猪伪狂犬病病毒NP株gE、gI基因的克隆及序列分析

doi:10.16431/j.cnki.1671-7236.2015.09.007

《中国畜牧兽医》---唯一指定的官方网站 ›› 2015, Vol. 42 ›› Issue (9): 2262-2269.doi: 10.16431/j.cnki.1671-7236.2015.09.007

猪伪狂犬病病毒NP株gE、gI基因的克隆及序列分析

林群群, 郑小香, 陈鹏强, 陈秋勇, 曾显成, 胡崇伟, 修金生

福建农林大学动物科学学院, 福州 350002

收稿日期:2015-03-04 出版日期:2015-09-20 发布日期:2015-09-25
通讯作者: 修金生 E-mail:xiujinsheng@163.com
作者简介:林群群(1988-),男,福建龙岩人,硕士,研究方向:动物传染病的诊断与防治,E-mail:linqunqun1988@163.com
基金资助:
福建省农业科学技术项目(2014-01);福建省自然科学基金项目(2013J05042)

Cloning and Sequence Analysis of gE and gI Genes of Pseudorabies Virus NP Isolate

LIN Qun-qun, ZHENG Xiao-xiang, CHEN Peng-qiang, CHEN Qiu-yong, ZENG Xian-cheng, HU Chong-wei, XIU Jin-sheng

College of Animal Sciences, Fujian Agricultural and Forestry University, Fuzhou 350002, China

Received:2015-03-04 Online:2015-09-20 Published:2015-09-25

摘要/Abstract

摘要： 根据GenBank中已发表的猪伪狂犬病病毒(PRV) gE、gI基因的序列设计了2对引物,对PRV NP株的gE、gI基因进行了PCR扩增、回收、克隆、测序,测序结果与预期的PRV gE、gI基因片段相符。同源性比对分析结果显示,PRV NP株gE、gI基因推导的氨基酸序列与国内分离的PRV毒株的同源性分别为95.7%~99.8%、89.9%~99.5%。遗传进化树分析和氨基酸序列比对结果发现PRV NP株的gE氨基酸序列发生变化的位点与2012年国内分离到的PRV流行株相同,从而推测NP株为PRV变异毒株,本研究为PRV的流行病学调查分析奠定了基础,也为开发科学、有效的新型猪伪狂犬病(PR)疫苗提供科学依据。

关键词: 猪伪狂犬病病毒(PRV); gE基因; gI基因; 序列分析

Abstract: According to published gE and gI gene sequences of pseudorabies virus (PRV) in GenBank, we designed two pairs of primers for PCR amplification of gE and gI genes of PRV NP isolate, after PCR products recycling, cloning and sequencing, the sequencing results were consistent with expectations of PRV gE and gI genes.Homology comparison analysis results revealed that compared with the domestic PRV strains, the homologies of gE and gI amino acids of PRV NP isolate were 95.7% to 99.8% and 89.9% to 99.5%, respectively.Phyogenetic tree analysis and amino acid sequence alignment results found that the gE amino acid sequence site changes of PRV NP isolate were the same with the PRV strains which were isolated from domestic in 2012, thus we could speculate that PRV NP isolate had mutanted.This study had laid the foundation for the epidemiological investigation and analysis of PRV, also provided the scientific basis for the development of scientific, effective and new pseudorabies vaccine.

Key words: pseudorabies virus (PRV); gE gene; gI gene; sequence analysis

中图分类号:

林群群, 郑小香, 陈鹏强, 陈秋勇, 曾显成, 胡崇伟, 修金生. 猪伪狂犬病病毒NP株gE、gI基因的克隆及序列分析[J]. 《中国畜牧兽医》---唯一指定的官方网站, 2015, 42(9): 2262-2269.

LIN Qun-qun, ZHENG Xiao-xiang, CHEN Peng-qiang, CHEN Qiu-yong, ZENG Xian-cheng, HU Chong-wei, XIU Jin-sheng. Cloning and Sequence Analysis of gE and gI Genes of Pseudorabies Virus NP Isolate[J]. , 2015, 42(9): 2262-2269.

参考文献

[1] 于康震,白文彬.动物传染病诊断学[M].北京:中国农业出版社,2002.

[2] Zhu L,Yi Y,Xu Z W,et al.Growth physicochemical properties,and morphogenesis of Chinese wild-type PRV Fa and its gene-deleted mutant strain PRV SA215[J].Virol J,2011,8:272.

