猪嵴病毒VP0基因的克隆与序列分析

doi:10.16431/j.cnki.1671-7236.2015.09.013

《中国畜牧兽医》---唯一指定的官方网站 ›› 2015, Vol. 42 ›› Issue (9): 2303-2307.doi: 10.16431/j.cnki.1671-7236.2015.09.013

猪嵴病毒VP0基因的克隆与序列分析

陈如敬¹, 修金生², 陈晓珞³, 吴学敏¹, 车勇良¹, 王晨燕¹, 严山¹, 王隆柏¹, 周伦江¹

1. 福建省农业科学院畜牧兽医研究所, 福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心, 福州 350013;
2. 福建农林大学动物科学学院, 福州 350002;
3. 龙岩市康顺养殖有限公司, 龙岩 364000

收稿日期:2015-04-27 出版日期:2015-09-20 发布日期:2015-09-25
通讯作者: 周伦江 E-mail:lunjiang@163.com
作者简介:陈如敬(1984-),男,福建连江人,硕士,助理研究员,研究方向:动物传染病,E-mail:fjchenrujing@163.com
基金资助:
福建省属公益类科研专项(2014R1102、2013R1025-8)

Cloning and Sequence Analysis of the VP0 Gene of Porcine Kobuvirus

CHEN Ru-jing¹, XIU Jin-sheng², CHEN Xiao-luo³, WU Xue-min¹, CHE Yong-liang¹, WANG Chen-yan¹, YAN Shan¹, WANG Long-bai¹, ZHOU Lun-jiang¹

1. Fujian Animal Disease Control Technology Development Center, Institute of Animal Husbandry and Veterinary Medicine, Fujian Academy of Agricultural Sciences, Fuzhou 350013, China;
2. College of Animal Science, Fujian Agricultural and Forestry University, Fuzhou 350002, China;
3. Kang Shun Culture Limited Company, Longyan 364000, China

Received:2015-04-27 Online:2015-09-20 Published:2015-09-25

摘要/Abstract

摘要： 本研究根据猪嵴病毒(porcine kobuvirus,PKV)VP0基因序列特征设计特异性扩增引物,采用RT-PCR方法扩增猪嵴病毒VP0基因全长编码区。将特异性扩增目的片段克隆后进行序列测定,将结果进行拼接后获得猪嵴病毒VP0基因全长并进行相关生物信息学分析。所扩增的目的片段编码有完整的VP0基因开放阅读框,全长为1 098 bp,编码有366个氨基酸,理论等电点为6.71,理论分子质量为38.489 ku,不稳定系数为34.65,最大疏水指数为2.622,最小疏水指数为—2.122。将获得的VP0基因和GenBank中的猪嵴病毒代表株VP0基因序列进行核苷酸同源性比对和遗传进化分析,其与HNXX-4核苷酸同源性最高,为89.1%,与S-1-HUN核苷酸同源性最低,为81.1%。从遗传进化上看,猪嵴病毒VP0基因在遗传进化上呈两个独立的基因亚群,猪嵴病毒中国分离株在两个遗传基因亚群上均有分布。

关键词: 猪嵴病毒; VP0基因; 克隆; 序列分析

Abstract: In this study, specific primers were designed according to VP0 gene of porcine kobuvirus (PKV), and the full-length coding region of VP0 gene was amplified by RT-PCR method and sequenced, then bioinformatics analysis were conducted to investigate the structure and function of the porcine kubovirus VP0 gene.The results showed that the porcine kobuvirus VP0 gene was 1 098 bp in length, coding an open reading frame (ORF) with 366 amino acids.The isoelectric point, molecular weight and instability index of porcine kubovirus VP0 were 6.71, 38.489 ku, 34.65, respectively.The maximum and minimum hydrophobicity were 2.622 and —2.122, respectively.Compared with the porcine kubovirus VP0 genes published previously in GenBank, the sequenced gene shared the highest homology with HNXX-4 strain, which was 89.1%;And shared the lowest homology with S-1-HUN strain, which was 81.1%.The porcine kubovirus VP0 gene shared two different phylogenetic genotype branches, and the Chinese porcine kubovirus isolates distributed in the two phylogenetic genotype branches.

Key words: porcine kobuvirus; VP0 gene; clone; sequence analysis

中图分类号:

S852.65

陈如敬, 修金生, 陈晓珞, 吴学敏, 车勇良, 王晨燕, 严山, 王隆柏, 周伦江. 猪嵴病毒VP0基因的克隆与序列分析[J]. 《中国畜牧兽医》---唯一指定的官方网站, 2015, 42(9): 2303-2307.

CHEN Ru-jing, XIU Jin-sheng, CHEN Xiao-luo, WU Xue-min, CHE Yong-liang, WANG Chen-yan, YAN Shan, WANG Long-bai, ZHOU Lun-jiang. Cloning and Sequence Analysis of the VP0 Gene of Porcine Kobuvirus[J]. , 2015, 42(9): 2303-2307.

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Cloning and Sequence Analysis of the VP0 Gene of Porcine Kobuvirus

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