猪伪狂犬病病毒LC株的分离鉴定及其重要功能基因的进化分析

doi:10.16431/j.cnki.1671-7236.2017.11.024

《中国畜牧兽医》 ›› 2017, Vol. 44 ›› Issue (11): 3278-3286.doi: 10.16431/j.cnki.1671-7236.2017.11.024

猪伪狂犬病病毒LC株的分离鉴定及其重要功能基因的进化分析

刘志成¹, 李新建², 张建峰¹, 沈海燕¹, 孙俊颖¹, 张春红¹

1. 广东省农业科学院动物卫生研究所, 广东省兽医公共卫生公共实验室, 广东省畜禽疫病防治研究重点实验室, 广州 510640;
2. 广州市华南农大生物药品有限公司, 广州 511300

收稿日期:2017-05-08 出版日期:2017-11-20 发布日期:2017-11-21
通讯作者: 张春红 E-mail:13660450420@139.com
作者简介:刘志成(1983-),男,山西大同人,硕士,助理研究员,研究方向:畜禽疫病诊断新技术,E-mail:rainman136@aliyun.com;李新建(1970-),男,湖北鄂州人,学士,兽医师,研究方向:畜禽疫病诊断防控,E-mail:13922701601@139.com
基金资助:
广东省科技计划项目（2016A040403084、2013B020315005、2014A020209061、2016B020212007、2016B020234006、2015B070701015）

Isolation, Identification and Phylogenetic Analysis of Important Functional Genes of Porcine Pseudorabies Virus LC Strain

LIU Zhi-cheng¹, LI Xin-jian², ZHANG Jian-feng¹, SHEN Hai-yan¹, SUN Jun-ying¹, ZHANG Chun-hong¹

1. Guangdong Provincial Key Laboratory of Livestock Disease Prevention, Guangdong Open Laboratory of Veterinary Public Health, Institute of Animal Health, Guangdong Academy of Agricultural Sciences, Guangzhou 510640, China;
2. Guangzhou South China Biological Medicine Co., Ltd., Guangzhou 511300, China

Received:2017-05-08 Online:2017-11-20 Published:2017-11-21

摘要/Abstract

摘要：

为确诊广东某猪场母猪流产发病原因，本研究收集该猪场流产死胎的脑、淋巴结、肺脏混合液，进行PCR鉴定、病毒分离培养、半数组织培养感染剂量（tissue culture infective dose，TCID₅₀）测定、猪伪狂犬病病毒（pseudorabies virus，PRV）重要功能基因（gB、gC、gD、gE）序列测定和进化分析及动物回归试验。结果显示，病料混合液为PRV阳性，接种Vero细胞传至第3代即出现稳定的细胞病变（CPE），第5代TCID₅₀达到10^-6.8/0.1 mL，PRV gB、gC、gD、gE基因序列测定、同源性及进化树分析显示为，PRV中国变异株，命名为LC株。动物试验显示，LC株对12周龄猪具有一定致病性，可形成PRV典型临床症状及病理变化。本研究分离到一株PRV流行毒株，推测当前使用疫苗Bartha-K61株尚无法完全控制新毒株的流行。

关键词: 猪; 伪狂犬病病毒(PRV); 分离鉴定; 进化分析

Abstract:

To find out the reason of the reproductive failure in pregnant sows in a hoggery in Guangdong, the mixture with brain, lymph nodes and lungs of farm abortion stillbirth were identified by PCR, virus isolation and culture, tissue culture infective dose (TCID₅₀) assay, homology and phylogenetic analysis of the important functional genes (gB, gC, gD and gE) and animal test. The results showed that the mixture was proved to be porcine pseudorabies virus (PRV) positive samples. The typical cytopathogenic effect was induced in the third passage of Vero cell and the titer of the fifth passage was 10^-6.8/0.1 mL. The sequence analysis and phylogenetic relationship of gB, gC, gD and gE genes showed that it was a Chinese PRV variant, which was named as LC strain. The typical pseudorabies clinical and pathological symptoms were presented in 12-week-old piglets inoculated with LC strain. The results demonstrated that a local pseudorabies virus had been isolated, suggesting that the Bartha-K61 vaccine was not fully effective for controlling the current epidemic of pseudorabies in China.

Key words: porcine; pseudorabies virus (PRV); isolation and identification; phylogenetic analysis

中图分类号:

S852.65⁺9.1

刘志成, 李新建, 张建峰, 沈海燕, 孙俊颖, 张春红. 猪伪狂犬病病毒LC株的分离鉴定及其重要功能基因的进化分析[J]. 《中国畜牧兽医》, 2017, 44(11): 3278-3286.

LIU Zhi-cheng, LI Xin-jian, ZHANG Jian-feng, SHEN Hai-yan, SUN Jun-ying, ZHANG Chun-hong. Isolation, Identification and Phylogenetic Analysis of Important Functional Genes of Porcine Pseudorabies Virus LC Strain[J]. , 2017, 44(11): 3278-3286.

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猪伪狂犬病病毒LC株的分离鉴定及其重要功能基因的进化分析

Isolation, Identification and Phylogenetic Analysis of Important Functional Genes of Porcine Pseudorabies Virus LC Strain

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