[3] 陈磊,张普安,李岩,等.猪伪狂犬病研究进展[J].动物医学进展,2004,25(5):51-55.

[4] 刘景华,殷震.动物病毒学[M].第2版.北京:科学出版社,1997.

[5] 斯特劳B E,阿莱尔S D,蒙加林W L,等.猪病学[M].第8版.北京:中国农业大学出版社,2000.

[6] Kirten P,Muylkens B,Thiry J,et al.Bovine herpesvirus 1 infection and infectious bovine rhinotracheitis[J].Vet Res,2007,38(2):181-209.

[7] Favoreel H,Glorieux S,Nauwynck H,et al.Cell biological and molecular characteristics of pseudorabies virus infections in cell cultures and in pigs with emphasis on the respiratory tract[J].Vet Res,2007,38(2):229-241.

[8] Müller T,Hahn E C,Tottewitz F,et al.Pseudorabies virus in wild swine:A global perspective[J].Arch Virol,2011,156(10):1691-1705.

[9] Kritas S K,Pensaert M B,Mettenleiter T C.Role of envelope glycoproteins gⅠ,gp63 and gⅢ in the invasion and spread of Aujeszky's disease virus in the olfactory nervous pathway of the pig[J]. J Gen Virol,1994,75(9):2319-2327.

[10] An T Q,Pen J M G,Tian Z J,et al.Pseudorabies virus variant in Bartha-K61-vaccinated pigs,China,2012[J].Emerg Infect Dis,2013,19(11):1749-1755.

[11] 安同庆,赵鸿远,彭金美,等.猪伪狂犬病病毒变异株的分离鉴定及其gE基因的分子特征[J].中国预防兽医学报,2014,36(7):506-509.

[12] 陈红英,高晓云,郭小参,等.猪伪狂犬病病毒原阳株gE全基因的克隆与序列分析[J].国外畜牧学:猪与禽,2014,3:58-60.

[13] Hu D M,Yu X L,Zhou Z,et al.Pathogenic pseudorabies virus,China,2012[J]. Emerg Infect Dis,2014,20(1):102-104.

[14] Bai C Y,Sun J Z,Wu R,et al.Emergence of virulent pseudorabies virus infection in Northern China[J].J Vet Sci,2013,14(3):363-365.

[15] Wang C H,Yuan J,Qin H Y,et al.A novel gE-deleted pseudorabies virus (PRV) provides rapid and complete protection from lethal challenge with the PRV variant emerging in Bartha-K61-vaccinated swine population in China[J].Vaccine,2014,32(27):3379-3385.

[16] 尤超,赵大球,梁乘榜,等.PCR引物设计方法综述[J].现代农业科技,2011,17:48-51.

[17] Robbins A K,Solomon K A,Whealy M E,et al.The putative cytoplasmic domain of the pseudorabies virus envelope protein gⅢ,the herpes simplex virus type 1 glycoprotein C homolog,is not required for normal export and localization[J].J Virol,1990,64(7):3516-3521.

[18] Enquist L W,Tirabassi R S.Role of envelope protein gE endocytosis in the pseudorabies virus life cycle[J].J Virol,1998,72(6):4571-4579.

[19] Tirabassi R S,Enquist L W.Mutation of the YXXL endocytosis motif in the cytoplasmic tail of pseudorabies virus gE[J].J Virol,1999,73(4):2717-2728.

[20] Tirabassi R S.Characterization of pseudorabies virus mutants expressing carboxyterminal truncations of gE:Evidence for envelope incorporation virulence and neurotropism domains[J].J Virol,1997,71(9):6455-6464.

[21] Taylor M P,Lyman M G,Kramer T,et al.Visualization of an alpha herpesvirus membrane protein that is essential for anterograde axonal spread of infection in Neurons[J].mBio,2012,3(2):e00063.

[22] 张春玲,倪健强,童光志.伪狂犬病病毒gE基因主要抗原表位区的原核表达及其在疫苗接种和自然感染鉴别诊断中的应用[J].生物工程学报,2004,20(4):526-531.

[23] 车勇良,陈少莺,俞伏松,等.PRV FB弱毒株与FA株gE、gI基因的同源性研究[J].西北农林科技大学学报(自然科学版),2006,34(11):37-41.

[24] 林健,杨志远,韩春华,等.某规模化猪场猪伪狂犬病的诊断[J].中国畜牧兽医,2013,40(12):185-189.

