贵州地区羊口疮病毒B2L基因克隆及原核表达载体构建

›› 2011, Vol. 38 ›› Issue (7): 76-79.

贵州地区羊口疮病毒B2L基因克隆及原核表达载体构建

向智龙¹, 卓建华³, 程振涛^1,2, 欧德渊^1,2, 鲜思美^1,2, 尹传宝¹, 黄璐¹, 禾彩红¹

1. 贵州大学动物科学学院,贵州贵阳 550025;2. 贵州省动物疫病研究所,贵州贵阳 550025;3. 京山县畜牧兽医局,湖北京山 431800

收稿日期:2010-11-30 修回日期:1900-01-01 出版日期:2011-07-20 发布日期:2011-07-20
通讯作者: 程振涛

Cloning and Construction of Prokaryotic Expression Vector of B2L Gene of Orf Virus in Guizhou

XIANG Zhi-long¹, ZHUO Jian-hua³, CHENG Zhen-tao^1,2, OU De-yuan^1,2, XIAN Si-mei^1,2, YIN Chuan-bao¹, HUANG Lu¹, HE Cai-hong¹

1. College of Animal Science, Guizhou University,Guiyang 550025,China;2. Insitute of Animal Disease of Guizhou Province,Guiyang 550025,China;3. The Bureau of Livestock and Veterinary of Jingshan Country,Jingshan 431800,China

Received:2010-11-30 Revised:1900-01-01 Online:2011-07-20 Published:2011-07-20

摘要/Abstract

摘要： 用H2L基因特异性引物对羊口疮临床疑似病料进行鉴定,采用PCR扩增出阳性样品羊口疮病毒结构蛋白B2L基因,回收纯化PCR产物,克隆至pMD18-T,测序结果表明插入的片段为目的基因,全长1137 bp。将目的基因定向克隆至pET-32a构建了B2L基因原核表达载体pET-32a-B2L,经PCR鉴定、酶切及进一步测序证明表达载体构建成功,为下一步的表达及基因工程疫苗的研究奠定了良好基础。

关键词: 羊口疮病毒; 克隆; 原核表达载体

Abstract: To identify suspected goats orf case and construction of prokaryotic expression vector of B2L gene of orf virus (ORFV),clinical and suspect samples of orf could be amplified by a pair of specific primers,then the structural protein B2L gene of orf virus was amplified by PCR method using specific primers.The B2L gene was ligated with pMD18-T vector and the sequencing results showed that the full-length of the inserted gene fragment was 1137 kb. Cutting the target fragment,which was cloned into pET-32a vector and construction of prokaryotic expression vector pET-32a-B2L,the recombinant plasimid was identified by restriction enzyme and PCR,sequence analysis indicated that to be successful construction of pET-32a-B2L expression vector and it has laid a good foundation for the expression and genetic engineering vaccine research.

Key words: ORFV; clone; prokaryotic expression vector

中图分类号:

向智龙;卓建华;程振涛;欧德渊;鲜思美;尹传宝;黄璐;禾彩红. 贵州地区羊口疮病毒B2L基因克隆及原核表达载体构建[J]. , 2011, 38(7): 76-79.

XIANG Zhi-long;ZHUO Jian-hua;CHENG Zhen-tao;OU De-yuan;XIAN Si-mei;YIN Chuan-bao;HUANG Lu;HE Cai-hong. Cloning and Construction of Prokaryotic Expression Vector of B2L Gene of Orf Virus in Guizhou[J]. , 2011, 38(7): 76-79.

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