细菌人工染色体文库基因组DNA制备技术

›› 2010, Vol. 37 ›› Issue (5): 79-81.

细菌人工染色体文库基因组DNA制备技术

陈献伟1，2，王会2，关伟军2，高剑峰1

（1.石河子大学生命科学学院，石河子 832003； 2.中国农业科学院北京畜牧兽医研究所，北京 100193）

收稿日期:1900-01-01 修回日期:1900-01-01 出版日期:2010-05-20 发布日期:2010-05-20
通讯作者: 高剑峰

Research on the Preparation of Bacterial Artificial Chromosome Library Genomic DNA

CHEN Xian-wei1，2， WANG Hui2， GUAN Wei-jun2， GAO Jian-feng1

(1.College of Life Science，Shihezi University，Shehezi 832003，China； 2.Institute of Animal Science， Chinese Academy of Agricultural Sciences， Beijing 100193， China)

Received:1900-01-01 Revised:1900-01-01 Online:2010-05-20 Published:2010-05-20
Contact: GUAN Wei-jun

摘要/Abstract

摘要： 试验旨在对基因组DNA的制备进行研究，为细菌人工染色体(bacterial artificial chromosome，BAC)文库的构建奠定基础。以豁眼鹅全血为试验材料，提取高质量的基因组DNA，分别采用Hind Ⅲ、EcoR Ⅰ和BamH Ⅰ 3种限制性内切酶对所提基因组DNA进行部分酶切，并利用控制酶切时间、设置不同的Hind Ⅲ酶切浓度梯度对基因组DNA进行部分酶切。结果表明，Hind Ⅲ为最佳限制性内切酶，并得到了最佳酶切用量（40 U/μL）。该方法所制备的基因组DNA质量较好，可用于BAC文库的构建。

关键词: 细菌人工染色体; 基因组DNA; 限制性内切酶; 酶切

Abstract: This paper introduced a preparing method of genome DNA for a Huoyan goose and it laid a foundation for the constructing of bacterial artificial chromosome library .The genome DNA was extracted from a goose’s blood and digested by three restriction enzymes of Hind Ⅲ,EcoR Ⅰ and BamH Ⅰ. Meanwhile，different concentration gradients were set in order to get the optimal concentration of restriction enzyme.The results showed that Hind Ⅲ was the best enzyme and the optimal concentration of restriction enzyme was 40 U/μL. The genome DNA abstained by this method had a good quality and could be used to construct the bacterial artificial chromosome library.

Key words: bacterial artificial chromosome; genome DNA; restricted enzyme; digest

中图分类号:

Q343.2

陈献伟;;王会;关伟军;高剑峰. 细菌人工染色体文库基因组DNA制备技术[J]. , 2010, 37(5): 79-81.

CHEN Xian-wei;;WANG Hui;GUAN Wei-jun;GAO Jian-feng. Research on the Preparation of Bacterial Artificial Chromosome Library Genomic DNA[J]. , 2010, 37(5): 79-81.

[1]	豆玲, 李泽轩, 贾訸潇, 张彩云, 左富江, 李婷, 谢元江, 段晓雷. LwaCas13a蛋白的表达纯化与活性分析[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(7): 2941-2950.
[2]	宋尚桥, 马围围, 李晓剑, 曾素先, 李鑫, 严瑾, 孙翠翠, 黎宗强. 转座酶Tn3体外定向进化和酶活力提高方法的建立[J]. 中国畜牧兽医, 2020, 47(4): 984-991.
[3]	赵燕, 喻正军. 猪圆环病毒2型基因组DNA的结构与功能研究进展[J]. , 2016, 43(5): 1176-1181.
[4]	孙鹏, 苏帅, 李延鹏, 丁家波, 崔治中. 马立克氏病病毒meq基因缺失株细菌人工染色体序列自我敲除的分子鉴定[J]. , 2015, 42(2): 285-291.
[5]	万春和, 潘异哲, 陈红梅, 施少华, 傅光华, 程龙飞, 黄瑜. 区别鹅细小病毒和番鸭细小病毒的PCR-RFLP方法的建立[J]. 中国畜牧兽医, 2014, 41(9): 56-59.
[6]	何丽, 刘丑生, 韩旭. 细菌人工染色体(BAC)文库在畜禽遗传资源保存中的应用[J]. , 2013, 40(10): 188-192.
[7]	董浩;李菲;王鑫;王开;胡桂学. 猪瘟病毒野毒株与疫苗株酶切检测方法的建立、优化及应用[J]. , 2011, 38(9): 187-189.
[8]	周鑫;张晶;柴保国;王善强;郑振宇;. 淮南猪遗传特异性的RAPD分析[J]. , 2010, 37(9): 138-142.
[9]	韩伟东;王栋;朱化彬;郝海生;杜卫华;赵学明;王宗礼. 牛精子蛋白胶内酶切条件优化及问题分析[J]. , 2009, 36(7): 106-111.
[10]	刘志红;李宁;任立明;胡晓湘;郭英;崔文涛;尹俊;张文广;李金泉. 绒山羊细菌人工染色体BAC文库构建条件的优化[J]. , 2009, 36(10): 55-58.
[11]	宋文学;谢光洪;王哲. 分子生物学技术在临床兽医学上的应用[J]. , 2007, 34(6): 93-95.