抗κ-酪蛋白单克隆抗体的制备及其特性鉴定

中国畜牧兽医

抗κ-酪蛋白单克隆抗体的制备及其特性鉴定

张莹，周玉，李岩松，孟星宇，褚晓红，卢士英，任洪林，胡盼，柳增善，王男男，李丹

(人兽共患病研究教育部重点实验室，吉林大学人兽共患病研究所，吉林大学动物医学院，吉林长春 130062)

收稿日期:2013-09-26 出版日期:2014-03-20 发布日期:2014-05-15
通讯作者: 周玉(1969—），男，内蒙古人，教授，博士生导师，研究方向：食品及水环境安全。E-mail:zhouyu69@sina.com；Tel: 0431-87835734
作者简介:张莹(1987—），女，河北人，硕士生，研究方向：兽医公共卫生。
基金资助:
国家自然科学基金(61171022、60971011)。

Preparation and Characteristics Identification of Anti-kappa Casein Monoclonal Antibody

ZHANG Ying, ZHOU Yu, LI Yan-song，MENG Xing-yu，CHU Xiao-hong，LU Shi-ying，REN Hong-lin，HU Pan，LIU Zeng-shan，WANG Nan-nan，LI Dan

(Key Laboratory of Zoonosis, Ministry of Education, Institute of Zoonosis, College of Veterinary Medicine, Jilin University, Changchun 130062, China)

Received:2013-09-26 Online:2014-03-20 Published:2014-05-15

摘要/Abstract

摘要： 试验为制备抗κ-酪蛋白单克隆抗体并对其进行特性鉴定，采用足垫免疫κ-酪蛋白的方法刺激BALB/c小鼠产生免疫应答，将小鼠腘淋巴结细胞与骨髓瘤细胞在PEG诱导下进行融合，通过克隆化培养获得了能稳定分泌抗κ-酪蛋白抗体的杂交瘤细胞株，并利用Protein G亲和层析柱纯化腹水获得了单克隆抗体。试验获得了3株杂交瘤细胞株：1C4、3G3、3E6，所分泌的抗体亚类均为IgG1，其中3G3与3E6抗原识别表位不同，1C4与3E6抗原识别表位相近，1C4株腹水纯化后效价为1.28×10⁶，其亲和力常数为2.89×10⁸ mol/L。试验制备出了亲和力较好的抗κ-酪蛋白单克隆抗体，为牛奶酪蛋白的快速检测奠定了基础。

关键词: κ -酪蛋白; 单克隆抗体; 特性鉴定

Abstract: To obtain the anti-kappa casein monoclonal antibody and complete the identification of the antibody characteristics. The BALB/c mice were immunized with kappa casein using foot-pad immunization. Popliteal lymph node cells from the immunized mice were fused with SP2/0 myeloma cells in the presence of PEG. Three hybridoma strains (1C4, 3G3, 3E6) which secreted the antibody specific for kappa casein were obtained．The sub-class of the antibodies were IgG1. The ascites were purified by Protein G affinity layer absorption column. The antigenic epitope of 3G3 and 3E6 were different and it was close between 1C4 and 3E6.The titer of purified ascites(1C4) was 1.28×10⁶ and the affinity constant was 2.89×10⁸ mol/L. A anti-kappa casein monoclonal antibody with good affinity had been achieved，which provided foundations for the rapid detection of casein in bovine milk samples.

Key words: kappa casein; monoclonal antibody; characteristics identification

张莹，周玉，李岩松，孟星宇，褚晓红，卢士英，任洪林，胡盼，柳增善，王男男，李丹. 抗κ-酪蛋白单克隆抗体的制备及其特性鉴定[J]. 中国畜牧兽医.

ZHANG Ying, ZHOU Yu, LI Yan-song，MENG Xing-yu，CHU Xiao-hong，LU Shi-ying，REN Hong-lin，HU Pan，LIU Zeng-shan，WANG Nan-nan，LI Dan. Preparation and Characteristics Identification of Anti-kappa Casein Monoclonal Antibody[J]. .

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