O型口蹄疫病毒VP1基因在2种原核表达载体上的表达

›› 2009, Vol. 36 ›› Issue (10): 65-67.

O型口蹄疫病毒VP1基因在2种原核表达载体上的表达

王海烽^1,2，易忠¹，魏玉荣¹，胡尔马西¹，符子华^1

（1.新疆畜牧科学院兽医研究所，乌鲁木齐 830000； 2.新疆农业大学动物医学学院，乌鲁木齐 830052）

收稿日期:1900-01-01 修回日期:1900-01-01 出版日期:2009-10-20 发布日期:2009-10-20
通讯作者: 符子华

Compare of O Type Foot and Mouth Disease Virus VP1 Gene in TwoProkaryotic Expression Vector

WANG Hai-feng^1,2, YI Zhong¹, WEI Yu-rong¹, Huermaxi¹, FU Zi-hua^1

(1.Veterinary Research Institute, Xinjiang Academy of Animal Sciences, Urumqi 830000, China;2.Animal Medical College, Xinjiang Agriculture University, Urumqi 830052, China)

Received:1900-01-01 Revised:1900-01-01 Online:2009-10-20 Published:2009-10-20
Contact: FU Zi-hua

摘要/Abstract

摘要： 设计1对引物将口蹄疫病毒（foot and mouth disease virus, FMDV）VP1基因克隆到T载体上，通过Nde I和Xho I双酶切VP1基因和pET-28(a)，在T4连接酶的作用下构建重组表达载体pET-28a-VP1；然后用EcoR I和Xho I双酶切VP1基因与pET-41（a），在T4连接酶的作用下构建重组表达载体pET-41a-VP1；然后将这2个新构建的载体分别通过热冲击法转化BL21（DE3），37 ℃不同IPTG浓度和32 ℃、0.01 mmol/L IPTG诱导表达，SDS-PAGE结果显示pET-28a-VP1的表达量高于pET-41a-VP1，在DTT和乙醇的作用下，二者均没有可溶性蛋白出现。

关键词: 口蹄疫病毒; VP1基因; 原核表达; 载体

Abstract: The foot and mouth disease virus VP1 gene was amplified by PCR and cloned into T vector, pET-28a-VP1 was achieved through pET-28a and T vector, were dual-enzyme digested by NdeI and XhoI; pET-41a-VP1 was achieved through pET-41a and T vector, were dual-enzyme digested by EcoR I and XhoI, respectively. Then both pET-28a-VP1 and pET-41a-VP1 were transformed into BL21, respectively. When 37 ℃, different IPTG concentrations and 32 ℃, 0.01 mmol/L IPTG inducible expression, the results showed that protein yield of pET-28a-VP1 more than pET-41a-VP1, moreover status of protein was not effected by DTT and ethanol.

Key words: FMDV; VP1 gene; prokaryotic expression; vector

中图分类号:

Q785

王海烽;易忠;魏玉荣;胡尔马西;符子华. O型口蹄疫病毒VP1基因在2种原核表达载体上的表达[J]. , 2009, 36(10): 65-67.

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