方法的建立：PCR和夹心ELISA［D］.扬州：扬州大学，2009.
11 张朝阳，刘二龙.猪传染性胸膜肺炎研究进展［J］.中国畜牧兽医，2006，33(3)：68～70.
12 张嗣华.海南省规模化猪场主要呼吸道病原的血清流行病学调查及猪呼吸道综合征的防制［D］.武汉:华中农业大学，2007.
13 陈星星，游锦洲，林丽华，等. 用间接血凝试验(IHA)探究仔猪哺乳阶段的猪瘟抗体消长规律［J］. 龙岩学院学报，2009，27(5):89～96.
14 周明光.猪2型链球菌间接ELISA和间接血凝抗体检测方法的建立及应用［D］.武汉:华中农业大学，2007.
15 段艳萍.河南省猪传染性胸膜肺炎的血清学调查及其病原的分离鉴定［D］.雅安:四川农业大学，2006.
16 赵彦宗，贺东生，苏丹萍.猪胸膜肺炎放线杆菌血清3型间接血凝试验检测方法的建立［J］. 中国畜牧兽医，2010，37(11)：143～145.
17 徐引弟，王治方，朱文豪，等.间接血凝方法检测副猪嗜血杆菌抗体［J］. 中国畜牧兽医，2011，38(7)：189～192.
18 桂文龙，魏宁，刘运镇，等. 兴化市规模化猪场猪传染性胸膜肺炎血清学调查［J］.江苏农业科学，2011，39(5):311～313.
19 崔治中，崔保安.兽医免疫学［M］.北京：中国农业出版社，2004.
20 逯忠新，鲁炳义，赵萍.用间接血凝试验检测猪传染性胸膜肺炎［J］. 中国兽医科技，1999，29(10)：25～27.
21 傅彩霞，靳兴军，原丽，等.北京部分地区猪传染性胸膜肺炎血清学调查［J］. 动物医学进展，2009，29(10)：25～27.

[1]	焦琳琳, 成玉婷, 吴庆国, 吴双, 吴植, 朱善元, 钱莺娟. 鸭坦布苏病毒Capsid蛋白原核表达及多克隆抗体制备[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(6): 2395-2402.
[2]	欧云文, 潘琴, 汪洋, 代军飞, 任绍科, 张洋, 张杰. 猪细小病毒6型ORF2基因的截短表达及多克隆抗体制备[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(6): 2487-2495.
[3]	马继福, 阿德力·克坦, 解津刚, 巴合提·博代, 李振伟, 吾热力哈孜·哈孜汗. 基于噬菌体展示技术筛选抑制素α亚基特异性纳米抗体[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(5): 2032-2043.
[4]	王雪平, 张孝俊, 李晓月, 王国栋, 张福良, 宋玉伟, 张明亮, 马磊. 高致病性禽腺病毒血清4型Hexon蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(5): 2053-2060.
[5]	胡乐玉, 胡欣瑶, 李颖, 赵盛淼, 沈凤臻, 王长法, 李亮亮, 王彤彤, 任慧英. 德州驴HO-1基因生物信息学分析及多克隆抗体制备[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(4): 1499-1510.
[6]	王文婕, 茹鹏辉, 郁川, 杜付熙, 陈松彪, 尚珂, 张春杰, 程相朝. 猫细小病毒洛阳分离株VP2蛋白原核表达及多克隆抗体制备[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(4): 1511-1521.
[7]	马继福, 巴合提·博代, 黑子别克·哈孜别克, 李振伟, 吾热力哈孜·哈孜汗. 抑制素α亚基特异性纳米抗体基因筛选与鉴定[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(4): 1532-1542.
[8]	张国庆, 姜宇航, 张爽, 李乐天, 郝嘉翼, 陈竞, 邹万成, 李昌, 李太元, 高旭, 金宁一. 猪δ冠状病毒RBD蛋白多肽抗体的制备与鉴定[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(4): 1575-1583.
[9]	和琳, 韩佃刚, 李静, 杜萱, 张家翔, 信吉阁. 牛病毒性腹泻病毒检测方法研究进展[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(4): 1593-1602.
[10]	秦蓉芬, 贾琼, 于雷涛, 李佳敏, 迟志端, 范瑞文. STAT3纳米抗体的制备与功能鉴定[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(3): 1118-1128.
[11]	牟一娇, 于瑞明, 张莉萍, 王永录. 基于猪流行性腹泻病毒变异毒株重组全长S2蛋白IgA抗体ELISA检测方法的建立及应用[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(3): 1185-1194.
[12]	牛小杰, 徐明国, 肖莉, 刘文豪, 陈创夫, 王勇. 鸡白痢沙门氏菌IPAJ蛋白的表达纯化、多克隆抗体制备及ELISA方法的建立[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(3): 1218-1228.
[13]	侯浩宇, 郑南南, 吴宏举, 陈寅龙, 李潮, 张昂克, 姬鹏超, 万博, 杜永坤, 张改平. 非洲猪瘟病毒p30蛋白单克隆抗体制备和鉴定[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(3): 1241-1249.
[14]	肖莉, 牛小杰, 刘庆庆, 王月丽, 陈创夫, 易继海. 猪轮状病毒VP4基因重组腺病毒的构建及抗体水平评价[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(1): 260-269.
[15]	张凯, 张春平, 戈胜强, 孙春喜, 程杰, 伏春雨, 王刚, 牛星, 彭军. 非洲猪瘟病毒p22蛋白表达、多克隆抗体制备及间接ELISA方法的建立[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(1): 270-279.