牛精子蛋白胶内酶切条件优化及问题分析

›› 2009, Vol. 36 ›› Issue (7): 106-111.

牛精子蛋白胶内酶切条件优化及问题分析

韩伟东^1,2，王栋²，朱化彬²，郝海生²，杜卫华² ，赵学明²，王宗礼¹

(1.甘肃农业大学动物科学技术学院，兰州 730070 ； 2.中国农业科学院北京畜牧兽医研究所，北京 100193)

收稿日期:1900-01-01 修回日期:1900-01-01 出版日期:2009-07-20 发布日期:2009-07-20
通讯作者: 王宗礼

Optimization and Analysis of In-gel Digestion with Bovine Spermatozoa Protein

HAN Wei-dong^1,2， WANG Dong²， ZHU Hua-bin²， HAO Hai-sheng²， DU Wei-hua²， ZHAO Xue-ming², WANG Zong-li¹

(1.Faculty of Animal Science & Technology, Gansu Agricultural University, Lanzhou 730070, China；2.Institute of Animal Science, Chinese Academy of Agricultural Sciences， Beijing 100193, China)

Received:1900-01-01 Revised:1900-01-01 Online:2009-07-20 Published:2009-07-20
Contact: WANG Zong-li

摘要/Abstract

摘要： 针对银染蛋白的胶内酶切质谱鉴定成功率较低的技术现状，对影响牛精子蛋白酶切鉴定的酶量、酶切时间、凝胶存储时间等影响因素进行了摸索，并优化了挖点、脱色、脱水、酶切消化和抽提肽段等操作细节，同时对质谱峰图中出现的污染问题进行了分析解决，提高了蛋白鉴定的成功率，为牛精子蛋白质的质谱鉴定奠定了技术基础。

关键词: 双向电泳; 胶内酶切; 蛋白质组学

Abstract: The achievemet ratio of identifying protein of sliver stained through MALDI-TOF-MS is low. The following variables were studied to effect of in-gel digestion of silver-stained 2-D gels with bovine spermatozoa protein :enzyme concentration, degestion time and dry gel. And optimization of in-gel digestion of silver-stained 2-D gels is including spot excision, destaing, digestion and extraction. Contaminating protein was analyzed and solution in this paper in order to enhance achievement ratio of protein identity

Key words: two-dimenional gel electrophoresis; in-gel digestion; proteomics

中图分类号:

韩伟东;王栋;朱化彬;郝海生;杜卫华;赵学明;王宗礼. 牛精子蛋白胶内酶切条件优化及问题分析[J]. , 2009, 36(7): 106-111.

HAN Wei-dong;WANG Dong;ZHU Hua-bin;HAO Hai-sheng;DU Wei-hua;ZHAO Xue-ming;WANG Zong-li. Optimization and Analysis of In-gel Digestion with Bovine Spermatozoa Protein[J]. , 2009, 36(7): 106-111.

[1]	翁秀秀, 刘欣欣, 乐祥鹏, 李万宏, 李发弟. 基于双向电泳技术研究湖羊初乳和常乳乳蛋白质组差异[J]. 中国畜牧兽医, 2021, 48(3): 865-872.
[2]	杨佐青, 陶金忠, 陈信, 马瑞华, 张鑫荣. 一周岁内滩羊皮肤差异表达蛋白研究[J]. 《中国畜牧兽医》, 2017, 44(4): 986-993.
[3]	郭宪, 裴杰, 褚敏, 王宏博, 丁学智, 阎萍. 牦牛卵泡液差异蛋白质组双向电泳图谱的构建与质谱分析[J]. , 2015, 42(11): 3037-3043.
[4]	杨洁, 付雪峰, 黄锡霞, 徐新明, 石刚, 詹振宏, 张恩平, 田可川. 细毛羊皮肤组织中毛囊蛋白质2-DE图谱的建立与初步分析[J]. , 2015, 42(1): 124-130.
[5]	陆黎敏, 李庆章, 黄建国, 刘荣, 王佳丽, 金鑫, 高学军. 双向电泳分析蛋氨酸对奶牛乳腺上皮细胞核磷酸化蛋白质的影响[J]. , 2013, 40(6): 53-57.
[6]	赵东, 邢秀梅, 杨福合. 梅花鹿鹿茸总蛋白提取方法对双向电泳图谱的影响[J]. , 2012, 39(7): 25-28.
[7]	松杰, 董扬, 孟丽云, 杜琛, 苏蕊, 李金泉, 张文广. 内蒙古绒山羊皮肤蛋白质双向电泳条件优化及图谱建立[J]. , 2012, 39(7): 11-14.
[8]	王佳丽;高学军;李庆章;黄建国;陆黎敏;骆超超;刘荣;金鑫. 蛋氨酸对奶牛乳腺上皮细胞亚细胞蛋白质组的影响研究[J]. , 2012, 39(4): 109-112.
[9]	刘荣;髙学军;李庆章;黄建国;陆黎敏;骆超超;金鑫;王佳丽. 奶牛乳腺上皮细胞核蛋白质组双向电泳方法的建立[J]. , 2012, 39(2): 31-34.
[10]	唐婕;杨艳玲;王兴龙;郎需龙;李晓艳. 牛布鲁氏菌膜蛋白的免疫抗原筛选[J]. , 2010, 37(7): 136-139.