新疆细毛羊pEGFP-C2-KAP6.1真核表达质粒的构建与鉴定

›› 2012, Vol. 39 ›› Issue (12): 17-20.

新疆细毛羊pEGFP-C2-KAP6.1真核表达质粒的构建与鉴定

沈文¹, 孙延鸣¹, 崔茹鹏¹, 鲁海富¹, 肖林晋¹, 石国庆²

1. 石河子大学动物科技学院,新疆石河子 832003;
2. 新疆农垦科学院畜牧所,新疆石河子 832003

修回日期:2012-06-11 出版日期:2012-12-20 发布日期:2012-12-19
通讯作者: 石国庆(1959-),男,研究员,博士,主要从事动物遗传育种与繁殖研究。
作者简介:沈文(1970-),男,湖北人,讲师,硕士,研究方向:生物化学与分子生物学。
基金资助:
转基因生物新品种培育重大专项(2009ZX08008-001B)。

Construction and Identify of the Eukaryotic Expression Plasmid of pEGFP-C2-KAP6.1 in Xinjiang Fine-wool Sheep

SHEN Wen¹, SUN Yan-ming¹, CUI Ru-peng¹, LU Hai-fu¹, XIAO Lin-jin¹, SHI Guo-qing²

1. College of Aimial Science and Technology,Shihezi University,Shihezi 832003,China;
2. Xinjiang Agricultural Reclamation Academy of Sciences that Animal Husbandry ,Shihezi 832003,China

Revised:2012-06-11 Online:2012-12-20 Published:2012-12-19

摘要/Abstract

摘要： 试验采集新疆细毛羊皮肤组织,提取RNA,采用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术扩增出KAP6.1基因,并通过DNA重组技术将该基因片段重组于pEGFP-C2真核表达载体上,构建pEGFP-C2-KAP6.1重组质粒,并进行PCR、酶切鉴定。结果表明,本试验成功构建了新疆细毛羊的pEGFP-C2-KAP6.1真核表达重组质粒,为进一步研究该基因所编码的蛋白与毛品质的关系,以及培育超细羊毛等经济性生物学性状相互关系提供理论依据。

关键词: 新疆细毛羊; pEGFP-C2载体; KAP6.1基因; 真核表达

Abstract: In the experiments, collected the skin tissues of Xinjiang fine-wool sheep, extracted RNA, used reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) to amplify the KAP6.1 gene, and the recombination of the gene recombined into the pEGFP-C2 eukaryotic expression vector through the recombinant DNA technique, constructed the pEGFP-C2-KAP6.1 recombinant plasmid, then did the identification of PCR and enzyme digestion. The results showed that we successfully constructed the pEGFP-C2-KAP6.1 eukaryotic expression recombinant plasmid of Xinjiang fine-wool sheep. In order to further study the relationship of the protein encoding by the gene and the wool qualities, and provide a theoretical basis for the cultivation of economy biological characteristics interrelationship of superfine wool.

Key words: Xinjiang fine-wool sheep; pEGFP-C2 vector; KAP6.1 gene; eukaryotic expression

中图分类号:

S826.8⁺1

沈文, 孙延鸣, 崔茹鹏, 鲁海富, 肖林晋, 石国庆. 新疆细毛羊pEGFP-C2-KAP6.1真核表达质粒的构建与鉴定[J]. , 2012, 39(12): 17-20.

SHEN Wen, SUN Yan-ming, CUI Ru-peng, LU Hai-fu, XIAO Lin-jin, SHI Guo-qing. Construction and Identify of the Eukaryotic Expression Plasmid of pEGFP-C2-KAP6.1 in Xinjiang Fine-wool Sheep[J]. , 2012, 39(12): 17-20.

