鸡干扰素-α基因原核表达载体的构建及高效表达

中国畜牧兽医

鸡干扰素-α基因原核表达载体的构建及高效表达

刘成倩¹，王静¹^，2，李红^{1，于宗幸¹^，2，易建中^{1，陈磊¹^，2}}

（1.上海市农业科学院畜牧兽医研究所，上海 201106；2.上海海洋大学水产与生命学院，上海 201106）

出版日期:2014-04-20 发布日期:2014-05-27
通讯作者: 易建中，研究员。E-mail：yijianzhong@yahoo.com

Construction and High Level Expression of Prokaryotic Expression Vector of Chicken Interferon-α Gene

LIU Cheng-qian¹, WANG Jing¹^，2, LI Hong¹, YU Zong-xing ¹^，2, YI Jian-zhong¹, CHEN Lei¹^，2

(1. Animal Husbandry and Veterinary Research Institute, Shanghai Academy of Agricultural Sciences, Shanghai 201106, China; 2. College of Fisheries and Life Science, Shanghai Ocean University, Shanghai 201106, China)

Online:2014-04-20 Published:2014-05-27

摘要/Abstract

摘要： 干扰素（IFN）-α因其具有很强的抗病毒活性而备受关注。本研究根据GenBank上公布的鸡IFN-α核酸序列设计1对引物，用PCR方法扩增出鸡IFN-α基因，并将其克隆到原核表达载体pET-32a及pET-30a-DsbA上，得到重组质粒pET-32a-IFN-α及pET-30a-DsbA-IFN-α。将重组质粒转化大肠杆菌Transetta（DE3）感受态细胞，经SDS-PAGE电泳及Western blotting分析，结果表明pET-30a-DsbA-IFN-α表达量较高，表达的融合蛋白分子质量约40.4 ku，表达产物主要以包涵体形式存在，且表达的融合蛋白能与His标签单克隆抗体发生特异性反应。

关键词: 鸡；干扰素-α ；原核表达

Abstract: Interferon (IFN)-α had received much more attention for its comprehensive antiviral activity. According to the relevant sequence from GenBank, a pair of specific primers was designed for amplifying chicken IFN-α gene with PCR method. The IFN-α gene was cloned into prokaryotic expression vector pET-32a and pET-30a-DsbA and the protein’s expression was identified by SDS-PAGE. Immunity characteristic of the protein was analyzed by Western blotting. The cloned pET-30a-DsbA-IFN-α/E.coli was found to produce a 40.4 ku protein at the high level. The expression products existed mainly in the form of inclusion body. These expression products could specificly react with His-tag monoclonal antibody.

Key words: chicken; interferon-α; prokaryotic expression

刘成倩，王静，李红，于宗幸，易建中，陈磊. 鸡干扰素-α基因原核表达载体的构建及高效表达[J]. 中国畜牧兽医.

LIU Cheng-qian, WANG Jing, LI Hong, YU Zong-xing, YI Jian-zhong, CHEN Lei. Construction and High Level Expression of Prokaryotic Expression Vector of Chicken Interferon-α Gene[J]. .

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