醋酸甲孕酮（MPA）间接竞争ELISA检测方法的建立

›› 2007, Vol. 34 ›› Issue (10): 124-126.

醋酸甲孕酮（MPA）间接竞争ELISA检测方法的建立

高艳兵1 ，叶绍辉1 ，龚振明2

1.云南农业大学动物科学技术学院,昆明 650201；2.上海交通大学农业与生物学院，上海 201101

收稿日期:1900-01-01 修回日期:1900-01-01 出版日期:2007-10-20 发布日期:2007-10-20

Establishment of Indirect Competitive Enzyme-linked Immunosorbent Assay for Detecting the Residues of MPA

GAO Yanbing1，YE Shaohui1,GONG Zhenming2

1.College of Animal Science, Yunnan Agricultural University, Kunming 650201,China; 2.School of Agriculture and Biology, Shanghai Jiaotong University,Shanghai 201101,China

Received:1900-01-01 Revised:1900-01-01 Online:2007-10-20 Published:2007-10-20

摘要/Abstract

摘要： 将半抗原醋酸甲孕酮（MPA）衍生物与牛血清白蛋白(BSA)偶联后，作为包被原与游离的醋酸甲孕酮竞争抗MPA多克隆抗体，通过该模式建立间接竞争ELISA方法检测MPA的残留量。试验结果表明：理想的包被抗原为0.625 μg/ml,抗体的工作浓度为1∶8000，标准曲线在1 ～50 ng/ml之间线性关系较好，最低检测限0.1 ng/ml, 得回归方程y=-1.1479x+0.9426(r2=0.9679),批内和批间变异系数分别为5. 35%、10. 89%。

关键词: 间接ELISA; 半抗原; 标准曲线

Abstract: Coupled with the BSA, hapten MPA, used as a coating antigen，combined with anti-MPA polyclonal antibody with the competition of free MPA. Indirect competition ELISA was set up according to abovementioned mode to detect the residue level of MPA in the example. The results of the experiment demonstrates that the optimal concentration of the coating antigen was 0.75 μg/ml. Polyclonal antibody against MPA was 1∶8000 and the standard curve had a good linearity in the rang of 1~50 ng/ml with detection limit being 0.1 ng/ml. The regression equation y=1.1479x+0.9426(r2=0.9679) were obtained while the coefficient of variation of intraassay and extra-assay were 5.35%,10.89% respectively. 

Key words: ciELISA; half antigen; standard curve 

中图分类号:

S859.84

高艳兵;叶绍辉;龚振明. 醋酸甲孕酮（MPA）间接竞争ELISA检测方法的建立 [J]. , 2007, 34(10): 124-126.

GAO Yanbing;YE Shaohui;GONG Zhenming. Establishment of Indirect Competitive Enzyme-linked Immunosorbent Assay for Detecting the Residues of MPA[J]. , 2007, 34(10): 124-126.

[1]	张芳源, 蔺雅婷, 杨大为, 陈虎, 李桂梅, 单虎. 非洲猪瘟病毒P30蛋白原核表达及间接ELISA检测方法建立[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(5): 2012-2022.
[2]	牛小杰, 徐明国, 肖莉, 刘文豪, 陈创夫, 王勇. 鸡白痢沙门氏菌IPAJ蛋白的表达纯化、多克隆抗体制备及ELISA方法的建立[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(3): 1218-1228.
[3]	张凯, 张春平, 戈胜强, 孙春喜, 程杰, 伏春雨, 王刚, 牛星, 彭军. 非洲猪瘟病毒p22蛋白表达、多克隆抗体制备及间接ELISA方法的建立[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(1): 270-279.
[4]	韩瑞, 杨行, 张文波, 陈佳玲, 周晓丽. 猪链球菌自溶素的原核表达及其抗体间接ELISA检测方法的建立[J]. 中国畜牧兽医, 2022, 49(9): 3508-3519.
[5]	张文燕, 王亚文, 袁晨, 冯亚文, 滕召剑, 商佳亮, 逯纪成, 宋勤叶. 基于非洲猪瘟病毒截短p72蛋白的间接ELISA抗体检测方法的建立[J]. 中国畜牧兽医, 2022, 49(7): 2688-2697.
[6]	田广原, 王宇琛, 周雅坪, 郭婷, 赵红梅, 赵逢淼, 孙雅婕, 卞宇晨, 于佳梁, 周雨霞. 绵羊肺炎支原体P60_58aa-928aa蛋白的原核表达及间接ELISA方法的建立[J]. 中国畜牧兽医, 2022, 49(5): 1960-1969.
[7]	陈静, 吴燕, 李梅, 岳筠, 朱二鹏, 文明, 张双翔, 程振涛. 丝状支原体山羊亚种LPPA蛋白原核表达及间接ELISA方法的建立[J]. 中国畜牧兽医, 2022, 49(1): 318-327.
[8]	李志强, 陶晨雨, 魏奥龙, 贾青. 猪性控精子纯度实时荧光定量PCR检测方法的建立[J]. 中国畜牧兽医, 2021, 48(10): 3682-3690.
[9]	王治平, 张云静, 孙玉洁, 徐鑫, 汪志艳, 黄柏成, 田克恭. 基于单克隆抗体捕获的猪血清和乳汁中PEDV IgA抗体间接ELISA方法的建立和评估[J]. 中国畜牧兽医, 2020, 47(7): 2248-2255.
[10]	苏倩, 冯陈晨, 赵学亮, 王金玲, 王文龙, 呼和巴特尔. 骆驼斯氏副柔线虫病间接ELISA检测方法的建立[J]. 《中国畜牧兽医》, 2019, 46(6): 1756-1763.
[11]	赵鹭, 葛志毅, 刘永生, 李学瑞, 曹小安. 羊种布鲁氏菌wzt基因的原核表达及间接ELISA方法的建立[J]. 中国畜牧兽医, 2019, 46(12): 3707-3714.
[12]	宋宏新, 韩波, 李珊, 薛海燕. 检测牛乳κ-酪蛋白的间接竞争ELISA法与间接ELISA法比较[J]. 《中国畜牧兽医》, 2018, 45(4): 1114-1119.
[13]	吴竞, 王西西, 吴映彤, 任肖, 郭晓宇. 非洲猪瘟病毒p30基因的原核表达及间接ELISA抗体检测方法的建立[J]. 《中国畜牧兽医》, 2018, 45(12): 3555-3562.
[14]	贾琦珍, 陈根元, 王连群, 亚森·麦麦提, 王帅. 苦马豆素单克隆抗体的制备与鉴定[J]. 《中国畜牧兽医》, 2017, 44(7): 2155-2159.
[15]	王园园, 潘丽, 吕建亮, 张中旺. 猪A型口蹄疫病毒特异性IgA抗体间接ELISA检测方法的建立与初步应用[J]. 《中国畜牧兽医》, 2017, 44(6): 1818-1824.