[1]	潘鹏丞, 雷宗全, 李显, 胡湘云, 秦谦涛, 覃兆鲜, 关志惠, 陈宝剑, 谢炳坤. 陆川猪MYL2基因生物信息学分析、真核表达载体构建及组织表达研究[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(5): 1796-1806.
[2]	白少成, 周娟, 靳荣帅, 王璠, 卢婷婷, 汤先伟, 赵博昊, 吴信生, 陈阳. 新西兰白兔CYP11A1基因的克隆、生物信息学分析及其对繁殖相关基因的影响[J]. 中国畜牧兽医, 2022, 49(7): 2484-2496.
[3]	邹剑伟, 邹菊红, 申玉建, 韦一, 张叁保, 连子童, 徐建建, 宋颖, 黄艳娜, 韦英明, 蒋钦杨, 郑自华. 努比亚山羊LMCD1基因生物信息学分析、真核表达载体的构建及表达[J]. 中国畜牧兽医, 2022, 49(6): 2033-2042.
[4]	董媛, 于鸿绪, 陈国良, 鲍东博, 崔嘉芮, 刘磊, 王会岩. 牛妊娠相关蛋白19真核表达载体的构建及生物信息学分析[J]. 中国畜牧兽医, 2022, 49(4): 1233-1243.
[5]	庞峰, 龙琴琴, 梁绍波, 成虹松, 程振涛. 羊口疮病毒ORFV114蛋白生物信息学分析、真核表达及亚细胞定位[J]. 中国畜牧兽医, 2022, 49(11): 4150-4158.
[6]	曹颖颖, 李慧君, 李宝莹, 梁亮, 冷静, 唐海波. 瑶山亚种树鼩ISG15蛋白表达及其多克隆抗体制备[J]. 中国畜牧兽医, 2022, 49(1): 273-282.
[7]	胡换仪, 汪建中, 刘昌锦, 林敏, 刘小兰, 魏黄思梧, 邓舜洲. 绿色荧光蛋白的真核表达及其单克隆抗体制备[J]. 中国畜牧兽医, 2022, 49(1): 328-337.
[8]	乔连江, 陈晨, 张如, 崔立恒, 徐丽, 杨艳玲. RAW264.7细胞Rhoa和Ptgs2基因真核表达载体构建及生物信息学分析[J]. 中国畜牧兽医, 2021, 48(7): 2313-2323.
[9]	邹菊红, 申玉建, 高小童, 黄艳娜, 蒋钦杨. 努比亚山羊脂肪和肥胖相关蛋白基因克隆分析及真核表达载体构建[J]. 中国畜牧兽医, 2021, 48(7): 2342-2348.
[10]	焦文强, 刘运超, 邢广旭, 陈鹏举, 徐引弟, 王治方, 张青娴, 许峰. 猴源葡萄糖调节蛋白78生物信息学分析及其真核表达[J]. 中国畜牧兽医, 2021, 48(4): 1170-1178.
[11]	赵泓淙, 高登科, 江海圳, 李雅婷, 李丹, 马白荣, 靳亚平, 陈华涛. 山羊生物钟基因CLOCK真核表达载体的构建和生物信息学分析[J]. 中国畜牧兽医, 2021, 48(12): 4327-4338.
[12]	潘鹏丞, 温斌华, 谢婉, 姜长津, 焦迪, 陈宝剑, 关志惠, 谢炳坤. 陆川猪PDK4基因序列分析、真核表达载体构建及组织表达分析[J]. 中国畜牧兽医, 2020, 47(8): 2337-2347.
[13]	王召阳, 蒋亚君, 刘雪婷, 林伟东, 鑫婷, 侯绍华, 郭晓宇, 朱鸿飞, 贾红. 抗犬瘟热病毒VHH抗体噬菌体库的构建与筛选[J]. 中国畜牧兽医, 2020, 47(6): 1685-1693.
[14]	吕阳, 曹阳, 高一, 刘理想, 薛佳佳, 张国梁. 草原红牛AIDA基因克隆、生物信息学分析及真核表达载体的构建[J]. 《中国畜牧兽医》, 2019, 46(8): 2193-2202.
[15]	宋天琪, 侯绍华, 郭晓宇, 鑫婷, 姜一曈, 袁维峰, 朱鸿飞, 贾红. 重组犬α6干扰素的酵母表达及其抗病毒活性评价[J]. 《中国畜牧兽医》, 2019, 46(7): 2144-2150.