牛疱疹病毒Ⅰ型gB、gE基因的克隆及其杆状病毒表达载体的构建

›› 2012, Vol. 39 ›› Issue (10): 73-75.

牛疱疹病毒Ⅰ型gB、gE基因的克隆及其杆状病毒表达载体的构建

吴春涛, 李艳梅

东营职业学院生物与生态工程学院,山东东营 257091

收稿日期:2012-02-26 出版日期:2012-10-20 发布日期:2012-10-19
作者简介:吴春涛(1978-),男,山东人,硕士,主要从事微生物与免疫学研究。
基金资助:
东营职业学院院级课题(2010004) 。

Cloning of gB, gE Gene of Bovine Herpesvirus-1 and Construction of its Baculovirus Expression Vector

WU Chun-tao, LI Yan-mei

Biological and Ecological Engineering School of Dongying Vocational College, Dongying 257091, China

Received:2012-02-26 Online:2012-10-20 Published:2012-10-19

摘要/Abstract

摘要： 本试验用PCR方法扩增了牛疱疹病毒Ⅰ型(bovine herpesvirus-1,BHV-1)Bartha Nu/67株gB、gE基因片段,将其克隆到pGEM-T-easy载体。经转化、筛选、鉴定后将重组质粒经BamHⅠ和EcoRⅠ双酶切后,与经相同方法处理的杆状病毒转移载体pFastBacHTb连接,得到了重组质粒pFBHgB、pFBHgE。经酶切和测序鉴定后,将其转化入含穿梭载体Bacmid的感受态细胞DH10Bac,经抗性、蓝白斑筛选和PCR鉴定,得到了含gB、gE基因的重组穿梭载体。

关键词: 牛疱疹病毒Ⅰ型; gB、gE基因; 杆状病毒表达系统; 载体构建

Abstract: The gB and gE gene of bovine herpesvirus-1 Bartha Nu/67 strain were amplified by PCR.The gB and gE fragment were cloned into pGEM-T-easy vector. The gB and gE gene were subcloned into baculovirus transfer vector and the recombinant Baculovirus vector pFBHgB, pFBHgE were constructed successfully. Then they were transferred into E.coli DH10Bac and cultured in LB plate. The white bacterial colonies were positive recombinant bacmid named as BacmidgB, BacmidgE. Thus the result mentioned above laid down theoretical and practical foundations for the expression of gB and gE gene in insect cells.

Key words: bovine herpesvirus-1(BHV-1); gB, gE gene; baculovirus expression vector system; vector construction

中图分类号:

吴春涛, 李艳梅. 牛疱疹病毒Ⅰ型gB、gE基因的克隆及其杆状病毒表达载体的构建[J]. , 2012, 39(10): 73-75.

WU Chun-tao, LI Yan-mei. Cloning of gB, gE Gene of Bovine Herpesvirus-1 and Construction of its Baculovirus Expression Vector[J]. , 2012, 39(10): 73-75.

[1]	李佩韦, 张薇依, 成功, 昝林森. 秦川肉牛脂肪细胞PLIN2基因干扰siRNA筛选及过表达载体效率检测[J]. 中国畜牧兽医, 2021, 48(8): 2727-2735.
[2]	杜晓悦, 张良, 李慧萍, 刘淑英. 绵羊SUN2基因生物信息学分析及其在A549细胞中的表达[J]. 中国畜牧兽医, 2021, 48(11): 3929-3939.
[3]	段香媛, 武江利, 魏俏红, 冯毛. 蜂王浆主蛋白2在昆虫细胞-杆状病毒系统中的表达与鉴定[J]. 中国畜牧兽医, 2021, 48(10): 3779-3786.
[4]	吴玉莲, 叶升, 王国栋, 刘权辉, 黄奔. 山羊GATA3基因克隆及其真核表达载体构建[J]. 中国畜牧兽医, 2021, 48(1): 12-21.
[5]	李双星, 刘业兵, 柳方远, 吉婧, 杜吉革, 李倩琳, 朱真, 李启红, 陈小云, 印春生. 猫传染性腹膜炎病毒N蛋白在昆虫细胞-杆状病毒系统中的表达与鉴定[J]. 中国畜牧兽医, 2021, 48(1): 273-279.
[6]	王盛, 谢芝勋, 沈文康, 谢丽基, 范晴, 罗思思, 张艳芳, 曾婷婷, 黄娇玲, 张民秀, 谢志勤, 邓显文. 禽呼肠孤病毒σB和σC蛋白在昆虫细胞中的共表达[J]. 中国畜牧兽医, 2020, 47(5): 1334-1341.
[7]	崔佳瑜, 程隽如, 黄坚强, 张瑞门, 石德顺, 杨素芳, 邓彦飞. 水牛SIRT6基因克隆及其在组织中的表达分析[J]. 中国畜牧兽医, 2019, 46(9): 2526-2534.
[8]	何海健, 吴瑗, 王鲁彦, 李群景, 巴少波, 石林, 邵春艳, 孙静, 姜胜, 王晓杜. PEDV分离株S1基因的重组杆状病毒真核表达[J]. 《中国畜牧兽医》, 2019, 46(3): 832-839.
[9]	陈美荣, 林伟东, 宋天琪, 鑫婷, 郭晓宇, 黄克和, 贾红. CDV强毒BJ16B2株H基因在昆虫杆状病毒中的表达与鉴定[J]. 《中国畜牧兽医》, 2018, 45(8): 2041-2048.
[10]	陆杏蓉, 梁莎莎, 邓廷贤, 段安琴, 马小娅, 庞春英, 梁贤威. 水牛PTHLH基因克隆分析及其真核表达载体构建[J]. 《中国畜牧兽医》, 2018, 45(11): 2979-2988.
[11]	吴靖, 许健, 黄秀芬, 沈俊俊, 何后军, 李永清. 抗牛传染性鼻气管炎病毒囊膜gD糖蛋白的单链抗体在昆虫细胞中表达及活性检测[J]. 《中国畜牧兽医》, 2017, 44(8): 2475-2482.
[12]	呼凤丽, 徐丽媛, 张志飞, 周伟光. 靶向TLR9基因siRNA的筛选及其对BHV-1增殖规律的影响[J]. 《中国畜牧兽医》, 2017, 44(2): 303-310.
[13]	曹洋, 尤双, 姚洋, 李村院, 陈创夫, 倪伟, 胡圣伟. 环状RNA mmu-circ-Pax3.1表达载体的构建及初步验证[J]. 《中国畜牧兽医》, 2017, 44(10): 2865-2870.
[14]	吴植, 张继玲, 吴萌, 崔潇婷, 王安平. 输卵管特异表达人溶菌酶基因重组禽腺联病毒的构建及鉴定[J]. 《中国畜牧兽医》, 2017, 44(10): 2871-2877.
[15]	朱鹏, 庞春英, 段安琴, 邓廷贤, 陆杏蓉, 梁贤威. 水牛STAT4基因克隆分析及其真核表达载体的构建[J]. 《中国畜牧兽医》, 2016, 43(8): 1929-1937.