%A 刘胜利, 刘玲玲, 吕玉金, 吴凤笋, 李文刚 %T 多重PCR结合基因芯片技术检测5种猪繁殖障碍性病毒病方法的研究 %0 Journal Article %D 2019 %J 中国畜牧兽医 %R 10.16431/j.cnki.1671-7236.2019.05.033 %P 1532-1540 %V 46 %N 5 %U {https://www.chvm.net/CN/abstract/article_7819.shtml} %8 2019-05-20 %X

为建立运用多重PCR和基因芯片技术同时检测5种猪繁殖障碍性病毒病的方法。本研究根据GenBank中登录的猪瘟病毒(CSFV)、猪细小病毒(PPV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪日本乙型脑炎病毒(JEV)及猪圆环病毒2型(PCV2)的基因序列设计特异性引物与探针,制备相应的寡核苷酸芯片,检测了5种猪繁殖障碍性疾病病毒的标准毒株,并对16份临床样品进行检测。通过多重PCR扩增出带有荧光标记的5种病毒的特异性基因片段,并与固定有特异性探针的基因芯片杂交。结果显示,本研究建立的多重PCR结合基因芯片检测方法特异性强、稳定性好,灵敏度可达102拷贝/μL。16份临床样品检测结果显示阳性率达87.5%(14/16)。以上结果表明该方法特异性好、灵敏度高,可高效检测以上5种病毒,为其临床诊断及流行病学调查提供了有效的检测方法。