猪瘟病毒E2蛋白主要抗原区编码基因的原核表达及抗原性研究

›› 2013, Vol. 40 ›› Issue (3): 43-45.

猪瘟病毒E2蛋白主要抗原区编码基因的原核表达及抗原性研究

刘萍¹, 王宏博², 祁光宇¹, 刘学荣¹, 牟克斌¹

1. 中农威特生物科技股份有限公司,甘肃兰州 730046;
2. 中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所,甘肃兰州 730050

收稿日期:2012-04-18 出版日期:2013-03-20 发布日期:2013-03-19
作者简介:刘萍(1979-),女,山东人,硕士,助理研究员,主要从事疫苗相关研究。
基金资助:
甘肃省科技计划资助(1008FCCA006)。

The Prokaryctic Expression of the Main Antigenic Domains of E2 Protein of Classical Swine Fever Virus and Study on its Antigenicity

LIU Ping¹, WANG Hong-bo², QI Guang-yu¹, LIU Xue-rong¹, MU Ke-bin¹

1. China Agriculural Veterinary Biological Science and Technology Co., Ltd., Lanzhou 730046, China;
2. Lanzhou Institute of Animal & Veterinary Pharmaceutics, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Lanzhou 730050, China

Received:2012-04-18 Online:2013-03-20 Published:2013-03-19

摘要/Abstract

摘要： 本试验旨在分析猪瘟病毒E2蛋白的免疫反应,应用RT-PCR方法扩增了编码猪瘟病毒兔化弱毒疫苗株C株囊膜糖蛋白E2基因主要编码区,并定向克隆到表达载体pET-30a-c(+)中,获得重组表达载体pET30a-E2,将其转化大肠杆菌Rosetta(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导表达。SDS-PAGE和Western blottin分析结果表明,E2基因获得高效融合表达,且具有免疫反应活性。本试验为建立E2抗原的检测试剂盒奠定基础。

关键词: 猪瘟病毒; E2蛋白; 原核表达; 抗原性

Abstract: This study was aimed to analyze antigenicity of E2 protein of classical swine fever virus (CSFV). The E2 was amplified by RT-PCR from the genomic RNA of CSFV C-strain and cloned into expression vector pET-30a-c(+) to obtain recombinant pET30a-E2. The truncated E2 protein was expressed with high level in transformed Rosetta (DE3) after induction with IPTG. The results of SDS-PAGE and Western blotting indicated that the gene cloned in downstream of pET30a-E2 was expressed in high level and the recombinant fusion protein had immunologically reactive.

Key words: classical swine fever virus; E2 protein; prokaryotic expression; antigenicity

中图分类号:

S852.65

刘萍, 王宏博, 祁光宇, 刘学荣, 牟克斌. 猪瘟病毒E2蛋白主要抗原区编码基因的原核表达及抗原性研究[J]. , 2013, 40(3): 43-45.

LIU Ping, WANG Hong-bo, QI Guang-yu, LIU Xue-rong, MU Ke-bin. The Prokaryctic Expression of the Main Antigenic Domains of E2 Protein of Classical Swine Fever Virus and Study on its Antigenicity[J]. , 2013, 40(3): 43-45.

[1]	焦琳琳, 成玉婷, 吴庆国, 吴双, 吴植, 朱善元, 钱莺娟. 鸭坦布苏病毒Capsid蛋白原核表达及多克隆抗体制备[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(6): 2395-2402.
[2]	李灿, 李楚楚, 曾维, 张宁, 纪春晓, 陈韬. 猪RegⅢγ蛋白的重组表达及功能研究[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(6): 2414-2426.
[3]	宋越, 苏胜杰, 张帆, 白帆, 戴伶俐, 王娜, 王大伟, 杨茜雯, 赵世华, 张月梅. 溶血性曼氏杆菌截短型白细胞毒素的原核表达及多克隆抗体制备[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(6): 2479-2486.
[4]	张芳源, 蔺雅婷, 杨大为, 陈虎, 李桂梅, 单虎. 非洲猪瘟病毒P30蛋白原核表达及间接ELISA检测方法建立[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(5): 2012-2022.
[5]	王雪平, 张孝俊, 李晓月, 王国栋, 张福良, 宋玉伟, 张明亮, 马磊. 高致病性禽腺病毒血清4型Hexon蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(5): 2053-2060.
[6]	胡乐玉, 胡欣瑶, 李颖, 赵盛淼, 沈凤臻, 王长法, 李亮亮, 王彤彤, 任慧英. 德州驴HO-1基因生物信息学分析及多克隆抗体制备[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(4): 1499-1510.
[7]	王文婕, 茹鹏辉, 郁川, 杜付熙, 陈松彪, 尚珂, 张春杰, 程相朝. 猫细小病毒洛阳分离株VP2蛋白原核表达及多克隆抗体制备[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(4): 1511-1521.
[8]	刘家兴, 韩雪英, 张鑫茹, 邓嘉昕, 姚伦广, 刘阳坤. 携带猪流行性腹泻病毒抗原表位的铁蛋白纳米颗粒制备与免疫原性分析[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(4): 1567-1574.
[9]	贾新月, 马静, 张艳艳, 马勋, 王正荣, 薄新文. 细粒棘球绦虫EGR-07243和EGR-07244基因生物信息学分析及原核表达[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(3): 847-858.
[10]	章志涛, 李祥龙, 孔令丽, 罗雨昕, 王冬英. 大片形吸虫丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶2A的原核表达及不同时期表达水平分析[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(3): 1107-1117.
[11]	侯浩宇, 郑南南, 吴宏举, 陈寅龙, 李潮, 张昂克, 姬鹏超, 万博, 杜永坤, 张改平. 非洲猪瘟病毒p30蛋白单克隆抗体制备和鉴定[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(3): 1241-1249.
[12]	甘露, 郑会珍, 诺明达来, 刘燕, 金敏, 何文文, 温丽翠, 李永畅, 巴音查汗·盖力克. 伊氏锥虫伊犁株扩繁及其PFR基因克隆表达和生物信息学分析[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(2): 469-478.
[13]	李朋霏, 宋晓明, 周保琨, 曹志, 张洪亮, 马清霞, 单虎. 用于非洲猪瘟病毒核酸检测的假病毒阳性对照品的制备和标定[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(2): 647-655.
[14]	吕双飞, 马勋, 王静, 孔翠莲, 寇丽君, 刘彩霞, 史唯地, 康立超, 任慧杰. 炭疽芽孢杆菌PA-LF1融合蛋白的原核表达及其反应原性研究[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(2): 674-683.
[15]	张凯, 张春平, 戈胜强, 孙春喜, 程杰, 伏春雨, 王刚, 牛星, 彭军. 非洲猪瘟病毒p22蛋白表达、多克隆抗体制备及间接ELISA方法的建立[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(1): 270-279.