牛γ-干扰素单克隆抗体的制备及ELISA检测方法的建立

›› 2011, Vol. 38 ›› Issue (1): 72-75.

牛γ-干扰素单克隆抗体的制备及ELISA检测方法的建立

李超，林祥梅，梅琳，李全芬，韩雪清

（中国检验检疫科学研究院，北京 100029）

收稿日期:1900-01-01 修回日期:1900-01-01 出版日期:2011-01-01 发布日期:2011-01-01
通讯作者: 韩雪清

Developement of Monoclonal Antibody against Bovine Interferon-γ and Establishment of ELISA Detection Method

LI Chao,LIN Xiang-mei,MEI Lin,LI Quan-fen,HAN Xue-qing

(Chinese Academy of Inspection and Quarantine，Beijing 100029, China)

Received:1900-01-01 Revised:1900-01-01 Online:2011-01-01 Published:2011-01-01
Contact: HAN Xue-qing

摘要/Abstract

摘要： 建立牛结核病的γ-干扰素(BovIFN-γ)免疫学检测方法。本研究利用rBovIFN-γ抗原免疫Balb/c小鼠，经5次免疫后，通过淋巴细胞杂交瘤技术及间接ELISA筛选制备抗BovIFN-γ的单克隆抗体，在McAb及多克隆抗体的基础上建立双抗体夹心ELISA，并进一步优化ELISA反应条件。结果表明，获得一株能稳定分泌抗BovIFN-γ McAb的杂交瘤细胞株A12E9，分泌单克隆抗体腹水效价为1∶107，属于IgG1亚类，具有良好的特异性；所建立的双抗体夹心ELISA方法，BovIFN-γ最低检测限为40 ng/mL，与其他蛋白不发生交叉反应，表现出良好的特异性。该方法为建立牛结核病的γ-干扰素诊断方法奠定了基础。

关键词: 牛γ-干扰素; 单克隆抗体; 双抗体夹心ELISA

Abstract: Establish bovine tuberculosis BovIFN-γ diagnostic method. Balb/c mice were immunized 5 times with purified reccombinant BovIFN-γ protein, and the McAb against BovIFN-γ was prepared by hybridoma technique， then a double antibody sandwich ELISA method was developed based on the McAb and polyclonal antibody, and further optimized the reaction conditions. Finally, a hybridoma which stably secreted specific monoclonal antibody against BovIFN-γ was named A12E9. The titer of McAb was 1∶107, and the McAb belonged to IgG1 subclass. The sensitivity of double antibody sandwich ELISA method was 40 ng/mL, with good specificity. This method provides a basis for furth researches on the bovine tuberculosis BovIFN-γ diagnostic method.

Key words: BovIFN-γ; monoclonal antibody; double antibody sandwich ELISA

中图分类号:

李超;林祥梅;梅琳;李全芬;韩雪清. 牛γ-干扰素单克隆抗体的制备及ELISA检测方法的建立[J]. , 2011, 38(1): 72-75.

LI Chao;LIN Xiang-mei;MEI Lin;LI Quan-fen;HAN Xue-qing. Developement of Monoclonal Antibody against Bovine Interferon-γ and Establishment of ELISA Detection Method[J]. , 2011, 38(1): 72-75.

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