猪伪狂犬病病毒NP株gE、gI基因的克隆及序列分析

Cloning and Sequence Analysis of gE and gI Genes of Pseudorabies Virus NP Isolate

可视化

摘要/Abstract

引用本文

使用本文

参考文献

相关文章 15

编辑推荐

Metrics

本文评价

[1]	张婧旭, 徐玉, 梁海英, 曾智勇, 汤德元, 王彬, 徐松平, 万娟, 祝羊. 伪狂犬病病毒贵州分离株与疫苗株遗传进化和抗原表位分析[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(3): 1093-1106.
[2]	谢思豪, 勾红潮, 卞志标, 李斌, 蔡汝健, 臧莹安, 李春玲. MLKL基因敲除对猪伪狂犬病病毒复制的影响[J]. 中国畜牧兽医, 2022, 49(5): 1934-1941.
[3]	宋春, 王柏林, 李梅, 文明, 王开功, 陈常秀, 程振涛. 鸡滑液囊支原体贵州株的分离鉴定及VlhA基因序列分析[J]. 中国畜牧兽医, 2022, 49(4): 1516-1523.
[4]	韦云芳, 李飞翔, 星云, 黄庆国, 李居东, 万九生, 陈方良. 昆明犬IGF2基因克隆、生物信息学分析及其时空表达研究[J]. 中国畜牧兽医, 2022, 49(3): 866-875.
[5]	何献铭, 任广彩, 叶俊贤, 兰虹, 刘郁夫, 熊挺, 杨泽坤, 徐婷, 陈瑞爱. 1株传染性法氏囊病病毒的分离鉴定及VP2基因序列分析[J]. 中国畜牧兽医, 2022, 49(3): 1005-1014.
[6]	蔡杰, 吴佳怡, 潘苑霞, 呼高伟, 张林州. 1株大黄鱼源金黄杆菌的分离鉴定和耐药性分析[J]. 中国畜牧兽医, 2022, 49(3): 1135-1143.
[7]	胡晓冰, 林标声, 王振伟, 郑黎静. 1株利用乳酸的猪源丁酸梭菌的分离鉴定及基因组序列分析[J]. 中国畜牧兽医, 2022, 49(2): 569-578.
[8]	寇美玲, 苗海生, 李乐, 谢佳芮, 李华春, 宋建领. 云南边境地区帕利亚姆血清群中山病病毒的分离与鉴定[J]. 中国畜牧兽医, 2022, 49(11): 4401-4409.
[9]	汪志艳, 孙玉洁, 徐鑫, 黄柏成, 田克恭. 猪δ冠状病毒HeN10株的分离鉴定及致病性研究[J]. 中国畜牧兽医, 2021, 48(8): 2982-2989.
[10]	刘健, 白艺兰, 鞠厚斌, 潘子豪, 俞向前, 杨显超, 朱晓英, 葛菲菲, 葛杰, 于讳茹, 陶田谷晟, 王建, 赵洪进. 犬瘟热病毒SH202003株全基因组序列分析[J]. 中国畜牧兽医, 2021, 48(7): 2559-2568.
[11]	李楠, 何于雯, 左媛媛, 孟锦昕, 徐天刚, 王静林. 蠓虫源盖塔病毒(SZC30)结构基因分子生物学特征分析[J]. 中国畜牧兽医, 2021, 48(4): 1149-1160.
[12]	张琪, 陈浩田, 单家宝, 常蕊, 张雪, 王尧, 王君伟, 马波. 吉林地区1株小鹅瘟病毒NS1和VP1基因的克隆与序列分析[J]. 中国畜牧兽医, 2021, 48(4): 1161-1169.
[13]	郭梦娇, 李明桃, 谭惠惠, 张成成, 张小荣, 吴艳涛. 兔NLRC3基因克隆及其表达特性研究[J]. 中国畜牧兽医, 2021, 48(11): 3940-3949.
[14]	王征帆, 朱利塞, 李菲, 向蕊, 李祎云, 应碧云, 王贵平, 白挨泉, 贾爱卿. 猪德尔塔冠状病毒CH7328株的致病性及全基因组序列分析[J]. 中国畜牧兽医, 2021, 48(11): 4143-4153.
[15]	张莉, 任卫科, 路超, 李秀丽, 李富强, 田向学, 池晶晶, 王利丽, 江珊, 董志民, 鄢明华. 2015－2020年天津地区猪伪狂犬病病毒gB、gC、gE基因遗传变异分析[J]. 中国畜牧兽医, 2021, 48(10): 3741-3751.